Патенты автора Лопатина Ольга Алексеевна (RU)
Способ определения степени раздражающего действия дезинфекционных средств на кожу человека // 2681874
Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ определения степени раздражающего действия дезинфекционных средств на кожу человека, заключающийся в том, что культуру клеток Chang conjunctiva рассеивают на 96-луночную панель по 100 мкл в каждую лунку в концентрации 1×105 клеток/мл в питательной среде Игла-MEM с 10% эмбриональной телячьей сывороткой (ЭТС). Для формирования монослоя клеток панель инкубируют в термостате в атмосфере 5% СО2 при температуре 37°С в течение 24 часов. После инкубации культуральную среду меняют на среду, содержащую 2% ЭТС по 100 мкл в каждую лунку. Затем образцы дезинфекционных средств (ДС) раститровывают непосредственно в лунках с клетками Chang conjunctiva методом двукратных серийных разведений в трех повторах на точку, оставляя три контрольные лунки с монослоем клеток свободными от внесения ДС. Панель помещают в термостат, инкубируют в атмосфере 5% СО2 при температуре 37°С в течение 24 часов. После инкубирования КС из лунок удаляют и добавляют в каждую лунку по 100 мкл среды ИГЛА-МЕМ с 20 мкл реактива МТТ в концентрации 5 мг/л. После 4-х часового инкубирования в термостате в атмосфере 5% СО2 при температуре 37°С среду с реактивом МТТ удаляют и вносят по 100 мкл ДМСО для растворения восстановленного клетками формазана. После 5 минутной выдержки измеряют оптическую плотность раствора формазана в каждой из лунок на спектрофотометре при длине волны 545 нм, после чего сравнивают оптическую плотность (ОП) растворов, полученных после культивирования, с образцами ДС с оптической плотностью растворов контрольных лунок (ОПк). При равенстве ОП и ОПк по величине соответствующего минимального нетоксического разведения выносят суждение о степени раздражающего действия ДС на кожу человека: отсутствие, слабое, умеренное или выраженное. Изобретение обеспечило возможность повышения точности исследований.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к активации роста клеток в питательной среде животных и человека, и может быть использовано в клеточной терапии
