Предложен способ идентификации предполагаемого жизненно важного гена, необходимого для жизнеспособности в условиях роста в присутствии антибиотика, который кодирует мишень для антибиотика в бактерии. Способ включает создание совокупности мутантных бактерий путем транспозонного мутагенеза с применением двух или более разных активирующих транспозонов (TnAS), причем каждый TnA содержит промотор, такой, что встраивание транспозона в ДНК бактерии приводит к нарушению функции или увеличению транскрипции гена в сайте встраивания или поблизости от него позиционно-зависимым образом.