Способ выделения биомассы бактерий

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (сы С !2 N 1/02

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3304284/28 — 13 (22) 19.06.81 (46) 23.04.85. Бюп. N - 15 (72) Б. С. Ксенофонтов, Я. Я. Шкоп, Н. В. Фомченко и П. А. Смыслов (71). Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ (СССР) и Институт технической микробиологии, Берлин (ГДР) (53) 663.14(088.8} (56) 1. Заявка Франции 11 - 2174930, кл. С 12 К l/04, опублик. 1973.

2. Авторское свидетельство СССР

Р 835170, кл. С 12 N 1/02, 1979. (54)(57)1.СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ БИОМАССЫ

БАКТЕРИЙ из культуральной жидкости, „„SU, „1045622 А предусматривающий добавление щелоч— ного гидролизата дрожжей, нагревание и доведение рН среды до значений 24 добавлением кислоты, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью повыщения степени выделения биомассы, щелочной гидролизат вводят в смеси с биомассой дрожжей, взятой в соотношении {6-)0):1, при этом добавление кислоты ведут так, чтобы скорость изменения рН составляла 0,2-1,0 ед/мин.

2. Способ о и. 1, о т л и ч а ю шийся тем, что щелочной гидролизат биомассы дрожжей получают путем нагревания биомассы при тем0 пературе 75-95 С, рН 10-12 в течение

30-60 мин.

)045622

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу выделения биомассы бакте— рий из культуральной жидкости.

Известен способ выделения бактерий, предусматривающий добавление раствора щелочи при нагревании с последук?щим понижением рН до 2-5 с помощью кислоты (l) .

Известен также способ вь?деления ?б биомассы бактерий из культуральной жидкости, предусматривающий добавление щелочного гидролизата дрожжей, нагревание и доведение рН среды до значений 2-4 добавлением кислоты 15

2j . Степень выделения биомассы составляет 827..

Недостатком известного способа является недостаточно высокая степень. выделения биомассы. 20

Цель изобретения — повышение степени выделения биомассы.

Указанная цель достигается тем, что в способе выцеления биомассь? бактерий из культуральной жидкости, 2к предусматривающем добавление щелочного гидролиза;а дрояскей, нагрегание и доведение рН среды да значений 2-4 добавлением кислоты., предложено щело-.ной гидролизат вводить в см си с био-30 массой дрожжей. взятой в соотношении (6-10):1, при этам добавление кислоты нести таким образом„ чтобы скорость измерения рН составляла 0,21,0 ед/мин. Предпочтительно шелачной гидрализат биомассы дрожжей получать путем нагревания биомассы при температуре 75-95 С, рН 10-12 в течение о, 30-60 мин.

Способ осуществляют следующим образом.

Агрегацию бактеоиальнай биама".ñb? с содержанием АСВ 1 абсолютна сухих веществ) 0,9 — 2,5X проводят путем падкисления и добавления смеси дрожжей 1 с их гидролизатом. Изменение рН бактериальной суспензии да значения 2 5-.

4,0 осуществляют добавлением неорганической кислоты, например. серной или фосфорной. Затем в эту суспензию,, добавляют заранее приготовленную смесь биомассы дро??Окей в частности выращенных на н-парафинах, с их гидроливатом в количестве 1-6X„

Смесь биомассы дрожжей с их гидро-5 лизатом получают следующи?1 Образом.

В концентрированную суспензию, содержащую 12-157 АСВ дралокей, добавляют

202-ный раствор гидрата окиси калия да рН 1! --! 2 и полученную смесb выдерживают при интет-:сивном перемешивании, температуре 80 С в течени:- 30-60 мин. .о

Затем в полученный гидролизат добав— ляют биомассу дрожжей Ве::овое соотношение биомассы дроьоке?; и их -.Идролизата составляет (6-10):1. Иен-.шее количество дроюкей в смеси ке водит к повышению степени кон:.,:=. .?ðiрова??ия и эффективности вь?це..?=.;,.— ?ия бактериальных клеток,, о существенна увеличивает расход до:.;О?остаящега гидролизата,. Увеличение весовой дали дрожжей в их г;".,"„ролизате выше 10:1 нижает степень концентрировани:; бактериал,i?ы:,- клеток.

Послс добавления к выцепяе:-ьой бакте пиал:-.ь?gj „биама ссе кис??атÄi и смеси биома: сы дрожжей и ?х гидро. —,:.=:=заа суспензию бактерий нагревают до

80 -90".:: и разделяют отстаиванием или сепарацией. При этом степень концентрирования составляет О-:. 9 до !1, а степень вь?деления биомассы 97-99Х.

П р и и е р i. 1 100 ?1 бактери—

;-льной . Ус??ензии рП 6 7„ полученнои при в1кращив анин г11 сасасспз IT!F КНапа1? са -!<:- . метаноле, ".. одеркащей 1 „8/ АСБ

-;-актерий, добавляли 0,35 л 5,.-наго раствора фосфорной кислать; и :::еремешивали суспензию Б тече?1ие 3 мин> после чего ;начевие рН суспепзии стала 2 5 1?рине?=; ? когГОсть изменения рН была 1, ед/мин, Затем добавляли ! 1 г с? еси дрожжей., суспензии из ферментера и концентрированной дрожжевой биомассы, содержащей 15/ АСВ, подвергнуTQ? . предварительно lite?io÷ най обработке, Щелочную обработку кОкцент:..:.:Окан??Ой биОмассы праБОдили следую?К::=ч Образом; 0,2 кг суспензия смешив»ч?? = 20 ь1л 20Z — Hor <> гидрата. окиси кв??ия и выдерживали ее при интенсивном перемешивании, а рН 12, температуре 80 С в течение

50 мин. Весовое сООтнОшение драмОки= гедрах1изат в смеси сОставлялО 10:1, ?1осле НОДкиспения и дОбавления сме си дрожжей с их гицралчзатом бакте— риат?»н-7ю !успензию перемешив:: ли пpH !

J нагревании да 80 С в течение 5 мин и годавали на сепарацию. Степень концентрирования биомассы "0 2 при полноте выделения бактериальных клеток 99Х.

Пример 2. М 100 л бактер1=". алькой суспензии с рЛ 6,.5, палучен—

1045622

Редактор П. Горькова Техред М.Гергель Корректор Е. Рошко

Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений.и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Заказ 2796/2

Филиал .ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 ной при выращивании fethilococcus

capsulatus на природном газе. содержащей 2,2Х АСВ бактерий добавляли 0,3 5 "ного раствора фосфорной кислоты и перемешивали-суспензию в 5 течение 2 мин, после чего рН суспензии стало 3,25, причем скорость его изменения была равна 0,6 ед/мин, Затем в суспензию добавляли 9 r смеси дрожжевой биомассы и щелочного гидролизата концентрированныхдрожжей, содержащих 12Х АСВ, подвергнутого предварительно щелочной обработке, Щелочную обработку концентрированной биомассы проводили также, как в примере 2, 15 о но при температуре 95 С, рН ll 0 н течение 40 мин, Соотношение дрожжи.-гидролизат в смеси составило 8:1.

Бактериальную суспензию перемешивали и сепарировали так же, как в примере 20

1. Степень концентрирования биомассы

9 при полноте выделения бактериальных клеток 98, Пример 3. К 10 л суспензии бактерий Pseudomonas pubicler, содер-25 жащих 0,92 АСВ, добавляли 0,1 л

5%-ного раствора серной кислоты и перемешивали суспензию в течение

2 мин, после чего значение рН суспензии стало 4,0, причем скорость его изменения была 0,2 ед/мин. Затем добавляли 0,7 г смеси дрожжевой суспензии из ферментера и концентрированной дрожжевой биомассы, содержащей !

4 ACB подвергнутой предварительно щелочной обработке ° Щелочную обработку проводили так же, как в примере 1, но при температуре 75 С рН 1.1,5 в течение 60 мин. Соотношение дрожжигидролизат в смеси составило 6:1.

Бактериальную суспензию перемешивали и сепарировали так же как в примере 2. При этом степень концентрирования биомассы составила около 11,0 . при полноте выделения клеток 97,1 .

Таким образом, описанный способ обеспечивает увеличение степени концентрирования биомассы до 9-11, т.е. содержания АСВ в сгущенной биомассе

18-20 при этом степень выделения составляет 97-99 . Получение продукта, содержащего 18-20Х АСВ, позволяет исключить стадию вакуум-выпарки из технологического процесса и направить биомассу после стадии выделения непосредственно на сушку.