Питательная среда для выращивания гриба @ @ -продуцента рибофлавина

 

СОЮЗ СО8ЕТСНИХ

IWIIOIIH

РЕСПУБЛИН зд) С 12 и l 14 С -12-Р 25/00

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И OTHPhfAO

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ- ::: -. .И ABTOPCKOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ.(21) 3440308/28-13 (22) 19.05.82 (46)- 07.09.83. Бюл. II 33 (72) В.А.Ширшов, Т.Ф.Костенко, В .К .Скоропад, Е.В,Васильева, В .А.Ла. рионова и Б.В.Рафальская (71) Всессюэный научно-исследовательский институт микробиологических средств защиты растений и бактери- . альных препаратов (53) 663: 577.164.12(088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР

Н 436080, кл. С 12 Р25/00, 1972.

2. Авторское свидетельство СССР:

N 529211, кл. С 12 и 1/20, 1975.

3. Авторское свидетельство СССР

I1 389132, кл. С 12 P 25/00, 1972 (прототип) ...Я0„,» 962 A (54) (57) питАтельнАя, сРедА для BbIPAщиВАния ГРИБА екеиОтнесГОм AsHBYI I.ПРОДУЦЕНТА РИБОФЛАВИНА, содержащая гидрол, мел химический и воду водопроводную, о т л и ч à ю щ а я с я тем, что, с целью повышения выхода рибофлавина и удешевления среды, она . дополнительно содержит биомассу сухоro активного ила или его серно-кис" лотный гидролиэат при следующем соотношении компонентов, мас.Ф/ 100 мл воды:

Гидрол 3,0-6,0

Мел химический 0 5-0,6

Биомасса сухого активного ила, или его сернокислотный гидролиэат. 1,0-4,0

10 39962

Ф

Изобретение относитcR к микробиологическои промьншленности, а именно к питательной среде для выращивания продуцента рибофлавина.

Известна питательная среда для выращивания гриба El8f110theciUN

ashbyIi - продуцента рибофлавина, в состав которой входят отходы пе" реработки семян масличных культур, кукурузный экстракт, гидрол, сахар, солод, мел химический, дрожжи, соль поваренная, сернокислый магний, сернокислое железо, микроэлементы, жир технический и вода. 1 ).

Недостатком данной среды явля" ется низкая активность рибофлавина, которая составляет в среднем

1400 мкг/мл, кроме того, эта среда дорогостоящая, так как содержит двенадцать компонентов, два иэ ко" 20 торых являются пищевыми (сахар и поваренная соль).

Известно использование сухого активного ила в качестве питатель" ной среды для выращивания бактерий Baci11us thur 1ngiersus, который является источником азота, ви" таминов и минерального питания $2 ), Наиболее близкой к изобретению по составу является среда для культивирования гриба Eremothecium

ashbyii, продуцирующего, рибофлав ин, включающая соевую муку и кукурузный экстракт в качестве источника азота и фосфора, солод, мел химический,, поваренную соль, дрожжи сухие, сахарозу и гидрол в качестве источника углерода и необходимые минеральные соли, используемая в промышленности как регламентная питательная среда (3g.

Недостатком известной среды является низкая активносfb рибофлавина, составляющая 1000-1200 мкг/мл.

Целью изобретения является повышение выхода рибофлавина и удешевле ние среды.

Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания гриба Er ashbyii " продуцента рибофлавина, содержащая гидрол, мел химический и воду водопро- 50 водную, дополнительно содержит био" массу сухого активного ила или его серно-кислотный гидролизат при следующем соотношении компонентов„ мас.Ф/

:100 мл воды: 55

Гидрол 3, 0-6,0

Мел химический 0,5-0,6

Биомасса сухого активного ила или его серно-кислотный гидролиэат 1,0-4,0

Гидрол, входящий а состав питательной среды, получают как отходы при производстве кристаллической глюкозы, По химическому составу гидрол содержит глюкозу, Фосфор и поааренную соль, а для культивирования Er, а sbbyii наилучшим источником углерода является глюкоза. В связи с этим сахар, входящий в состав регламентной питательной среды, может быть заменен на гидрол, а поваренная соль исключена иэ нее.

В производственном отношении сухой активный ил является удобным сырьем: он накапливается а аэротенках в процессе биологической очистки жидких отходов, получаемых при производстве сухих кормовых дрожжей (БВК а также при производстве органических растворителей.

Сухой активный ил, получаемый на заводах кормовых дрожжей и органических растворителей, по своим питательным качествам обладает ценными свойствами:содержит 50-57,0ь сырого протеина, витамины и минеральные,элементы. Таким образом,. сухой активный ил является источником азота, витаминов и минераль-! ного питания для микроорганизмов.

П р и и е р 1. Состав применяе,мой среды, мас.4:

Сухой активный ил 1,0

Гидрол. 3,0

Иел химический 0,5

Вода водопроводная - до 100 мл, рН после стерилизации 6,6-6,. 8

Приготовление среды для ферментеров ведется в специальных чанах-смесителях, установленных в отделении для приготовления питательных сред.

Среду готовят в две партии. Состав ферментационной среды: 1 партиясухой активный ил, мел химический и вода водопроводная; 2 партиягидрол, вода водопроводная.

Первую партию среды готовят а чане-смесителе 15 мз, оборудованном мешалкой и барботером для подачи пара. Набирают 3-5 м з аодопраподной воды, загружают ",ухой активный ил

62

Условия приготовления и стерилизации по примеру 1. Активност.ь рибофла вина 1869 мкгlмл.

П р и м е p 5+ Состав приготовля" емой среды, мас.Ф:

Серно-кислотный гидролиэат сухого активного ила 1

Гидрол 6

Иел химический 0,5

Вода водопроводная- до 100 мл.

Условия,те же, что и в примере 1. Акт тивность рибофлавина на среде этого состава составляет 1840 мкг/мл-.

Результаты проведенных исследований показывают, что питательные среды с сухим активным илом или его серно-кислотным гидролизатом повышают выход кормового концентрата рибофлавина при культивировании Ег.

ashbyii на 10-15ь по сравнению с регламентной средой, содержащей сое-. вую муку, кукурузный экстракт, сахар и поваренную соль. Оптимальное количество сухого активного ила 2,0-3,0Ф, гидрола 6,04, (3,0ь по редуцирующим веществам) и мела 0,5ь. Увеличение в питательной среде сухого активного ила до 4,04 не дает положительных результатов.

Наличие в среде сухого активного ила создает благоприятные условия для развития Er. ashbyii - продуцента рибофлавина.

Таким образом, питательная среда, содержащая биомассу сухого активного ила или его серно-кислотный гидролизат, гидрол, мел химический, может быть использована для производства кормового рибофлавина на основе Er. àshbyii и соевую муку и ку" курузный экстракт - пищевой и дефицитный продукт можно заменить на био массу сухого активного ила или его серно-кислотный гидролизат, а сахар и поваренную соль - гидролом, что приводит к удешевлению питательной среды, раж 523 Подписное од, ул. Проектная, 3,0

6,0

0,5

10399 и мел при помощи вакуума, создаваемого в чане вакуум-насосом, затем загружают в нужном количестве 303-ную щелочь из мерника для подведения рН до 7,8, среду нагревают до

90 С и выдерживают при этой температуре 15-20 мин.

Вторую партию среды готовят в чане-смесителе, оборудованном мешалкой и барботером для подачи пара. И}

Набирают 1-2 м водопроводной воды, задают в нужном количестве гидрол, затем среду нагревают до 80 С, стери" лизуют питательную среду в установ" ке непрерывного действия. Стериль-,15 ныл питательные среды подают насосом в ферментер, Для доведения до нужного объема среды в ферментер подают стерильную водопроводную воду.

После заполнения ферментера среду 20 о охлаждаот до 30 С. Полученную среду для ферментации засевают жидкой по" севной культурой Ег . ashbyii, После стерилизации перед засевом рН среды должно быть 6,6-6,8. Активность 25 рибофлавина на этой среде равна

1348 мкгlмл.

П р и м.е р 2. Состав приготовляемой среды, мас.4:

Сухой активный ил 2,0

Гидрол 4,0 (23 по РВ) °

Мел химический 0,6

Вода водопроводная - до 100 мл, рН после стерилизации 6,7-6,8

Условия приготсаления и стерилизации среды те же, что и в примере 1.

Активность рибофлавина на этой сре де 1616 мкг/мл.

Пример 3. Состав приготовля- 40 емой среды, мас.4:

Сухой активный ил

Гидрол

Иел химический

Вода водопроводная до ll00 мл; рН после стерилизации 6,7-6,8

Условия приготовления среды и стерилиэацйи те же, что и в примере 1.

Активность рибофлавина составляет ©

1815 . мкгl мл. .5О

ll р и м е р 4. Состав среды, мас.Ф:

Сухой активный ил 4,0

Гидрол 6,0

Иел химический 0,5 ода водопроводная до 100 мл

ВНИИПИ Заказ 6819/26 Ти

Филиал ППП "Патент", г. Ужгор

Таким образом, предлагаемая среда по своему составу отличается от известной тем, что взамен соевой муки и кукурузного экстракта в нее введен сухой активный ил (или гидролизаты его),т.е. значительно проще по составу.