Патенты автора Чикобава Мераб Георгиевич (RU)
Изобретение относится к медицине и биологии и предназначено для использования при производстве наборов для амплификации нуклеиновых кислот, в том числе при производстве наборов для этиологической диагностики COVID-19. Дозированная форма для амплификации нуклеиновых кислот включает стеклообразное непористое ядро, содержащее фиколл, галактоманнан и водный раствор следующих компонентов: праймеров, термостабильного фермента ДНК-полимеразы и смеси четырех дезоксинуклеозидтрифосфатов, а также сплошную оболочку, состоящую из минерального масла, причем содержание фиколла, галактоманнана и водного раствора в ядре, мас. %: фиколл - 10,0-30,0, галактоманнан - 0,1-5,0 и водный раствор - остальное. Дозированная форма может быть выполнена в виде глобулы или таблетки, при этом глобула имеет предпочтительный диаметр 0,5-4,0 мм, а таблетка имеет предпочтительный диаметр 0,5-4,0 мм и предпочтительную максимальную толщину 0,5-4,0 мм. Водный раствор может включать в качестве дополнительных компонентов любой меченый зонд для реакции амплификации нуклеиновых кислот и обратную транскриптазу. Изобретение позволяет предотвратить неконтролируемое истирание дозированной формы для амплификации нуклеиновых кислот. 3 з.п. ф-лы, 16 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИОФАГА // 2613423
Изобретение относится к способу получения бактериофага. Способ включает культивирование бактериальных клеток штамма-хозяина при отсутствии посторонней микрофлоры, получение фаголизата, а также очистку фаголизата осаждением и/или фильтрацией. Через 30-120 мин после начала культивирования при оптимальной температуре для роста культуры быстро растущего штамма-хозяина каждые 30-60 мин из культуры штамма-хозяина с поверхности плотной питательной среды или из жидкой среды культивирования делают мазки. Окрашивают мазки раствором акридинового оранжевого в конечной концентрации от 0,001% до 0,02% или раствором акридинового желтого в конечной концентрации от 0,01% до 0,2%. Микроскопируют окрашенный мазок в флуоресцентном микроскопе. Устанавливают момент времени для засева маточного бактериофага по достижению в окрашенном мазке не менее 50% по отношению к общему количеству клеток штамма-хозяина доли окрашенных акридиновым оранжевым клеток, флуоресцирующих оттенками оранжевого или красного цвета, или доли окрашенных акридиновым желтым клеток, флуоресцирующих оттенками желтого или оранжевого цвета, при достижении не менее 10% по отношению к общему количеству клеток штамма-хозяина доли клеток с неравномерной флуоресценцией, а именно парных соприкасающихся полюсами клеток в форме палочек с неравномерной флуоресценцией цитоплазмы или клеток шаровидной и эллипсоидной формы со слабо флуоресцирующим центральным сечением. Затем засевают маточный бактериофаг. Изобретение обеспечивает стабильность достижения высокого титра бактериофага при получении фаголизата в условиях изменения рецептур питательных сред и увеличение размаха варьирования значений показателей культивирования штамма-хозяина и бактериофага. 11 пр.
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БАКТЕРИОФАГА // 2603730
Изобретение касается способа получения бактериофага. Представленный способ включает засев суспензии бактериальных клеток в титре 108-1012 КОЕ/мл на плотную питательную среду с толщиной слоя от 3 мм до 25 мм и культивирование при отсутствии посторонней микрофлоры, при толщине слоя воздуха над поверхностью плотной питательной среды от 5 мм до 50 мм и при оптимальной температуре для роста культуры штамма-хозяина. Через 30-120 минут после начала культивирования каждые 30-60 минут с поверхности плотной питательной среды делают мазки, окрашивают их интеркалирующим красителем и микроскопируют. Прекращают культивирование при достижении не менее 10% по отношению к общему количеству клеток штамма-хозяина доли клеток с неоднородным окрашиванием флуоресцирующей цитоплазмы. Затем на полученный газон культуры штамма-хозяина засевают маточный бактериофаг в титре 107-1010 БОЕ/мл. Культивируют в течение 13-15 часов при отсутствии посторонней микрофлоры, при толщине слоя воздуха над поверхностью плотной питательной среды от 5 мм до 50 мм и при оптимальной температуре для роста культуры штамма бактериофага. Получают фаголизат при суспендировании, отсасывают фаголизат в стерильную емкость и очищают. Изобретение обеспечивает стабильное достижение высокого титра бактериофага (1012-1014 БОЕ/мл) при получении фаголизатов в условиях изменения как рецептур питательных сред, так и увеличения размаха варьирования значений показателей культивирования штамма-хозяина и бактериофага. Изобретение может быть использовано в биотехнологии получения продукции, содержащей бактериофаги. 8 з.п. ф-лы.
УСТРОЙСТВО ДЛЯ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ // 2535333
Изобретение относится к медицине и биологии и предназначено для использования при проведении ПЦР-исследований. Устройство для полимеразной цепной реакции содержит, по крайней мере, четыре части, каждая из которых имеет две плоские, параллельные поверхности, перпендикулярные общей оси, и отверстия. Относительно общей оси части имеют возможность поворачиваться относительно друг друга. Первая часть имеет, по крайней мере, шесть сквозных отверстий, соединяющих две ее плоские поверхности, из которых, по крайней мере, четыре отверстия снабжены гидрофильными фильтрами, установленными с возможностью контакта с плоской поверхностью второй части. Вторая часть выполнена с, по крайней мере, двумя сквозными отверстиями, соединяющими две ее плоские поверхности, из которых, по крайней мере, одно отверстие содержит сорбент, зафиксированный гидрофильными фильтрами, контактирующими с плоскими поверхностями первой и третьей частей. Третья часть имеет, по крайней мере, два сквозных отверстия, соединяющих две ее плоские поверхности, из которых, по крайней мере, одно отверстие содержит гидрофильный фильтр, размещенный с возможностью контакта с плоскими поверхностями второй и четвертой частей, и, по крайней мере, три несквозных отверстия, каждое из которых содержит гидрофильные фильтры, размещенные с возможностью контакта с плоской поверхностью второй части. Четвертая часть выполнена с, по крайней мере, одним несквозным, оптически прозрачным отверстием, содержащим гидрофильный фильтр, размещенный с возможностью контакта с плоской поверхностью третьей части, не контактирующий с дном отверстия его содержащим. Изобретение обеспечивает расширение технологических возможностей - проведение в одном устройстве этапов выделения (очистки) нуклеиновых кислот и последующей ПЦР с детекцией результатов реакции при одновременном упрощении устройства. 7 з.п. ф-лы, 5 ил.
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ мультиплексного ПЦР-анализа и набор для его осуществления. Способ включает использование неблокированных прямых и обратных праймеров и гомологичных им блокированных прямых и обратных праймеров. Выделяют ДНК из биологического или клинического материала. Проводят мультиплексную ПЦР с первыми 5-10 циклами амплификации в виде трехшаговой ПЦР и с последующими 25-35 циклами амплификации в виде двухшаговой ПЦР в буфере для постановки реакции, содержащем катионы калия (I) и катионы магния (II), на основе буферной системы с pH 7,0-7,5 при 40-85°C, включающей соль глутаминовой кислоты, трис(гидроксиметил)аминометан и ортофосфорную кислоту. Выбирают соотношение количества молекул неблокированных праймеров и количества молекул гомологичных им блокированных праймеров с некомплементарным участком из 1-8 нуклеотидов на 3'-конце, выбранных из ряда: некомплементарный первый нуклеотид, некомплементарный второй нуклеотид, некомплементарный третий нуклеотид, некомплементарный четвертый нуклеотид, некомплементарный пятый нуклеотид, некомплементарный шестой нуклеотид, некомплементарный седьмой нуклеотид, некомплементарный восьмой нуклеотид или их сочетания, составляющее от 2:1 до 4:1, при отсчете номера нуклеотида блокированного праймера с 3'-конца. Предложенное изобретение позволяет уменьшить продолжительность мультиплексной ПЦР без повышения концентрации Taq-полимеразы, при предотвращении получения ложных результатов, связанных с различиями концентраций нуклеотидных последовательностей-мишеней. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 3 пр.
Изобретение относится к области медицины и биологии
