Патенты автора Живолупов Сергей Анатольевич (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к медико-биологическим наукам и клинической медицине, и может быть использовано для подготовки секционного материала для электронномикроскопического исследования (ЭМИ) нервной системы. Способ подготовки секционного материала для электронномикроскопического исследования (ЭМИ) нервной системы включает фиксацию материала, обезвоживание в спиртах разной концентрации, пропитывание в ацетоне и смолах. При этом предварительно секционный материал забирают не позднее 36 часов и первоначально фиксируют в 10 об.% нейтральном формалине, затем отмывают в 4-х сменах натрий-калиевого фосфатного буфера с рН=7,2-7,4 по 1 часу, фиксируют в смеси равных количеств 2 об.% раствора четырехокиси осмия и 2 об.% раствора бихромата калия с добавлением к этой смеси такого же количества фосфатного буфера с сахарозой в разведении 9 г сахарозы на 100 мл буфера с достижением 0,5 об.% итоговой концентрации четырехокиси осмия, причем время фиксации в этом растворе составляет от 3-х часов до 3-х суток; после осмиевой фиксации материал отмывают в 3-х сменах натрий-калиевого фосфатного буфера рН=7,2-7,4 с сахарозой по 1,5-2 часа в каждой, последнюю смену буфера производят без сахарозы, затем материал обезвоживают в спиртах, начиная с 50 об.% концентрации спирта - 2 смены по 30 минут и затем - в 70 об.% концентрации спирта - 2 смены по 1 часу, далее исследуемый материал контрастируют в 1-2 об.% растворе уранилацетата на 70 об.% спирте в течение 12-18 часов в холодильнике. После этого осуществляют обработку материала, включающую обезвоживание в спиртах 80 об.%, 96 об.% и 100 об.% по две смены, в первом спирте по 15 минут, в последних двух до 30 минут в каждом, и далее 2 смены в смеси спирта с ацетоном по 15 минут и в 3-х сменах чистого ацетона по 15 минут, после ацетона материал пропитывают смесью смол с ацетоном в последовательности - 1 часть смолы : 5 частей ацетона - в течение часа; 1 часть смолы : 2 части ацетона - не менее часа; смесь смол и ацетона в равном соотношении в течение 2 часов; 2 части смолы : 1 часть ацетона - в течение 2-2,5 часов; 5 частей смолы : 1 часть ацетона - на ночь, с последующим пропитыванием в чистой смоле без ацетона при комнатной температуре. Изобретение обеспечивает возможность проведения ЭМИ секционного материала нервной системы не только при его фиксации в первые 12 часов после смерти, но и на более поздних сроках - до 36 часов после смерти, с обеспечением максимальной сохранности материала и информативности при ЭМИ. 10 ил., 5 пр.
Изобретение относится к медицине, в частности к нейротравматологии

 


Наверх