Патенты автора Подладчикова Ольга Николаевна (RU)

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к рекомбинантной плазмиде pSC-A-5EV. Плазмида pSC-A-5EV предназначена для экспрессии клонированных генов биосинтеза сидерофора иерсиниахелина Y. pestis. Указанная плазмида содержит ПЦР-копию четырех генов (уро1529-1532) биосинтеза сидерофора иерсиниахелина Y. pestis длиной 5,6 т.п.н. Указанная ПЦР-копия получена на матрице хромосомной ДНК Y. pestis EV76 с помощью праймеров p1529 (CCAAGTTCCTGCATTAGACAGA) и p1532r (CGTTGCCGGATCATTACTGACCCTGAAT). Настоящее изобретение также относится к способу конструирования плазмиды pSC-A-5EV и к рекомбинантному штамму Y. pestis КМ1986. Указанный штамм является суперпродуцентом сидерофора иерсиниахелина возбудителя чумы и представляет собой продукт трансформации плазмидой pSC-A5EV штамма Y. pestis, не синтезирующего собственный сидерофор иерсиниахелина. Изобретение позволяет получать сидерофор иерсиниахелина Y. pestis с высоким выходом. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 3 пр.

Группа изобретений касается ингибитора секреции сидерофоров (SSI) и способа его выделения. Представленный способ получения SSI включает следующие этапы. Штамм Yersinis pestis КМ 1279 выращивают на 1,5% агаре LB, бактерии трехкратно отмывают холодным забуференным физраствором. Бактерии осаждают центрифугированием, суспендируют в растворе 5 мМ NaOH, выдерживают при 37°C два часа и осаждают клетки центрифугированием. Супернатант отбирают и процедуру повторяют трижды, три супернатанта объединяют и фильтруют через нитроцеллюлозную мембрану. Фильтрат трехкратно экстрагируют смесью хлороформ-метанол-вода в соотношении 5:2:1. Хлороформные фракции отделяют центрифугированием, объединяют и освобождают от водорастворимых примесей. Водную фракцию отделяют центрифугированием и удаляют, а хлороформную фракцию высушивают в вакуумном роторном испарителе и получают сухой препарат SSI. Предложенный SSI характеризуется коричневой окраской сухих кристаллов, гидрофобными свойствами, флуоресценцией в ультрафиолете, липопептидной природой, присутствием ионов железа, молекулярной массой 380,6 Да. Представленные изобретения позволяют получить природный регулятор вирулентности возбудителя чумы. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 3 фото, 6 пр.

Изобретение относится к медицинской химии и сельскому хозяйству, а именно к препаратам, используемым для борьбы с инфекционными заболеваниями людей, животных и растений

 


Наверх