Ферменты, например лигазы и проферменты и композиции их и способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов (C12N9)

C12N     Микроорганизмы или ферменты; их композиции (биоциды, репелленты или аттрактанты или регуляторы роста растений, содержащие микроорганизмы, вирусы, микробные грибки, ферменты, агенты брожения или вещества, получаемые или экстрагируемые из микроорганизмов или из материала животного происхождения A01N63; пищевые составы A21,A23; лекарственные препараты A61K; химические аспекты или использование материалов для бандажей, перевязочных средств, впитывающих подкладок или хирургических приспособлений A61L; удобрения C05); размножение, консервирование или сохранение микроорганизмов (консервирование живых тканей или органов людей или животных A01N1/02); мутации или генная инженерия; питательные среды (среды для микробиологических испытаний C12Q) (11911)
C12N9                 Ферменты, например лигазы (6.); проферменты; композиции их (препараты для чистки зубов, содержащие ферменты A61K7/28; лекарственные препараты, содержащие ферменты или проферменты A61K38/43; составы моющих средств, содержащих ферменты C11D); способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов (приготовление солода C12C1)(1621)
C12N9/14 - Гидролазы (3.)(154)
C12N9/22 - Рибонуклеазы(54)
C12N9/34 - Глюкоамилаза(29)
C12N9/46 - Декстраназа(3)
C12N9/50 - Протеиназы(58)
C12N9/54 - Из bacillus(32)
C12N9/60 - Из дрожжей (3)
C12N9/62 - Из aspergillus(24)
C12N9/66 - Эластаза(4)
C12N9/72 - Урокиназа(18)
C12N9/74 - Тромбин(8)
C12N9/82 - Аспарагиназа(19)
C12N9/88 - Лиаза (4.)(49)
C12N9/90 - Изомераза (5.)(7)
C12N9/94 - Панкреатин(2)

Новый вариант гидролазы и способ получения l-триптофана // 2793185
Изобретение относится к новому варианту гидролазы, штамму Escherichia coli, содержащему данный вариант, и способу продуцирования L-триптофана с использованием данного штамма. Изобретение позволяет получать L-триптофан с высокой степенью эффективности.

Ферментативное образование перкислоты для применения в продуктах для ухода за полостью рта // 2793140
Группа изобретений относится к области способов и продуктов для личной гигиены. Предлагается способ ухода за полостью рта, включающий: 1) обеспечение набора реакционных компонентов, содержащего: по меньшей мере один субстрат, выбранный из группы, состоящей из сложных эфиров или глицеридов или сложных эфиров с определенной структурой или ацетилированных сахаридов, выбранных из ацетилированных моно-, ди- и полисахаридов; источник кислорода пероксигруппы и ферментный катализатор, обладающий пергидролитической активностью, представляющий собой гибридный белок с SEQ ID NO: 425-430, 438-459, 461-464, 466, 467 или 479; 2) объединение указанных выше реакционных компонентов при подходящих реакционных условиях, посредством чего ферментативно получают по меньшей мере одну перкислоту; и 3) приведение в контакт поверхности полости рта по меньшей мере с одной перкислотой, посредством чего поверхность полости рта получает основанный на перкислоте полезный эффект, такой как осветление, отбеливание зубов, обеззараживание, обесцвечивание, дезодорирование, уменьшение или устранение биопленки или их комбинацию.

Способ получения препарата рибонуклеопротеинового комплекса crispr-cas12 и препарат для выявления днк вируса гепатита b в ультранизких концентрациях // 2792891
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения препарата рибонуклеопротеинового комплекса CRISPR-Cas, а также к полученному указанным способом препарату. Изобретение может быть использовано для выявления единичных копий ДНК вируса гепатита В.

Способ получения композиционного препарата бромелайна и альгината натрия в виде густого раствора // 2792785
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения композиционного препарата бромелайна и альгината натрия в виде густого раствора, включающий иммобилизацию ферментного препарата бромелайна в густой раствор альгината натрия в соотношении 10 мл раствора бромелайна в концентрации 20 мг/мл на 1 г сухого альгината натрия, предварительно растворенного в 10 мл буфера, инкубирование при комнатной температуре в течение 2 ч при постоянном перемешивании со скоростью 250 об/мин; в качестве буферного раствора для иммобилизации используют 0,05 М глициновый буфер с рН 8,6, содержащий цистеин в концентрации 0,04 М.

Способ получения гибридного препарата фицина и n-малеоилхитозана в виде густого раствора // 2792784
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения гибридного препарата фицина и N-малеоилхитозана в виде густого раствора, включающий иммобилизацию ферментного препарата фицина в густой раствор N-малеоилхитозана с молекулярной массой 200 кДа в соотношении 10 мл раствора фицина в концентрации 2 мг/мл на 1 г сухого N-малеоилхитозана, предварительно растворенного в 10 мл буфера, инкубирование при комнатной температуре в течение 2 ч при постоянном перемешивании со скоростью 250 об/мин; в качестве буферного раствора для иммобилизации используют 0.05 М глициновый буфер с рН 10.0.

Способ получения гибридного препарата фицина и ацетата хитозана в виде густого раствора // 2792783
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения гибридного препарата фицина и ацетата хитозана в форме густого раствора, включающий иммобилизацию ферментного препарата фицина в густой раствор ацетата хитозана с молекулярной массой 600 кДа в соотношении 10 мл раствора фицина в концентрации 2 мг/мл на 1 г сухого ацетата хитозана, инкубирование при комнатной температуре в течение 2 ч при постоянном перемешивании со скоростью 250 об/мин; в качестве буферного раствора для иммобилизации используют 0.05 М глициновый буфер с рН 10.0.

Новый вариант цистеинсульфинат-десульфиназы и способ получения l-валина с его применением // 2792650
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен полипептид, участвующий в продуцировании L-валина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой пролин, который представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 302 SEQ ID NO: 3, заменен серином.

Новый вариант глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназы и способ получения l-валина с его применением // 2792640
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен полипептид, участвующий в продуцировании L-валина, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой глицин, который представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 134 SEQ ID NO: 3, заменен серином.

Рибулозофосфат-3-эпимеразный мотив с низкой побочной реакционной способностью и фермент, содержащий указанный мотив // 2792229
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой применение рибулозофосфат-3-эпимеразы для получения псикозо-6-фосфата или псикозы. Изобретение относится также к применению микроорганизма, продуцирующего рибулозофосфат-3-эпимеразу для получения псикозо-6-фосфата или псикозы.

Способ получения l-лизина модифицированием гена аконитазы и/или его регуляторных элементов // 2792116
Изобретение относится к способу получения L-лизина ферментацией. Способ предусматривает модификацию гена аконитазы и/или его регуляторного элемента в хромосоме бактерии таким образом, что активность и/или уровень экспрессии аконитазы бактерии уменьшаются, но не элиминируются, и продуцирование L-лизина путём ферментации в бактерии, полученной с помощью указанной модификации.

Солюбилизированные апиразы, способы и применение // 2791992
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой солюбилизированную человеческую апиразу, содержащую модификации: N-концевую делецию, C-концевую делецию и модификацию центральной области, где длина N-концевой делеции составляет от 30 до 50 аминокислот, длина C-концевой делеции составляет от 20 до 40 аминокислот, и модификация центральной области включает в себя делецию от 10 до 15 последовательно расположенных аминокислот, где делеция представляет собой делецию аминокислот под номерами от 193 до 204 по отношению к последовательности CD39 дикого типа согласно SEQ ID NO: 1 и где модификация центральной области включает в себя точечную мутацию, предусматривающую одну, две, три, четыре или пять точечных мутаций по отношению к последовательности CD39 дикого типа согласно SEQ ID NO: 1, выбранных из группы, состоящей из K71E, N73Q, V95A, G102D, Y104S, T106S, R113M, L149M, V151A, E173D, T229A, L254M, K258R, W263R, E276D, N292Q, R304G, I319T, N327Q, A362N, F365S, N371Q, K405N, Y412F, L424Q, H436D, I437N, F439S, G441D, N457Q, P463S и S469R.

Способ обнаружения гена exou, кодирующего экзотоксин системы секреции третьего типа, pseudomonas aeruginosa в ультранизких концентрациях и специфические олигонуклеотиды для использования в способе // 2791880
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к олигонуклеотиду для предварительной амплификации высококонсервативного фрагмента гена exoU Pseudomonas aeruginosa и к содержащему его набору.

Система crispr-cas12 для выявления гена exou, кодирующего экзотоксин системы секреции третьего типа, pseudomonas aeruginosa, в ультранизких концентрациях // 2791879
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к молекуле направляющей РНК системы CRISPR-Cas, рибонуклеопротеиновому комплексу системы CRISPR-Cas, содержащему вышеуказанную молекулу, а также к наборам, содержащим рибонуклеопротеиновый комплекс системы CRISPR-Cas и специфические олигонуклеотиды.

Средство разрезания днк на основе sccas12a белка из бактерии sedimentisphaera cyanobacteriorum // 2791447
Группа изобретений относится к биотехнологии. Настоящее изобретение описывает применение бактериальной нуклеазы системы CRISPR-Cas12a из бактерии Sedimentisphaera cyanobacteriorum L21-RPul-D3 для образования строго специфичных двунитевых разрывов в молекуле ДНК.

Новый вариант растворимой пиридиннуклеотидтрансгидрогеназы и способ получения l-триптофана с его применением // 2791243
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена растворимая пиридиннуклеотидтрансгидрогеназа, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой аланин, который представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 145 в SEQ ID NO: 3, заменен валином.

Новый вариант феррохелатазы и способ получения l-триптофана с его применением // 2791193
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой вариант феррохелатазы, обладающий активностью феррохелатазы, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой глицин, который представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 137 в SEQ ID NO: 3, заменен аспарагиновой кислотой.

Аминоацил-трнк-синтетаза, эффективное введение производных лизина // 2790662
Настоящее изобретение предоставляет мутантную аминоацил-тРНК-синтетазу, имеющую делеционную мутацию в соответствующей аминокислотной последовательности аминоацил-тРНК-синтетазы дикого типа: 102-й, 128-140-й и 159-179-й аминокислотные остатки.

Варианты trem2, устойчивые к действию шеддазы // 2790661
Изобретение относится к биотехнологии. Представлена нуклеиновая кислота, содержащая последовательность, кодирующую TREM2 человека, отличающаяся тем, что TREM2 человека содержит мутантный стеблевой участок, содержащий аминокислотную последовательность, выбранную из любой из SEQ ID NO: 33-40, который придает устойчивость к расщеплению шеддазой.

Новый вариант экспортирующей медь атфазы а р-типа и способ получения l-триптофана с его применением // 2790565
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена экспортирующая медь АТФаза А Р-типа, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой серин, который представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 786 в SEQ ID NO: 3, заменен аспарагином.

Новый вариант дезоксигуанозинтрифосфаттрифосфогидролазы и способ получения l-триптофана с его применением // 2790563
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена дезоксигуанозинтрифосфаттрифосфогидролаза, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1.

Новый вариант таутомеразы ppta и способ получения l-триптофана с его применением // 2790562
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена таутомераза pptA, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой аргинин, который представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 31 в SEQ ID NO: 3, заменен гистидином.

Новый вариант киназы/фосфатазы изоцитратдегидрогеназы и способ получения l-триптофана с его применением // 2790512
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой киназу/фосфатазу изоцитратдегидрогеназы, состоящую из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой глутаминовая кислота, которая представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 26 в SEQ ID NO: 3, заменена лизином.

Улучшенный способ получения фукозилированных олигосахаридов // 2790445
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к получению 2'-фукозиллактозы с использованием генетически модифицированной прокариотической клетки-хозяина. Клетку-хозяина генетически модифицируют таким образом, что по меньшей мере (1) активность фермента, преобразующего фруктозо-6-фосфат, понижена или подавлена и/или путем повышения активности фруктозо-1,6-бифосфат-фосфатазы; (2) по меньшей мере один ген, кодирующий фермент, необходимый для синтеза ГДФ-фукозы de novo, сверхэкспрессирован в клетке-хозяине; (3) экзогенный ген, кодирующий альфа-1,2-фукозилтрансферазу, экспрессирован в клетке-хозяине; и (4) ген, кодирующий фруктозо-1,6-бифосфат-альдолазу, сверхэкспрессирован.

Варианты протеаз и пути их применения // 2790443
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен вариант субтилизина, имеющий одно или более улучшенных свойств по сравнению с эталонным субтилизином, содержащим аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, при этом улучшенное свойство выбирают из улучшенной протеазной активности, улучшенного очищающего действия в моющем средстве и улучшенной термостабильности в моющем средстве.

Последовательность нуклеотидов, кодирующая β-n-ацетилгексозаминидазу aggregatibacter actinomycetemcomitans, и генетические конструкции, её содержащие // 2789544
Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложена нуклеиновая кислота, выбранная из SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 4, кодирующая β-N-ацетилгексозаминидазу Aggregatibacter actinomycetemcomitans.

Модуляторы тау и способы и композиции для их доставки // 2789459
Изобретение относится к области биотехнологии. Описана группа изобретений, включающая репрессор транскрипции гена ассоциированного с микротрубочками белка тау (MAPT), полинуклеотид, кодирующий репрессор транскрипции, средство доставки генов, фармацевтическую композицию для подавления экспрессии MAPT, применение репрессора транскрипции, полинуклеотида, средства доставки генов и/или фармацевтической композиции для подавления экспрессии MAPT у субъекта и набор для подавления экспрессии MAPT.

Сконструированный ботулинический нейротоксин // 2789302
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантных полипептидов ботулинического нейротоксина (BoNT), и может быть использовано в медицине для лечения состояния, связанного с нежелательной нейрональной активностью.

Способ получения препарата декстраназы и его применение // 2789083
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу получения препарата декстраназы Aspergillus insuetus ВКМП F - 342. Способ включает: получение рабочей культуры на скошенном агаре; приготовление глубинной посевной культуры в колбах; приготовление глубинной посевной культуры в ферментере; проведение процесса биосинтеза в ферментерах; сепарирование на проточном сепараторе; концентрирование нативного раствора на ультрафильтрационной установке; смешивание с маннитом, стерилизующую фильтрацию, замораживание; сублимационное высушивание, при этом маннит добавляют из расчета 1 г на 8000-12000 ед.

Штамм бактерий bacillus licheniformis 47018, обладающий способностью продуцировать термостабильную альфа-амилазу // 2788850
Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии. Предложен штамм бактерий Bacillus licheniformis 47018, депонированный в ВКПМ под регистрационным номером ВКМВ В-14248 и являющийся продуцентом термостабильной альфа-амилазы.

Способ оценки тромболитического потенциала микромицетов // 2788697
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ оценки тромболитического потенциала микромицета, включающий определение в пробе его культуральной жидкости показателей степени тромболизиса, наличия фибринолитической активности и активаторной к плазминогену активности, температурного оптимума и pH-оптимума с последующим расчетом коэффициента тромболитического потенциала ТП по представленной формуле с последующим ранжированием коэффициента тромболитического потенциала ТП для исследуемого микромицета: при ТП < 8 - низкий тромболитический потенциал исследуемого микромицета; при 8 ≤ ТП ≤ 12 - средний тромболитический потенциал исследуемого микромицета; при ТП > 12 - высокий тромболитический потенциал исследуемого микромицета.

Ферменты лактазы с улучшенными свойствами // 2788608
Настоящее изобретение относится к области молекулярной биологии и пищевой промышленности, в частности к новым пептидам, проявляющим повышенную ферментативную активность бета-галактозидазы, а также к улучшенным способам снижения содержания лактозы в композициях и способам получения молочных продуктов на их основе.

Способы лечения фенилкетонурии // 2788484
Изобретение относится к биотехнологии. Описан векторный геном на основе рекомбинантного аденоассоциированного вируса (rAAV) для лечения фенилкетонурии (ФКУ), содержащий: промотор; и кодон-оптимизированную последовательность, кодирующую фенилаланингидроксилазу человека (hPAH); причем кодон-оптимизированная последовательность содержит SEQ ID NO: 7; или ее вариант, имеющий по меньшей мере 95% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 7.

Способы и композиции для увеличения урожайности низкорослых растений путем манипуляции метаболизма гиббереллина // 2788379
Изобретение относится к области биохимии, в частности к конструкции рекомбинантной ДНК. Также раскрыты вектор для трансформации, трансгенное растение кукурузы, содержащие указанную конструкцию рекомбинантной ДНК.

Одновременное редактирование генов и индукция гаплоидов // 2788349
Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу редактирования геномной ДНК растения. Изобретение позволяет эффективно трансформировать линии гаплоидов с тем, чтобы она кодировала клеточный механизм, способный редактировать гены.

Средство разрезания днк на основе cas9 белка из бактерии streptococcus uberis nctc3858 // 2788197
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к применению нуклеазы Cas9 для образования двунитевого разрыва в молекуле ДНК. Также раскрыт способ изменения последовательности геномной ДНК одноклеточного или многоклеточного организма, включающий введение в по меньшей мере одну клетку этого организма эффективного количества вышеуказанной нуклеазы Cas9.

Способы терапии на основе car т-клеток с повышенной эффективностью // 2788131
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к иммунной эффекторной клетке, модифицированной способами инженерии для экспрессии химерного рецептора антигена (CAR), содержащей ингибитор Tet2 и нарушение гена Tet2, способу ее производства, а также к содержащей ее композиции и популяции.

Пептид для лечения возрастной макулярной дегенерации // 2788083
Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой мутантный пептид SPINK2, который ингибирует протеазную активность человеческой HTRA1. Изобретение относится также к полинуклеотиду для применения в лечении или профилактике заболевания, связанного с HTRA1, содержащему нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, содержащуюся в полученном пептиде, а также к использованию такого пептида в составе векторов, конъюгатов, фармацевтических композиций для применения в лечении или профилактике заболевания, связанного с HTRA.

Материалы и способы лечения рака // 2787828
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения Т-клетки с химерным антигенным рецептором, имеющей пониженный уровень полипептидов гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF).

Новый вариант цитозинпермеазы и способ получения l-триптофана с его применением // 2787791
Изобретение относится к биотехнологии. Предложена цитозинпермеаза, состоящая из аминокислотной последовательности, представленной SEQ ID NO: 1, в которой изолейцин, который представляет собой аминокислоту, соответствующую положению 401 в SEQ ID NO: 3, заменен треонином.

Применение т5 промотора для экспрессии гена бета-литической протеазы lysobacter capsici vkm b-2533т и штамм l. capsici blp pт5-продуцент данной протеазы // 2787787
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к получению бета-литической протеазы Blp. Предложена плазмидная ДНК pBBR1-MCS5blp-PT5, обеспечивающая экспрессию бета-литической протеазы Blp и содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1, включающую последовательность промотора Т5, гена blp, кодирующего Blp из L.

Штамм дрожжей komagataella phaffii с инактивированным геном his4 - реципиент для конструирования безмаркерных штаммов-продуцентов гетерологичных белков // 2787584
Изобретение относится к области биохимии, в частности к штамму дрожжей Komagataella phaffii TGBF7 ВКПМ Y-5013 с инактивированным геном HIS4. Заявленное изобретение позволяет эффективно конструировать безмаркерный штамм дрожжей Komagataella phaffii для получения гетерологичных белков.

Способ получения олигофруктозы // 2787375
Изобретение относится к области пищевой промышленности, в частности к способам получения пребиотиков. Предложен способ получения олигофруктозы.
Рекомбинантный белок нуклеазы бактерий serratia marcescens для гидролиза нуклеиновых кислот // 2787186
Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантному получению ферментов в Е. coli, и может быть использовано для получения рекомбинантного белка нуклеазы Serratia marcescens.
Способ определения активности лизоцима в ротовой жидкости // 2786802
Изобретение относится к медицине, в частности к стоматологии и биотехнологии и может быть использовано для оценки уровня иммунной защиты от патогенной микрофлоры в ротовой жидкости и касается способа определения активности лизоцима в ротовой жидкости.

Ферментная реакционная среда, содержащая поверхностно-активное вещество // 2786657
Группа изобретений относится к биотехнологии и направлена на улучшение реакционной среды для реакций ферментативного синтеза. Предложена водная реакционная смесь для проведения ферментативной реакции, содержащая фермент, субстрат фермента и ПАВ.

Рекомбинантный штамм дрожжей ogataea haglerorum - продуцент фитазы escherichia coli // 2785901
Изобретение относится к биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм дрожжей Ogataea haglerorum ВКПМ Y-4951 - продуцент фермента фитазы Еscherichia coli.

Варианты свиного трипсина // 2783315
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к полипептидным вариантам свиного трипсина, молекулам нуклеиновых кислот, кодирующим эти варианты, и клеткам-хозяевам, содержащим такие молекулы нуклеиновых кислот.

Способ обнаружения днк вируса гепатита b в ультранизких концентрациях и специфические олигонуклеотиды для использования в способе // 2782951
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к олигонуклеотидам для предварительной амплификации высококонсервативных участков генома вируса гепатита В и к содержащему их набору. Изобретение позволяет эффективно выявлять ДНК вируса гепатита В после проведения специфической амплификации фрагментов генома этого вируса.

Сконструированные мишень-специфические нуклеазы // 2782794
Изобретение относится к биотехнологии и медицине и представляет собой сконструированный полудомен расщепления FokI. Изобретение относится также к сконструированной нуклеазе, содержащей указанный домен расщепления, а также представляет собой способ расщепления геномного клеточного хроматина в представляющей интерес области, включающий экспрессию искусственной нуклеазы, содержащей cконструированный домен расщепления в клетке, причем нуклеаза сайт–специфически расщепляет последовательность нуклеотидов в представляющей интерес области геномного клеточного хроматина.

Способ получения препарата рибонуклеопротеинового комплекса crispr-cas и препарат для выявления гена exou, кодирующего экзотоксин системы секреции третьего типа, pseudomonas aeruginosa // 2782739
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения препарата рибонуклеопротеинового комплекса CRISPR-Cas, а также к полученному указанным способом препарату. Изобретение может быть использовано для выявления единичных копий гена exoU Pseudomonas aeruginosa.
 
.
Наверх