Патенты автора Казакова Анна Сергеевна (RU)

Настоящее изобретение относится к вирусологии и ветеринарии. Предложен штамм клеток Escherichia coli KRX pET32b/ASFV/p30, полученный путем трансформации стабильного штамма E.coli KRX pET32b/ASFV/p30 плазмидным вектором pET32b(+)ASFV/p30e2 и депонированный в Государственной коллекции штаммов микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии под №734-МБШ. Предложенный штамм стабильно экспрессирует химерный рекомбинантный белок р30 вируса африканской чумы свиней, состоящий из антигенно активного фрагмента р30, лидирующей последовательности тиоредоксина (Trx-Tag) и двух полигистидиновых участков (6xHis). Предложенный штамм позволяет получать электрофоретически и иммунохимически чистый антигенно активный химерный рекомбинантный белок р30, который может быть использован в тест-системах, предназначенных для серодиагностики африканской чумы свиней, в частности, методом иммуноблоттинга. 2 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарной вирусологии. Предложен экспрессирующий плазмидный вектор, обеспечивающий синтез в клетках Е. coli рекомбинантного белка, состоящего из фрагмента р30 вируса африканской чумы свиней (АЧС), тиоредоксина и двух полигистидиновых участков. Изобретение может быть использовано для изготовления вирусспецифических антигенов в интересах исследования сывороток свиней методом иммуноблоттинга. 3 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологиии и может быть использовано в гибридомной технологии для получения антител заданной специфичности против рекомбинантных антигенов, экспрессированных в клетках мыши. Изобретение состоит в праймировании мышей плазмидной ДНК, кодирующей ген белка, интересующего исследователя, которое обеспечивает in vivo экспрессию, процессинг, соответствующую посттрансляционную 3D конформацию и индуцирует иммунный ответ, подобный сывороточному на инфекционный агент. Синергизм праймирования ДНК-плазмидой и бустер эффекта введения рекомбинантного белка в растворимой форме обеспечивают высокую авидность CD4+ и CD8+ T-клеток и, как следствие, аффинность и авидность полученных моноклональных антител. Повышается выход гибридом продуцирующих МКА к искомому антигену и уменьшается время получения доноров иммунных лимфоцитов и линий гибридом, продуцирующих специфические МКА. Применение метода ДНК-иммунизации и последующего введения рекомбинантного белка расширяет арсенал способов получения гибридом, продуцирующих специфические МКА к различным антигенам. Способ апробирован при получении моноклональных антител к эпитопам фосфопрротеина vp30 вируса африканской чумы свиней Полученные таким образом моноклональные антитела способны распознавать антигеные детеминанты фосфопрротеина vp30 вируса африканской чумы свиней с перекрестной иммунореактивностью к рекомбинантному белку, продуцируемому в E.coli клоном PTT9/ASFVp30/2. 2 ил., 2 табл., 3 пр.

 


Наверх