Патенты автора Соболева Любовь Александровна (RU)
Рекомбинантный белок нуклеазы бактерий Serratia marcescens для гидролиза нуклеиновых кислот // 2787186
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению ферментов в Е. coli, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка нуклеазы Serratia marcescens. Рекомбинантный белок нуклеазы S. marcescens с молекулярной массой 27 кДа и SEQ ID NO: 2 получают рекомбинантным путем в Е. coli, экспрессирующих ген нуклеазы S. marcescens без сигнальной последовательности, в неактивной, нетоксичной и нерастворимой форме - в виде телец включения внутри бактериальных клеток, с последующим разрушением созданных клеток продуцентов, выделением, отмывкой телец включения от белков Е. coli для получения конечного продукта, восстановлением полученной нуклеазы Serratia marcescens до нативной конформации и очисткой. Изобретение обеспечивает высокий уровень биосинтеза нуклеазы, пригодной для гидролиза нуклеиновых кислот, и позволяет сократить время технологического цикла очистки нуклеазы при увеличении выхода целевого белка. 6 пр.
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению ферментов в Е. coli, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка нуклеазы Serratia marcescens. Способ включает получение олигонуклеотидного дуплекса, кодирующего соответствующий ген SEQ ID NO: 2 S. marcescens, оптимизированного для экспрессии в Е. coli; создание плазмиды, содержащей последовательность гена SEQ ID NO: 2 нуклеазы S. marcescens, и получение штамма продуцента; выращивание клеток продуцентов штамма Е. coli, экспрессирующих ген нуклеазы S. marcescens без сигнальной последовательности, в неактивной, нетоксичной и нерастворимой форме - в виде телец включения внутри бактериальных клеток; разрушение созданных клеток продуцентов, выделение, отмывку телец включения от штаммовых белков для получения конечного продукта; последующее восстановление полученной нуклеазы Serratia marcescens до нативной конформации и очистку. Изобретение обеспечивает высокий уровень биосинтеза нуклеазы в Е. coli, позволяет сократить время технологического цикла очистки нуклеазы при увеличении выхода целевого белка. 6 пр.
Изобретение относится к биотехнологии, генной инженерии, биохимии, медицине, ветеринарии. Получают синтетическую последовательность ДНК, соответствующую гену, кодирующему белковую последовательность гепаринсвязывающего домена (HBD) из Danio rerio, слитую с последовательностью эритропоэтина (Еро) человека (белок HBD-Epo), спланированную таким образом, чтобы нуклеотидный состав кодонов был оптимизирован для гетерологичной экспрессии в непатогенном лабораторном штамме Е. coli. Этот синтетический ген HBD-Epo фланкируют на 5'-конце сайтом NcoI, а на 3'-конце - сайтом Kpn2I и встраивают в плазмиду pQE6 по сайтам NcoI и Kpn2I. На его основе получают рекомбинантную плазмиду pL610, содержащую искусственный бактериальный оперон рекомбинантного белка HBD-Epo, включающий промоторную область раннего промотора бактериофага Т5, ген рекомбинантного белка HBD-Epo, терминатор транскрипции; бактериальный оперон бета-лактамазы; бактериальный участок инициации репликации типа ColE1, кодирующую рекомбинантный белок HBD-Epo и обеспечивающую его синтез в штаммах Е. coli. Изобретение также включает способ очистки белка HBD-Epo методом ионообменной хроматографии. Изобретение относится к самому рекомбинантному белку HBD-Epo, экспрессионному вектору pL610 и композиции (деминерализованному костному матриксу (ДКМ), содержащему белок HBD-Epo, а также ДКМ, содержащему белок HBD-Epo и ВМР-2), направленной на стимулирование остеогенеза. Изобретение позволяет получать устойчивый очищенный активный белок HBD-Epo, а также HBD-Epo, иммобилизированный на ДКМ, в том числе на ДКМ с костным морфогенетическим белком ВМР-2. Изобретение, кроме того, включает способ специфической индукции регенерации костной ткани, заключающийся в заполнении дефектов костной ткани композицией, состоящей из HBD-Epo, иммобилизированного на ДКМ, в том числе на ДКМ с костным морфогенетическим белком ВМР-2. 6 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БЕЛКОВО-МИНЕРАЛЬНОЙ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩЕЙ РЕКОМБИНАНТНЫЙ БЕЛОК Collbd-BMP-2 // 2492237
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения композиции на основе белково-минеральных компонентов
Изобретение относится к медицине, а именно к способу получения деминерализованного костного матрикса в виде крошки
