Патенты автора Гогина Яна Станиславовна (RU)
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии, и представляет собой сконструированную in vitro рекомбинантную плазмидную ДНК, содержащую две копии синтетического гена гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека, штамм Escherichia coli SG20050/p280_2GM - продуцент указанного полипептида и способ получения полипептида со свойствами ГМ-КСФ. Рекомбинантная плазмидная ДНК p280_2GM кодирует полипептид со свойствами гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ) человека, характеризующаяся следующими признаками: кодирует аминокислотную последовательность зрелого ГМ-КСФ человека; имеет молекулярную массу 2.95 МДа (4422 п.о.); состоит из: PsTI/BamHI(pol)-фрагмента ДНК плазмиды p280GM (1484 п.о.), содержащего C-концевую часть гена бета-лактамазы, тандема промоторов триптофанового оперона Е. coli и синтетического гена GM-CSF человека, а также EcoRI(pol)/PstI (2938 п.о.) - фрагмента той же плазмиды, содержащего синтетический ген GM-CSF человека и N-концевую часть гена бета-лактамазы; содержит:- тандем промоторов триптофанового оперона Е. coli; две копии синтетического гена ГМ-КСФ человека; терминатор транскрипции t0 фага лямбда; в качестве генетического маркера ген бета-лактамазы, детерминирующий устойчивость трансформированных плазмидой p280_2GM клеток E. coli к ампициллиновым антибиотикам; уникальные сайты узнавания рестрикционными эндонуклеазами, расположенными на следующих расстояниях вправо от сайта EcoRI (279 п.о.) - BamHI - 912 нуклеотидов; PstI - 3396 нуклеотидов. Изобретение позволяет увеличить выход полипептида со свойствами гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора. 3 н.п. ф-лы, 8 ил., 4 табл., 15 пр.
Изобретение относится к препаративным формам для хранения посевного бактериального материала, питательным средам и способам получения биомасс рекомбинантных штаммов бактерий E.coli, содержащих плазмидные ДНК, кодирующие биосинтез белка TBI, и может быть использовано в биотехнологии и микробиологии
