Патенты автора Мудрик Николай Николаевич (RU)

Изобретение относится к области биохимии и молекулярной биологии, а именно к способу очистки синтетических олигодезоксирибонуклеотидов. Основной задачей настоящего изобретения является разработка эффективного способа очистки олигодезоксирибонуклеотидов с высоким выходом и высокой степенью очистки от производных кремниевой кислоты, пригодного для крупномасштабного синтеза. Поставленная техническая задача достигается способом очистки G-богатых олигодезоксирибонуклеотидов размером 20-50 оснований от примесей производных кремниевой кислоты, включающие следующим последовательные операции: - используют синтезированные на подложке CPG (СКРП, controlled pore glass) олигодезоксирибонуклеотиды, где последняя диметокситритильная защита не удалена, - готовят раствор олигодезоксирибонуклеотида, для чего к 300 мкл олигодезоксирибонуклеотида концентрацией 0,5 мкм/мл прибавляют 25 мл воды и 0,5 мл 2,0 М раствора ион-парного реагента триэтиламмония ацетата, далее TEAA, - растворы наносят на картриджи Glen Research Poly-Pak Cartridge, 60-1100-10, содержащие полимерный носитель, имеющий сродство к диметокситритилу, к картриджам присоединяют шприцы без плунжеров Millipore, Plastic syringe 50 мл, XXI 105005, картриджи со шприцами присоединяются к вакуумному манифолду CHROMBOND 730151, при помощи водоструйного насоса создается вакуум порядка 50 кПа, - картридж промывают 2 мл водного раствора аммиака и TEAA следующего состава: - к разбавленному в 20 раз 25% раствору аммиака добавляют 1/40 объема 2,0 М раствора TEAA, - картридж промывают 2 мл воды, - картридж промывают 2 мл 2% водного раствора трифторуксусной кислоты, - картридж промывают 4 мл деионизированной воды, - выделяют очищенный олигодезоксирибонуклеотид из картриджа, для чего картридж промывают 2 мл смеси 95% этилового спирта с 25% водным аммиаком, - выделяют очищенный олигодезоксирибонуклеотид из раствора, для чего пробирки с раствором очищенного олигодезоксирибонуклеотида помещают в концентратор, производят испарение раствора в течение 10 часов при температуре 60°C. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования

 


Наверх