Способ получения капсульного антигена @ @

 

ВФЕФОЮЗНФЯ

ВЛЯ6ИФТ®f.4И". Ф,".й . ьиьли" н . Я0„„0257

СОЕЗ СОВЕТСИИ

: СОЦИАЛИ(УИЧЕСКИХ ЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

tlO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCKOhtlY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Ц р;

Ф (21) 3379991/28-13.r (22) 05.01.82 (46) 30.06.83. Бюл. Ф 24 (72 ) И.Я. Мошиашвили, С.И. Елкина, Н.Г. Калина и В.В. Сергеев (71) Московский научно-исследователЬский институт вакцин и сывороток им.. И.И. Мечникова (53) 576.8.097 (088 ° 8.) (56) 1. Лабинская А,С. Микробиология с техникой микробиологических методов исследований. М,, "Медицина", 1968;.2. Пяткин К.д., Кривошеин Ю.С..

Микробиология. М., "Медицина", 1980 (прототип). (Р С 120 1/00//А 61 К 39/09-: (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КАПСУЛЬ-НОГО АНТИГЕНА,STREPTOCOCCUS PNEUMOHIAL путем выращивания микроорга низмов на плотной питательной среде с последующим смывом биомассы и вы" делением целевого продукта, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, выращивание осуществляют на целлофановых дисках, расположенных на поверхности питательной среды в 3-4 слоя, при этом посев осуществляют на каждый диск, а смыв биомассы проводят с второго и вышерасположенных дисков.

Способ Количество проб

Кратность увеличен- ного вы хода

Выход капсульного антигена, мг

Объем посевного материала, мл

Объем . среды, л

ыход ан игена, мг

Известный

16 7

500

500

100

Предлагаемый при однократном исполь зовании питательной

500

167

100 среды

Предлагаемый при трехкратном использовании пи тательной

42 5

150

210

700

- 100 среды

Изобретение относится к микробио логии, в частности к получению капсульного антигена.

* Известен способ повучения капсульного антигена путем выращивания, Streptococcus pneumonial в жидкой питательной среде .с последующим выделением целевого продукта 1 ), Однако данный способ не обеспечивает высокий выход антигена. Кроме того, процесс очистки антигена трудо. емок из;за присутствия других антигенов.

Известен также способ получения капсульного антигена Streytococcus

pneumonial путем выращивания микро-. организмов На плотной питательной среде с 5-103 крови с последующим смывом биомассы и выделением целево. го продукта P2) .

Однако известный способ не обеспечивает высокий выход целевого продукта.

Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения капсульного антигена Streptococcus

pneumonial путем выращивания микроорганизмов на плотной питательной среде с последующим смывом биомассы и выделением целевого продукта, выращивание осуществляют на целлофа- новых дисках, расположенных на поверхности питательной среды в 3-4 слоя, при этом посев осуществляют на

025723 2 .каждый диск, а смыв биомассы проводят с второго и вышерасположенных дисков.

Пример . Накануне выращива-. ния по размерам донышка чашки Петри . из целлофана вырезают диски, пере" кладывают их фильтровальной бумагой и стерилизуют в автоклаве. В день выращивания по чашкам Петри разливают питательную среду не менее .25 мл

>0 на чашку диаметром 9,5 см. После застывания среды на ее поверхность кладут диск .из целлофана и с помощью шпателя производят посев четырехчасовой культуры (объем посевного материала должен быть не меньше

0,1 мл). Далее кладут следующий диск и аналогичным образом производят посев культуры и так до четвертого диска. Затем чашки закрывают крыш20 ками и, не переворачивая, помещают в термостат. Через 18-20 ч-выращивания верхние диски снимают и пропаласкивают в физиологическом растворе.

Диск, лежащий на питательной среде, 25 снимают в стерильНых условиях и на ту же питательную среду на новые диски из целлофана вторично производят посев культуры того же стереотипа Streptococcus pneumonial описанным выше способом. В случае необходимости операцию можно повторить еще раз.

Данные по выходу капсульного антигена полученного предлагаемым и известным способами, представлены в таб35 лице.

Составитель П. бонарцев

Редактор А. Огар Техред N.Teïåð Корректор Г. Решетник

Заказ 4497/20. Тираж 523 . Подписное. ВНИИПИ .Государственного комитетат СССР по делам изобретений и открытий. 113035, Москва, Ж"35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал. ППП "Патент", r. Ужгород., ул. Проектная, 4

3 10

Как следует из таблицы, выход капсульного антигена при одинаковой посевной дозе позволяет повысить выход антигена с единицы объема пита-» тельной среды.

Использование предлагаемого спо".. соба позволяет повысить выход кап"

25723 4 сульного антигена, многократно использовать рдну и ту же питательную среду, что в свою очередь обеспечивает зкономию питательных сред. Кроме того, в смывах с целлофановых дисков отсутствуют посторонние примеси, что повышает чистоту целевого продукта и упрощает его очистку.