Патенты автора Марков Евгений Юрьевич (RU)
Изобретение относится к лабораторной диагностике и иммунологии, и может быть использовано для обнаружения возбудителя псевдотуберкулеза. Способ включает: нанесение исследуемого материала на подложку с размером пор 0,17-0,45 мкм, на которую точечно наносят исследуемый материал в объеме 1-2 мкл, после полного впитывания исследуемого материала подложку промывают дважды физиологическим раствором, затем помещают в 2% раствор бычьего сывороточного альбумина на физиологическом растворе на 15 мин, затем подложку двукратно промывают физиологическим раствором, однократно дистиллированной водой и помещают в раствор иммуноглобулина G, выделенного из агглютинирующей псевдотуберкулезной сыворотки, меченного частицами коллоидного серебра размером 5-9 нм, с экспозицией на 40 мин. После этого двукратно промывают подложку физиологическим раствором и однократно - дистиллированной водой, затем погружают ее на 3 мин в проявитель, при этом проявитель представляет собой водный раствор, состоящий из 0,5% лимонной кислоты, 0,1% метола и 0,2% азотнокислого серебра и затем промывают проточной водой. Затем визуально определяют наличие возбудителя псевдотуберкулеза в исследуемом материале. Если на подложке в местах нанесения материала формируются пятна, окрашенные в серый цвет от темно-серого до светло-серого, то исследуемый материал содержит возбудитель псевдотуберкулеза, если на подложке нет окрашивания - материал не содержит возбудителя псевдотуберкулеза. Способ позволяет обнаруживать минимальные количества возбудителя псевдотуберкулеза, экспрессен (общее время проведения анализа -1 ч 10 мин), экономичен, прост в постановке и учете результатов реакции, доступен для широкого применения, в том числе в полевых условиях, не требует оснащения дорогостоящими реактивами, оборудованием и специально обученного персонала. 4 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу обеззараживания микроорганизмов, и может быть использовано для обеззараживания псевдотуберкулезного микроба. Сущность: клетки псевдотуберкулезного микроба культивируют при 28°С в течение 48 ч на плотной питательной среде, смывают забуференным (рН 7,2) физиологическим раствором и получают взвесь концентрацией 1×109-90×109 микробных клеток в 1 мл. В микробную взвесь добавляют раствор мочевины в концентрации от 6 до 8 М в соотношении по объему 1:1 и инкубируют в течение 24 ч при температуре 20-25°С. Способ позволяет расширить арсенал способов обеззараживания псевдотуберкулезного микроба. 4 пр.
Изобретение относится к способу получения препаратов субклеточных фракций туляремийного микроба, включающему получение путем выращивания культуры Francisella tularensis с последующей ее инактивацией, отделением от низкомолекулярных примесей, выделением целевого продукта. Способ характеризуется тем, что препарат, полученный предложенным способом, может использоваться для изучения ферментативной активности, для чего инактивацию и дезинтеграцию бактериальной массы независимо от подвидовой принадлежности проводят стерильным раствором мочевины путем смешивания бактериальной массы в концентрации 40 млрд м. к./мл и 9 М раствором мочевины в соотношении по объему 1:1 при комнатной температуре в течение 24 часов, очистку препарата проводят дифференциальным центрифугированием. Преимущество предлагаемого способа заключается в простоте, воспроизводимости для штаммов разной подвидовой принадлежности и вирулентности, снижении трудоемкости и затрат времени за счет сокращения этапов в работе, дает возможность работать с обеззараженным биологическим материалом, сохраняющим ферментативную активность. 5 пр.
СПОСОБ ДЕТЕКЦИИ БОТУЛИНИЧЕСКИХ ТОКСИНОВ // 2517120
Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно - к лабораторной диагностике и иммунологии, и может быть использовано для проведения исследований клинического материала и пищевых продуктов на наличие ботулотоксинов. Сущность: твердую подложку с размером пор 0,17-0,45 мкм погружают на 1 ч в раствор поливалентной противоботулинической сыворотки, разведенной 1:100 0.01 M фосфатным буфером pH 7.2, далее подложку высушивают на воздухе, затем точечно наносят исследуемый материал в объеме 1-2 мкл. После полного впитывания исследуемого материала подложку промывают дважды 0.01 M фосфатным буфером pH 7.2, содержащим 0.05% твина 20, затем помещают подложку в 2%-ный раствор БСА на ФБР или 2%-ный раствор казеината натрия на ФБР на 30 мин. После чего подложку двукратно промывают ФБР-твином и затем помещают ее в раствор поливалентной противоботулинической сыворотки, меченной частицами коллоидного серебра, на 1 ч. После этого погружают подложку на 3-5 мин в водный раствор, содержащий 0.5% лимонной кислоты, 0.1% метола и 0.2% азотнокислого серебра, и затем промывают подложку проточной водой. После чего визуально определяют наличие ботулинических токсинов в исследуемом материале: если на подложке формируются серые пятна в местах нанесения материала, то исследуемый материал содержит ботулинические токсины, если на подложке нет окрашивания - материал не содержит ботулинических токсинов. Способ позволяет обнаруживать минимальные количества ботулотоксинов, экспрессен, экономичен, прост в постановке и учете результатов реакции, доступен для широкого применения, может осуществляться в полевых условиях, не требует оснащения дорогостоящими реактивами и оборудованием. 1 з.п. ф-лы, 4 пр.
Изобретение относится к области биохимии и микробиологии и может быть использовано для определения липолитической активности в субклеточных фракциях бактерий. Сущность способа состоит в том, что среда, содержит агарозу или агар (500 мг), неионный детергент (50 мкл), хлористый кальций (12,5 мг), 0,05 М Трис-HCl буфер pH 8,3 (до 100 мл), причем после застывания среды в ней делают лунки, в которые вносят исследуемый образец в объеме 10-50 мкл на одну лунку, затем среду с исследуемым образцом инкубируют при 37°C в течение 12 часов и визуально определяют наличие или отсутствие липолитической активности в исследуемом образце. При наличии липолитической активности наблюдают матовые ореолы вокруг лунки, при отсутствии липолитической активности среда вокруг лунки остается прозрачной. Использование заявленного способа позволяет просто, доступно и экономично определить липолитическую активность субклеточных фракций бактерий. 3 з.п. ф-лы, 6 пр.
Изобретение относится к области медицины и ветеринарии, а именно к микробиологии и иммунологии
СПОСОБ ОБНАРУЖЕНИЯ АНТИГЕНОВ ЧУМНОГО МИКРОБА // 2408021
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике
