Патенты автора Шабалина Алла Анатольевна (RU)
Изобретение относится к медицине и касается способа количественного определения антиконвульсантов в плазме крови больных эпилепсией, включающего их выделение из плазмы крови с последующей хромато-масс-спектрометрией продуктов экстракции и регистрацию масс-спектров анализируемых средств, где выделение антиконвульсантов из плазмы крови и очистку экстракта осуществляют путем депротеинизации, добавляя к образцу плазмы крови внутренний стандарт N-адамантил-гексаметиленимина в ацетонитриле, образовавшуюся смесь встряхивают, а затем центрифугируют, после чего надосадочную жидкость переносят в хроматографическую виалу, которую помещают в автосамплер хроматографа для дальнейшего масс-спектрометрического детектирования, а содержание антиконвульсантов определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на жидкостном хромато-масс-спектрометре, анализируемые вещества разделяют на колонке, а количественное определение концентрации для каждого из соединений антиконвульсантов в плазме крови осуществляют по формуле как отношение площадей пиков анализируемого антиконвульсанта и внутреннего стандарта, выраженных в условных единицах интегрирования, умноженное на значение коэффициента пересчета наклона калибровочной кривой к оси абсцисс и суммированное с коэффициентом пересчета точки пересечения кривой с осью ординат. Изобретение обеспечивает высокую воспроизводимость и точность, а также существенное ускорение и упрощение исполнения терапевтического лекарственного мониторинга. 1 пр., 1 ил., 2 табл.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для выявления риска развития симптомного каротидного стеноза у пациентов на фоне сахарного диабета 2 типа. Выявление риска развития симптомного каротидного стеноза у пациентов на фоне сахарного диабета 2 типа проводят путем определения липидов крови. При этом в крови определяют уровень малой плотной субъединицы липопротеинов низкой плотности, уровень липопротеинов низкой плотности, концентрацию общего холестерина, концентрацию триглицеридов, концентрацию ингибитора активатора плазминогена 1 типа и тканевого активатора плазминогена, концентрацию оксида азота, нитрита и нитрата, концентрацию асимметричного диметиларгинина, эндотелина-1, уровень моноцитарного хемоаттрактантного белка-1, уровень васкулоэндотелиального фактора роста, фактора роста тромбоцитов, фактора некроза опухоли, уровень интерлейкина-1 бета, С-реактивного белка, интерлейкина-6, липопротеина (а), уровень адипонектина. Оценивают атерогенный потенциал в баллах в соответствии с референтными значениями. При значении 0-4 балла выявляют низкий риск развития симптомного каротидного стеноза, 5-11 – средний риск развития симптомного каротидного стеноза, 12-21 – высокий риск развития симптомного каротидного стеноза у пациентов на фоне сахарного диабета 2 типа. Способ обеспечивает повышение достоверности выявления риска развития симптомного каротидного стеноза у пациентов на фоне сахарного диабета 2 типа за счет оценки совокупности наиболее значимых показателей. 1 ил., 3 табл., 3 пр.
Изобретение относится к области медицинской биотехнологии, в частности к способу выделения и определения атерогенных микроРНК из биологических жидкостей у больных с атеросклерозом. Выделение из крови атерогенных микроРНК выполняют в три этапа. На первом этапе проводят лизис эритроцитов путем перемешивания на вортексе образца крови в течение 10 секунд с Лизис-буфером RBC. Затем инкубируют 3-5 минут при комнатной температуре, после чего центрифугируют в течение 3 минут при 1000 об/мин для осаждения клеток. К полученному осадку вновь добавляют Лизис-буфер RBC, после чего к полученной лейкоцитарной взвеси добавляют буфер RL и встряхивают на вортоксе до получения гомогенного состояния - лизата. На втором этапе лизат пропускают через колонку и центрифугируют в течение 3 минут при 14000 об/мин. К полученной суспензии-смеси добавляют 70% спирт. Вновь пропускают через колонку и центрифугируют в течение одной минуты при 6000 об/мин. Полученную суспензию еще раз вносят в колонку и добавляют промывочный раствор А. Центрифугируют в течение одной минуты при 14 об/мин, затем вносят в колонку DNase I. Вновь центрифугируют в течение одной минуты при 14 об/мин. Полученную смесь инкубируют при комнатной температуре в течение 15 минут. На третьем этапе в колонку вновь дважды вносят промывочный раствор А и дважды центрифугируют в течение одной минуты при 14000 об/мин. Затем колонку с образцом высушивают на воздухе в течение 2 минут и вносят в нее Elution solution А для элюирования микроРНК, после чего центрифугируют в течение одной минуты при 2000 об/мин и затем в течение двух минут при 14000 об/мин. Далее проводят определение в полученном образце микроРНК количества их копий на амплификаторе CFX Touch. Полученный образец вносят в мини-пробирку Эппендорфа в количеств 2 мкл, добавляют к образцу буфер 3 мкл Polly А, 3 мкл АТФ, 1,8 мкл фермента Polly А и 10,2 мкл дистиллированной воды, инкубируют при 65°С в течение 10 минут, после чего вносят 18 мкл лигазного буфера, 27 мкл PEG 800 А, 3,6 мкл адаптера для лигирования, 9 мкл РНК-лигазы, 2,4 мкл дистиллированной воды и вновь полученную смесь инкубируют при 16°С в течение 1 часа. Затем добавляют следующее: 36 мкл 5х BufferRT, 7,2 мкл смеси dNTP, 9 мкл праймера Universal RT, 15 мкл смеси Enzyme, 20 мкл дистиллированной воды, инкубируют при 85°С в течение 5 минут, получая экстрагированный образец. Далее готовят раствор перемешивания 300 мкл MiR Amp master Mix, 30 мкл MiR Amp primer Mix и 210 мкл дистиллированной воды. После чего 45 мкл полученного раствора добавляют к 5 мкл экстрагированного образца и проводят ПЦР, начиная с этапа обратной транскрипции по следующей программе РНК-1: 1 цикл - 5 минут при температуре 95°С, 14 циклов - 30 секунд при температуре 60°С, 10 минут при температуре 99°С, затем удержание при температуре 4°С. Далее образец вносят в 5 чистых мини-пробирок Эппендорфа по 5 мкл в каждую, в которые затем вносят по 4 мкл дистиллированной воды и праймеры-зонды микроРНК в количестве 2 мкл при следующем порядке внесения праймеров-зондов микроРНК: в первую - 126-5р; во вторую - 126-3р; в третью - 33а-5р; в четвертую - 21-5р; в пятую - 21-3р. Затем в каждую пробирку добавляют 10 мкл раствора основной смеси, содержащей TaqMan Fast Advanced и буфер TaqMan Fast Advanced Buffer в соотношении 1:100 соответственно. Проводят программу амплификации РНК-2: 1 цикл - 20 мин при температуре 95°С, 40 циклов по 1 минуте при температуре 95°С, затем удержание при температуре 4°С, получая при этом количество копий атерогенных микроРНК. Изобретение позволяет с высокой точностью выделить и определить атерогенные микроРНК из крови пациентов с каротидным атеросклерозом. 2 табл., 1 пр.
Способ оценки развития и прогрессирования церебральной микроангиопатии (болезни мелких сосудов) // 2737772
Изобретение относится к области медицины, а именно к неврологии, и предназначено для прогнозирования риска развития церебральной микроангиопатии. Для оценки риска развития и прогрессирования церебральной микроангиопатии исследуемую кровь после удаления из нее плазмы в количестве 80 мкл помещают в 120 мкл 0,73% раствора хлорида натрия и в 15 мг сахарозы и оставляют на 60 минут для экспозиции при комнатной температуре. Оценивают скорость оседания эритроцитов и при более 8,5 мм/ч определяют наличие риска развития церебральной микроангиопатии. Использование изобретения обеспечивает простоту исследования с высокой достоверностью и точностью оценки риска развития и прогрессирования церебральной микроангиопатии. 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития и прогрессирования церебральной микроангиопатии. Способ оценки риска развития и прогрессирования церебральной микроангиопатии заключается в том, что оценивают осмотическую резистентность эритроцитов обследуемого к лизису в гипотонических растворах со снижающими концентрациями путем определения выраженности гемолиза на фотоэлектроколориметре по интенсивности поглощения света при длине волны 500-560 нм, при этом начало гемолиза при концентрации хлорида натрия 0,50-0,45% принимают за минимальную осморезистентность и по показателю минимальной осморезистентности, рассчитанному как отношение интенсивности света, прошедшего через среду, к интенсивности падающего света на данную среду, превышающему 0,62, оценивают риск развития и прогрессирования церебральной микроангиопатии как повышенный. Изобретение обеспечивает простоту исследования с высокой достоверностью и точностью оценки риска развития и прогрессирования церебральной микроангиопатии. 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, эндокринологии, и может быть использовано для отбора пациентов для дуплексного сканирования магистральных артерий головы с целью выявления значимого стеноза. Осуществляют исследование крови. Проводят иммуноферментное определение в крови уровня триглицеридов, в плазме крови глюкозы и методом иммунопреципитации липопротеина (а). Рассчитывают индекс триглицериды-глюкоза (ИТГ) по формуле: ([ln (триглицериды натощак (ммоль/л) × 88.495575) × (глюкоза плазмы натощак (ммоль/л)×18.018018)] /2), где ln - натуральный логарифм, 88.495575 и 18.018018 - поправочные коэффициенты и уровень липопротеина (а). Каждому полученному результату ИТГ и липопротеину(а) присваивают баллы следующим образом: при значении ИТГ менее 4,5 ед - 0 баллов, 4,5-4,9 ед - 1 балл, равно или более 5 ед - 2 балла; при значении уровня липопротеина (а) менее 30 мг/дл присваивают 0 баллов, равно или более 30 мг/дл присваивают 1 балл. Затем рассчитывают сумму баллов, и при ее значении 2 балла и более пациенту требуется проведение дуплексного сканирования магистральных артерий головы с целью выявления значимого стеноза, а менее 2 баллов - проведение дуплексного сканирования магистральных артерий головы с целью выявления значимого стеноза не требуется. Способ обеспечивает возможность с высокой достоверностью и точностью отбора пациентов для проведения дуплексного сканирования магистральных артерий головы с целью выявления значимого стеноза за счет биохимического исследования крови на наличие уровня триглицеридов, в плазме крови глюкозы и методом иммунопреципитации липопротеина (а), и расчета индекса триглицериды-глюкоза. 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, гематологии, и раскрывает способ определения степени риска развития цереброваскулярной патологии при миелопролиферативных заболеваниях. Способ характеризуется тем, что проводят комплексную оценку биомаркеров риска и их параметров: определяют в крови фибринолитическую активность, индекс фибринолиза, фактор Виллебранда, уровень гемоглобина, уровень гематокрита, деформируемость эритроцитов, прочность агрегатов эритроцитов, а также производят учет наличия перенесенного нарушения мозгового кровообращения в анамнезе, мутации V617F в гене Jak2, цефалгического синдрома чаще 1-го раза в неделю, тромбозов артериальных и венозных в анамнезе и наличия очаговых изменений головного мозга сосудистого генеза по данным МРТ. Изобретение обеспечивает высокую достоверность оценки и может быть использовано для определения степени риска развития цереброваскулярной патологии при миелопролиферативных заболеваниях (МПЗ). 1 табл., 4 пр.
Изобретение относится к средству общей структурной формулы (1): Х-бета-аланил-L-гистидин или X-карнозин (Х-К), где X - салицил (СЦ), обладающему антиагрегантной, супероксид-перехватывающей, антиоксидантной и цитопротекторной активностью. Технический результат: создание нового средства на основе производного салициловой кислоты с карнозином, обладающего высокой антиагрегантной, супероксид-перехватывающей, антиоксидантной и цитопротекторной активностью и способного обеспечивать защиту слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта от побочных повреждающих эффектов, присущих нестероидным противовоспалительным препаратам. 6 ил., 6 табл., 8 пр.
(1)
Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии, и может быть использовано для количественного определения леводопы в плазме крови для решения задач лекарственного мониторинга при лечении пациентов, страдающих болезнью Паркинсона. Способ определения леводопы в плазме крови включает анализ крови на ее наличие путем очистки плазмы крови, проведения хромато-масс-спектрометрии с использованием матрицы в виде плазмы крови с леводопой и внутреннего стандарта метилдопы, при этом разделение продуктов экстракции проводят на обращенно-фазной хроматографической колонке, а в качестве элюента применяют муравьиную кислоту и ацетонитрил, с последующим расчетом концентрации леводопы, при этом очистку проводят методом твердофазной экстракции на активированном оксиде аллюминия, разделение продуктов экстракции проводят на обращенно-фазной хроматографической колонке 4,6×250 мм с фенилгексилом в качестве неподвижной фазы, концентрацию леводопы рассчитывают по формуле: С=4,384714×AR, где С - концентрация леводопы (мкг/мл), AR - отношение площади хроматографического пика леводопы к площади пика внутреннего стандарта. 6 ил., 1 табл.
Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии, и может быть использовано для количественного определения ликарбазепина в плазме крови для решения задач лекарственного мониторинга антиконвульсанта второго поколения при лечении парциальной эпилепсии. Способ количественного определения ликарбазепина в плазме крови путем проведения жидкостно-жидкостной экстракции ликарбазепина из плазмы крови с последующей газовой хромато-масс-спектрометрией продуктов экстракции и расчетом концентрации ликарбазепина включает экстракцию анализируемого соединения и внутреннего стандарта – нордазепама, газовую хромато-масс-спектрометрию раствора продуктов экстракции, включающего анализируемое соединение и внутренний стандарт, с последующим расчетом концентрации ликарбазепина по формуле: Y=6,710⋅Х+0,7567, где Y - концентрация ликарбазепина (мкг/мл), X - отношение площади хроматографического пика ликарбазепина к площади пика внутреннего стандарта - нордазепама. 2 табл., 3 ил.
Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии, и предназначено для количественного определения амантадина в плазме крови. Для количественного определения амантадина в плазме крови осуществляют анализ крови методом хромато-масс-спектрометрии. Хромато-масс-спектрометрию проводят с использованием матрицы в виде плазмы крови с амантадином и внутреннего стандарта - вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу - N-адамантил-гексаметиленимина. Разделение продуктов экстракции проводят на обращенно-фазной хроматографической колонке 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм. В качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония - раствор А и смесь ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 - раствор Б в соотношении А:Б - 42:58. Разделение продуктов экстракции осуществляют с температурой разделения 30°С и скоростью подачи элюента 0,6 мл/мин. Детектирование внутреннего стандарта проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона с m/z 234.0. Детектирование амантадина проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с m/z 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV, а его концентрацию рассчитывают по формуле: С=1198, 5306×AR, где С - концентрация амантадина (мкг/мл), AR - отношение площади хроматографического пика амантадина к площади пика внутреннего стандарта. Способ обеспечивает высокую воспроизводимость и точность количественного определения амантадина в плазме крови. 4 ил., 1 табл.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для количественного определения ацетилсалициловой кислоты и ее основного метаболита салициловой кислоты в плазме крови человека. Для этого проводят жидкостно-жидкостную экстракцию салицилатов из плазмы крови с последующей дериватизацией силилирующим агентом N-метил-N-трет-бутилдиметилсилил-трифторацетамидом. Определение анализируемых соединений проводят методом газовой хроматомасс-спектрометрии с внутренним стандартом (п-толуиловой кислотой) осуществляют на неполярной капиллярной колонке HP-5MS при температуре инжектора 250°С и начальной температуре печи хроматографа - 130°С. Колонку термостатируют в течение 2 мин, после чего осуществляют ее нагрев до 280°С с температурным градиентом 25°С/мин. Затем колонку вновь термостатируют при 280°С в течение 4 мин. Регистрацию масс-спектров осуществляют при ионизации “электронным ударом” при 70 эВ и температуре источника ионов 230°С. Регистрация положительных ионов и сканирование выбранных ионов с m/z 309 для ацетилсалициловой кислоты и с m/z 195 для салициловой кислоты производят в режиме мониторинга со скоростью 2 скан/с. Изобретение обеспечивает проведение фармакокинетического лекарственного мониторинга препаратов у пациентов с цереброваскулярными заболеваниями. 9 ил.,3 табл., 1 пр.
Изобретение относится к клинической биохимии и может быть использовано для выделения и определения холестерина множественно модифицированных липопротеинов низкой плотности (ммЛНП) в сыворотке крови человека. Способ заключается в том, что сыворотку крови обрабатывают 20%-ным буферным раствором поливинилпирролидона с молекулярной массой 35000 (ПВП-35000) при объемном соотношении сыворотка:ПВП (1,0:0,84), с последующей инкубацией в течение 10 мин при комнатной температуре, агрегаты ммЛНП осаждают центрифугированием при 9000 об/мин в течение 10 мин при 23°С, декантируют, осадок ммЛНП растворяют в буфере без ПВП-35000 и определяют холестерин в преципитате. При уровне содержания холестерина в ммЛНП более 6,6 мг/дл констатируют повышенный уровень ммЛНП у обследуемого индивидуума. Изобретение может быть использовано для установления наличия субклинического атеросклероза у обследуемого индивидуума, оценки тяжести патологического процесса и разработки прогностических критериев сосудистых осложнений. 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для диагностики течения «асимптомного» каротидного атеросклероза. Диагностику течения «асимптомного» каротидного атеросклероза проводят путем иммуноферментного определения в плазме крови биомаркеров. При этом в плазме крови иммуноферментным методом определяют уровни тканевого активатора плазминогена (t-PA), ингибитора активатора плазминогена (PAI-1), адипонектина, асимметричного диметиларгинина (ADMA), а биохимическим методом уровни нитрата, нитрита и оксида азота (NO). Затем каждому биомаркеру присваивают 0 или 1 балл в зависимости от его снижения или повышения относительно нормы. А именно при значении уровней t-PA, адипонектина и оксида азота выше нормы этим биомаркерам присваивают 0 баллов, а при их снижении относительно нормы - 1 балл, при значении уровней PAI-1, ADMA, нитрата и нитрита выше нормы данным биомаркерам присваивают 1 балл, а при их снижении относительно нормы - 0 баллов. После чего рассчитывают сумму баллов и при ее значении менее 4 баллов диагностируют благоприятное течение «асимптомного» каротидного атеросклероза, а при значении 4 и более - неблагоприятное. Способ обеспечивает высокую точность диагностики течения «асимптомного» каротидного атеросклероза за счет специфичности и чувствительности метода совместного определения биомаркеров - t-PA, PAI-1, адипонектина, ADMA, нитрата, нитрита и NO. 3 табл., 2 пр.
Изобретение относится к клинической иммунологии и может быть использовано для экспресс-определения атерогенности иммунных комплексов (ИК) сыворотки крови человека. Сущность изобретения состоит в том, что в предлагаемом способе преципитат ИК из сыворотки крови человека готовят путем обработки буфером, содержащим 10% раствор полиэтиленгликоля с молекулярной массой 3350 (ПЭГ-3350), в соотношении 1:3,5, инкубируют в течение 10 мин при комнатной температуре. Агрегаты ИК осаждают центрифугированием, растворяют в буфере без ПЭГ-3350, определяют содержание холестерина в иммунных комплексах (ХИК) и степень связывания комплемента (ССК) морской свинки преципитированными иммунными комплексами. Рассчитывают атерогенность ИК как отношение ССК к ХИК и при величине менее 4 ЕД констатируют повышенную атерогенность крови. ! табл.
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ИОНИЗИРОВАННОГО КАЛЬЦИЯ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА // 2526824
Изобретение относится к лабораторной диагностике, а именно к клинической иммунологии, и может быть использовано для определения функциональной активности ионизированного кальция (ФАИ Ca2+) в сыворотке крови человека. Способ определения ФАИ Ca2+ основан на проведении реакции лизиса эритроцитов барана 10% сывороткой крови человека при температуре 37°C в течение 10 мин в присутствии 0,55 мМ этиленгликольтетрауксусной кислоты в буферном растворе в течение 10 мин. После инкубации определяют степень ингибирования лизиса эритроцитов, при наличии ингибирования активности комплемента менее 30% оценивают повышенную функциональную активность ионизированного кальция в организме человека, от 31% до 70% - нормальную, более 71% - пониженную. Использование простого и быстрого в осуществлении способа позволяет выявлять доклинические состояния иммунодефицита, может служить специфическим маркером для иммуномодулирующей терапии, проводить углубленное исследование патогенеза аутоиммунных заболеваний, дает возможность их ранней профилактики и позволяет контролировать эффективность проводимой терапии. 5 пр., 6 табл.
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для выявления развития гиперплазии неоинтимы и рестеноза сонных артерий после ангиореконструктивных операций на них у больных с прогрессирующим церебральным атеросклерозом без использования ангиовизуализации. Больному с прогрессирующим церебральным атеросклерозом после проведения ангиореконструктивных операций на сонных артериях не более чем через 6 месяцев иммуноферментным методом определяют в сыворотке крови содержание биомаркера липопротеин-ассоциированной фосфолипазы A2 (Lp-PLA2) и при значении его уровня 360 нг/мл и более выявляют развитие гиперплазии неоинтимы и рестеноза в оперированной сонной артерии. Способ обеспечивает высокую точность выявления развития гиперплазии неоинтимы и рестеноза у больных с прогрессирующим церебральным атеросклерозом после ангиореконструктивных операций на сонных артериях.
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ РАЗВИТИЯ НАРУШЕНИЙ ВИТАЛЬНЫХ ФУНКЦИЙ ПРИ ТЯЖЕЛОЙ ФОРМЕ СИНДРОМА ГИЙЕНА-БАРРЕ // 2485522
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, а именно к способу прогнозирования развития нарушений витальных функций при синдроме Гийена-Барре (СГБ)
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для выявления развития индивидуальной резистентности к антиагрегантным препаратам у больных с прогрессирующим церебральным атеросклерозом
Изобретение относится к области медицины
Изобретение относится к области медицины, в частности к неврологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики интрацеребральных гематом (ИГ) малого объема и малых глубинных инфарктов головного мозга (МГИ)
Изобретение относится к области медицины
