Способ получения производных глюкозамина

 

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДДЫ С ГЛ10КОЗАМИНА общей формулы СНзОН i-о (О V-OH Ho)|-f / ira-co-Ei Бг-сн С о -IJH- CJi- CO-liH- Си- (СНз 12 5 (В) (О)(L) где R, - Cy-Cj-алкил или фенил; RZ - водород или С -С -алкил; R - водород, С -Сд-алкил или оксиметил; R. карбоксил , метоксикарбонил , карбамоил, N-(C -C2-алкил )-карбамоил, К-бензилили N-карбамоилметилкарбамоил; R- карбоксил , метоксикарбонил , карбамоил или Н-метилкарбамоил , при условии, что алкил R содержит более 1 атома углерода, если Rj метил или водород, а R и Rg карб оксил, отличающийся тем, что соединение общей формулы 0-1 /О i СО G у «(I-Rl Бг-ш в, СО-Ш1-СЫ-СО-1 Н-СН-(СН2) (D) (Ь) (D) где имеют указанные значения; 05 R - С -С -алкилиден или О 00 СJ-C,-циклоалкнлиден, обрабатывают кислым ионообменником или трифторуксусной кислотой в течение 10-25 ч при комнатной температуре в воде, тетрагидрофуране и/или хлористом метилене.

COOS СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСЧМЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

0 ОН

Н0

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 2518658/23-04 (62) 2428152/23-04 (22) 08.09.77 (23) 08.12.76 (31). 16042/75 (32) 10.12.75 (33) Швейцария (46) 07.12.83. Бюл. Р 45 (72) Герхард Башанг, Альберт Хартманн (ФРГ ), Ярослав Станек (ЧССР ) и Алекс Зеле (Швейцария) (71) Циба-Гейги Al (Швейцария) (53) 547.455.07(088,8) <56) 1. Thieme Taschenlehrl>uch. der

organischen Chemi e ° В. Speiiaelle

)Gebiete St,utt,gart май 1975, с. 134. (54)(57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫ (ГЛИКОЗА"ПИНА общей формулы (,a o er.

-С0-Я

М2-СН М М4

1 I 1

СО МН CK СО МН СН (СЩУ 5 (9) (1 ) () где К, - С -C>-àJ-.êèë или фенил;

Rg водород или С< -С -BJIkHJI

„„SU„„S A (51)С 07 Н 15 00 А 61 К 31 70

R — водород, С -С -алкил или оксиметил;

R. - карбоксил, метоксикарбонил, карбамоил, N-(С -С—

1 3

-алкил)-карбамоил, N-бензил- или N-карбамоилметилкарбамоил;

R — карбоксил, метоксикарбо5 нил, карбамоил или N-метилкарбамоил, при условии, что алкил R содержит более 1 атома углерода, если R метил или водород, а R4 и R — карб2 оксил, отличающийся тем, что соединение общей формулы

Н

-e-в

М,-СН В, Bg

I I со»r-се-со- н-сн-(се,),-в, (>) Р) (D) R„-R> имеют укаэанные значения;

Н6 — С„-С4-алкилиден или

С5-С 6"циклоалкилиден, обрабатывают кислым ионообменником или трифторуксусной кислотой в течение 10-25 ч при комнатной температуре в воде, тетрагидрофуране и/или хлористом метилене.

1060118

Изобретение относится к способам получения новых производных глюкоэампна,обладающих ценными фармакологическими свойствами, в част- ности сильно выраженным повышающим иммунитет действием.

Известен способ получения соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм, путем синтеза последних, основанного на известной реакции расщепления глюкофуранозного цикла под воздействием кислых реагентов (1 ).

Цель изобретения — получение но вых производных глюкозамина.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения

"производных глюкозамина общей фор"мулы сн он оН

Л

"со Bi

В2 CH Яъ М4 ! со-мн-er-со-мн-ск-фн,);я, .Ф) P.) (и) где !! — С -С -алкил или фенил; .

1 3.

R — водород или С„-С -алкил

R - водород, С -С -алкил или

2 оксиметил;

R - карбоксил, метоксикарбонил, карбамоил, N-(С„-С -алкил)-карбамоил, N-бензилили N-карбамоилметилкарбамоил, R — карбоксил, метоксикарбоннл, 5 карбамоил или N-метилкарбамоил, при условии, что алкил R содержит более 1 атома углерода, если метил или водород, à R4 и R< — карбоксил, соединение общей формулы

В

Н о 0

=C-2!

В2 CH Зъ З4

СО ++ Ê-ÑÎ-ÇÍ-ÑÍ- (СН2) 2-К Ф) (>) (Р)

R -R имеют указанные значения, где

R — С -С -алкилиден или С -С—

-циклоалкилиден, 1 об абатывают кислым ионообменником или трифторуксусной кислотой в течение 10-25 ч при комнатной температуре в воде, тетрагидрофуране и/или хлористом метилене.

Целевой продукт выделяют известными приемами.

13 качестве ионообменника применяют такие, которые содержат, группы сульфоновой кислоты, например

AmberIite IR-120 (стироловая смола с сильно кислыми сульфогруппами) или Dovex 50 (полистиролсульфоновые кислоты). Применяемые при способе исходные вещества можно получать, например, введением ацетамидопептидостатка

R2 в соответствующий оксаэолин со свободной оксигруппой в цоложении 3 сахарного остатка в одной или нескольких ступенях.

Соединения изобретения обладают ценными фармакологическими свойствами, в частности явно выраженным по15 вышающим иммунитет действием.

1. Усиление клеточного иммунитета в живом организме: повышение сверхчувствительности типа поздней реакции против овальбумина у морс20 ких свинок.

Морских свинок (по Pitbright) в первый день начала опытов иммунизируют при помощи 10 мг овальбумина в полном вспомогательном аген 5 те Фрейнда (Freund) путем впрыскивания каждому животному по 0,1 мгг смеси, состоящей из антигена и вспомогательного агента, в обе задние лапы. 4 недели спустя вызывают

0 реакцию кожи путем подкожного впрыскивания 100 мкг овальбумина в 0,1 мл буферного физиологического раствора и на основании вычисленного через 24 ч по эритремным пятнам и увеличению накожной припухЗ5 лости реакционного объема определяют количественно. !!аблюдаемое через

24 ч (реакция позднего типа) специфическое относительно антигена увеличение реакционного объегла яв40 ляется мерой распространения клеточного иммунитета. Овальбумин слишком слабый иммуноген для применения его как такового или в водномасляной эмульсии с неполным вспо45 могательным агентом (10 ч. раствора овальбумина в 0,9% NaCI, смешанные с 8, 5 ч. байола Т и 1, 5 ч. аралцеля 4 ) для индуцирования реакции позднего типа, Для эффективной имму 0 низации его нужйо добавлять в коглплектном вспомогательном агенте к микобактериям (5 мг умерщвленных и лиофилиэированных М butyricum на

10 мл байола F/àðàëöåëÿ А). Для доказательства повышающего иммунитет действия испытуемых веществ их можно примешивать к антигенно-масляной сглеси вместо микобактерий в дозах 10-100 мкг.

Глюкоэаминовые пептиды способны

60подражать действию микобактерий и количественно их превосходить.

Значение I"-D о „О (мкг/животное) в указанном примере составляеъ по 10, например, в следующих соеди65нениях: ° 2-бенэоиламино-3-0-(Э -11060118

-fL -1(Э -1-карбамоил-3-карбоксипро пил)-1-карбамоилэтил1-карбамоилэтил «-2-дезокси-D -глюкоза, 2-бенэоиламино-3-0- Ь -1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-1-карбамоил-этил)-карбамоилметилj-2-дезокси-D-глюкоза и 2-ацетамидо-3-0-(L †1†(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)—

-карбамоилэтил )-карбамоилметил— 2-дез окси- D- глюкоз а.

Значительного усиления поздней 10 реакционной способностн против овальбумина можно также добиться тем, что указанное соединение не включают в антигенно-масляную смесь, а вводят подкожно в дозах 10-100 мкг 15 каждому животному в течение нескольких дней после иммунизации (например, в 1, 2, 3, 4, 5 и б дн.) в растворе поваренной соли.

Это показывает, что указанные соединения значительно повышают клеточный иммунитет как в смеси с антигеном (вспомогательный эффект в узком смысле), так и при их применении независимо от времени и места впрыскивания антигена (системное повышение иммунитета);

2. Усиление гуморального иммунитета в живом организме: повышение выработки антител против альбумина сыворотки крови крупного рогатого скота (BCA) у мыши.

Мышей типа NMRI иммуниэируют путем впрыскивания им внутрибрюшинно 10 мкг свободного от осадка BCA в первый день опыта. Через 9, 15 и 29 дн. берут пробу сыворотки и исследуют ее для установления содержания анти-БСА-антител путем пассивной гемаглютинации. В применяемых дозах раствориьый БСА субим- 40 мунногенный для животных-реципиентов, т.е. он не может вызывать возникновение антител или вызывает возникновение их в незнасительном количестве. Дополнительная обработ- 45 ка мышей определенным, повышающим иммунитет, веществом перед или после введения антигена приводит к повышению титров антитела в сыворотке. Эффект обработки выражается сум- 5О мой разностей титров Iog, полученной в течение трех дней кровотечения.

Соединения изобретения имеют свойство при внутрибрюшинном или подкожном применении 100-300 мг/кг на животное в течение пяти дней после иммунизации BCA значительно повышать вырабатывание антител против

BCA.

Стимулирующее иммунизацию дейст- 6О вие названных соединений в противоположность другим бактериальным иммунолептикам (например, LPS из

Е. соII) независимо от антигенов: инъекции новых соединений повышают 65 анти-BCA-титр при применении их только на иммунизированных BCA ьншах. Подкожное введение указанных соединений так же эффективно, как и внутрибрюшинное, т.е. наблюдаемое действие усиления иммунности системное и не зависит от того, как будет введено стимулирующее средство— таким же путем, как и антиген, или в смеси с антигеном, как. при применении известных вспомогательных агентов.

Таким образом, указанные соединения могут специфически повышать ,гуморальный иммунитет, они улучшают иммунологическую реакцию на раздражение, их усиливающее иммунное действие основывается на системной активизации иммунного аппарата.

3. Усиление гуморального иммунитета в пробирке: эффект замены

Т-клеток при реакции антител клеток мышиной селезенки на эритроциты овцы (CE}.

Для индукции реакции антител во многих случаях необходимы лимфоциты (Т-клетки), происходящие из тимуса. Эти клетки находятся во взаимодействии с предшественниками образующих антитела лимфоцитами (8 -клетки) и помогают им реагировать на стимулирование так называемыми Т-зависимыми антигенами с пролиферацией, диференциацией и синтезом антител. Суспензии клеток селезенки мышей с врожденной атимией (типа nu/ïu) не содержат функциональных Т-клеток и не могут, например, в пробирке в присутствии-СЕ образовывать анти-СЕ-антитела. Указанные соединения могут функционально заменить Т-клетки и сделать воз можным ответ антител против СЕ.

Добавка этих веществ к описанным культурам клеток селезенки в присутствии СЕ приводит в течение

4 дн. к значительному повышению количества клеток, образующих антитела. Из результатов опытов следует, что указанные соединения повышают образование гуморальных антител в пробирке и компенсируют дефект Т-клеточной системы.

4. Селективная митогенность для В-клеток: вызывающее пролиферацию действие в В-лимфоцитной культуре.

В течение трех дней инкубируют суспенэию с большим содержанием

В-лимфоцитов (клетки лимфатических узлов мышей с врожденной атимией типа nu/nu), а также почти чистых незрелых и зрелых T-лимфоцитов (клетки тимуса или устойчивые к кортизону, т.е. через 48 ч после впрыскивания кортизона, персистирующие клетки тимуса Мышей типа.

BaIb/с) в присутствии испытуемых

1060118 веществ. Мерой пролиферационной активности служит включение Н -тимидина в лимфоциты в течение последних 18 ч культурального периода.

Соединения по изобретению митогенны для В-лимфоцитов (т.е. для предшественников образующих антитела клеток), но не для Т-лимФоцитов. Они могут возбуждать пролиферацию лимфоцитов, которые участвуют в гуморальной иммунной реакции, 5. Совместимость.

Несмотря на то, что указанные соединения оказывают усиливающее действие на морских свинок, например, уже после единичной дозы в 0,05 мг/кг подкожно, на мышей после пятикратного введения по

10 Mr/

Соединение изобретения имеют свойство, с одной стороны, в смеси с антигеном повышать его иммуногенность, с другой стороны, при системном применении повышать иммунологическую реакционную способность подлежащего лечению организма. При этом указанные ве щества в состоянии вызывать клеточный и гуморальный иммунитет и активизировать ответственные за образование антител лимфоциты.

Новые соединения могут таким образом быть использованы в качестве вспомогательных агентов в смеси с вакцинами для того, чтобы улучшить действие прививки и про- . тивоинфекционную защиту на основе гуморальных антител и/или клеточного иммунитета против бактерий, вирусов и паразитов, Кроме того, предлагаемые соединения в смеси с самыми различными антигенами пригодны в качестве вспомогательных агентов.при экспериментальном и промышленном получе нии антисывороток для терапии и диагностики и при индуцировании иммунологически активированных популяций лимфоцитов для переноса клеток.

Соединения можно также без одно временного добавления антигена использовать для содействия уже начавшейся, однако еще незаметной, иммунной реакции у живого организма. Следовательно, соединения особенно пригодны для стимулирования защиты организма, например, при хронических .или острых инфекциях или при селективных (специфических относительно антигенов) иммунологических дефектов, которые наступают в старости или в течение тяжелых первичных заболеваний, и в особенности после лечения ионирующими лучами или подавляющими иммунитет гормонами. Таким образом, указанные вещества можно применять также, предпочтительно в комбинации с антиинфекционными антибиотиками, химико-терапевтическими средЮ ствами и другими методами лечения, для противодействия иммунологическим повреждениям.

Пример 1. Перемешивают

2 г 2-фенил 4,5- 13-0-(L 1-(D-115 -карбамоил-3-карбоксипропил)-1-карбамоилэтил )-карбамоил)- 5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано)-дельта-2-оксазолин в воде с 10 мл- Dovex-50-,Н+ при комнатной температур ре в течение 15 ч. После фильтрования и сублимационной сушки получают бесцветный порошок с точкой разложения 140 С. Полученная 2-бено зоиламино-3-0- ID-1- tL-1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил ) -1-карбамоилэтил)-карбамоилэтил )-2-дезокси— Ы, p.-D-глюкоза содержит соответственно условиям высушивания разные количества кристаллизационной воды.

Выход 51Ъ, 0,86 r.

Получение исходного сырья.

3, 77 г 2-фенил-4,5- 3-0-(D 1-карбоксиэтил ) -5, 6-0-из опропилиден-D-глюкофурано j- g -оксазолил и

60 мл ацетонитрила и 15 мл диметилформамида перемешивают с 1,4 мл триэтиламина и 2,55 r N-этил- 5-фенил изоксазолий-3 -сульфоната в тео чение 1,5 ч . при 0 С, причем почти все превращается в раствор. Затем

40 прибавляют 3,44 r гидрохлорида сложного 1-амид- у-бензилового эфира

L-аланил-D-глутаминовой кислоты и еще 1,4 мл триэтиламина и продолжают перемешивать в течение 24 ч

45 при комнатной температуре. Выпаривают в масляном вакууме до сиропа и хроматографируют на силикагеле смесью хлороформа и ацетона (8:2).

Получают 6,5 г (97%) бесцветного

gp густого сиропа.

2-фенил 4,5- (3-D-0-(1-L-(D-1-карбамоил-3-бензилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил)- 1-карбамоил этил-5 б-изопропилиден-D-глюкофура-

2, 55 но -d -оксазолина, который при

„ растворении с эфиром кристаллизуется.Т.пл.96-99 С,, (d.)> = +13 (в хлороформе) °

Кристаллический 2-фенил-4,й- 1360 -D-0-(1-L-(D-1-карбамоил-3-бензилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил)-1-карбамоилэтил-5,6-изопропилиден-D-глюкофурано)-д -оксазолин гидри2» руют 5%-ным палладием на угле в диоксане при комнатной температуре

1060118 и нормальном давлении и после выпаривания в вакууме получают 5,4 r (94Ъ) 2-фенил-4,5-(З-D-О-(1-1 †(D— 1-карбамоил-3-карбоксипропил)— карбамоилэтилj-1-карбамоилэтил-5 6-изопропилиден-D-глюкофурано)-д -оксазолин в виде сиропа.

Вычислено: С 51,40, Н 6,26, N 9,99

С24 Н 34N+01s 0,35 Н20 (560,86)

Найдейо: С 51 13, Н 6,38, N 9,89.

Пример 2 ° Исходный материал: 100 г 2-фенил-4,5-(5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано) — Ь2 -оксазолина растворяют в отсутствии влажности и двуокиси углерода в

1 л ацетонитрила и прибавляют при интенсивном перемешивании по порциям 15,2 r 55Ъ-ной дисперсии NaH — минерального маслаи перемешивают еще в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем прибавляют по каплям при 0 С 42 мл сложного этилового эфира хлоруксусной кислоты и через 1,5 ч еще 42 мл. Через.

1,5 ч прибавляют еще 11,4 r NaH-дисперсии перемешивают полчаса и приI о бавляют по каплям при 0 С еще 42 мл хлоруксусного эфира. Затем через

2 ч подогревают до комнатной температуры и выпаривают в вакууме, а затем в масляном вакууме до состояния сиропа, который растворяют эфиром, экстрагируют три раза встряхиванием с водой, эфирную фазу высушивают сульфатом натрия и после выпаривания получают 155 r коричневого масла. Зто масло растворяют в 150 мл метанола и затем прибавляют раствор из 30 r гидроокиси калия в 150 мл воды, экстрагируют два раза эфиром и промывают эфирную фазу один раз водой. Водные фазы в вакууме освобождают от эфира и доводят до рН рН-метре посредством 1 н. соляной кислоты.

Выпавший кристаллический 2-фенил-4,5- 3-0-(карбоксиметил )-5 б-0-изопропилиден- D-глюкофурано )- Ь -оксазолин отсасывают, промывают водой и высушивают. Получают 107 г (93Ъ от теоретического) с т. пл. 186-.

188 C,(aL) = — 9 (СНСТ, с = 0,9) . и (с ) о = — 23 (CHCI c = 3).

3,63 r 2-фенил-4,5-(3-0-карбоксил метил-5,6-0-изопропилиден-Э-глюкофурано) — Ь2-оксазолина, 3,43 г гид охлорида сложного 1-амид- >г-бензилового эфира 1.-аланил-D-глутаминовой кислоты, 1,21 г N-оксисукцини- мида, 2,16 г дициклогексилкарбодиими да и 1,45 мл триэтиламина растворяют в 40 мл диметилформамида и перемешивают в течение 24 ч при комнат-, ной температуре. Выпаривают в масляном вакууме, растворяют дихлорэтаном и водой, отсасывают от выпавшей дициклогексилмочевины и экстрагируют путем встряхивания органическую фазу два раза водой и водную фазу два раза дихлорэтаном. После высуши5 вания и выпаривания органической фазы получают густой сироп, который хроматографируют на силикагеле в смеси с хлороформом — этанолом (9:1). Полученный 2-фенил-4,5- Р)0 -0-(1-L-(D-карбамоил-3-бензилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил)-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано j-.Ь -оксазолин, 2 который при растирании с эфиром кристаллизуется, плавится при 167168 С, (с ) = -5 (хлороформ) .

4,5 г 2-фенил- 4,5- (3-0- 1- L- (1-D- к ар 6 амоил- 3- бе н з ил о к си к арбо нилпропил)-карбамоилэтил )-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден D-глюкофурано — 2 -оксазолина гидрируют в диоксане 5Ъ-ным палладием на угле, отфильтровывают от катализатора и затем еще экстрагируют этанолом.

Соединенные фильтраты выпаривают и ос-. аток перекристаллизовывают из изопропилового спирта. Полученный

2-фенил-4,5- (3-0- (1-L †(-1-D-карбамоил-3-карбоксипропил) †карбамоилэтил 1-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано)- Ь"-оксазолин плавится при 200-207 С.

Получение целевого продукта.

2 85 г полученного 2-фенил-4, 5- 13-035 — (1-L-(-1-D-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил J-карбамоилметил-5,6-0-изопрпилиден-D-глюкофурано )— Ь2 -оксазолина перемешивают в смеси из 30 мл воды и 15 мл тетрагид40 рофурана с 5 мл Do ex-50-Н 15 ч

+ при комнатной температуре, фильтруют через твердый фильтр и выпаривают в вакууме досуха. При растирании с эфиром получают бесцветный

45 порошок 2-бензоил-амино-3-0- (fL-1— (D-1-карбамоил-3-,êàðáoêñHïðoïèë)-1-карбамоилэтил )-карбамоилметил ) -2-деокси- cL,р-D-глюкозы с т. пл.

175-177 С (в виде гидрата).

Выход 55Ъ, 1,51 г.

Вычислено: С 51,11, H 5,97, N 10,37, С23 Н 32Н +011 (540,53)

Найдено: С 50,95, Н 6,04, N 10,23

Пример 3. 4,4 r 2-фенил-4,5- 3-0- (1-Ь-(1-D-3-дикарбоксипропил)-. карбамоилэтил 1-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано - Ь -оксазолина перемешивают в те2

60 чение 20 ч при 40 С с 11 мл ионообменника Dovex-50 х 4 в смеси из .45 мл тетрагидрофурана. и 20 мл воды. После фильтрования и очистки углем,(Darco G-60) раствор подвергают сублимационной сушке, при этом

1060118

10 получают бесцветную аморфную 2-бензамидо-2-дезокси-3-0-(1-L-(1-D-3-дикарбоксипропил)-карбамоилэтилf-карбамоилметил-D-глюкопиранозу с оптическим вращением (cL)2 = +25 (Н О, с = 0,997). Выход 371, 1,56 г.

Получение исходного сырья. 6,33 r !

2-фенил-4, 5- (3.-0-карбоксиметил-5, 6-0-из опропилиден-D- глюкофурано )— д .-оксазолина, 5,75 r 2-этокси2 — N-карбэтокси-1, 2-дигидрохинолина (EEDQ) и 9,3 мл триэтиламина прибавляют к раствору трифторацетата сложного дибензилового эфира Ь-аланил-D-глутаминовой кислоты (полученного из 8,3 г сложного дибензолового эфира N-Трет -бутилоксикарбонил-L-аланил-D-глутаминовОЙ кислоты с 5,1 мл трифторуксусной кислоты и 2,6 мл дихлорэтана посредством четырехчасового гидролиза при

40 С в 70 мл дихлорэтана. Смесь выдерживают 15 ч при 40 С, разбав- ляют хлороформбм, экстрагируют посредством встряхивания два раза водой и водные фазы один раз хлороформом. После высушивания сульфа, том натрия и выпаривания хлороформный раствор содержит 19,9 г масла, которое очищают на 400 r силикагеля, Мерк посредством элюирования эфиром, затем хлороформом — ацетоном 17:3. При этом получают чистый 2-фенил-4,5- 13-0- j1-L-(.1-D-З-дибензилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил -карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано - д2 -оксазолин с т. кип. 113-116 С и (g)20=

-47 о (СНСТЗ, с = 1,54).

7 г 2-фенил-4,5-(3-0-(1-?.-ф-D-3-дибензилоксикарбонилпропил)-кабамоилэтил )-карбамоилметил-5,6-0-изопронилиден-D-глюкофураноj— д2 -оксазолина гидрируют 1,8 г 5%

Рй/С в смеси из 80 мл тетрагидрофурана и 20 мл воды до прекращения реакции, отсасывают от катализатора, выпаривают в вакууме и растирают остаток с эфиром. При этом получают 4,9 г 2-фенил-4,5- (3-0— (1-L-(1-D-3-дикарбоксипропил)—

- карбамоилэтил1-aарбамоилметил-5,6-0-изонропилиден-D-глюкофурано - д -оксазолина в виде бесцветного порошка.

Вычислено. С 48,13, Н 6,08, N 7,32.

С23Н31NgO)g 1,8 Н20 (573-,9)

Найдейо: С 48,59,*- Н 6,07;

N 7,52, i

Пример 4. Гидролизуют

:2 г 2-фенил-4,5- (3-0- (1-L †(1-Г-карбамоил-3-трет -бутоксикарбонилпропил ) — карбамоил-2-оксиэтил )-карбамоилметил-5 6-0-изопропилиден-D-глюкофурано - дг -оксазолина в течение 20 ч при комнатной .температуре со смесью из 15 мл л, ристого метилена и 5 мл трифторуксусной кислоты. Упаривают в масляном вакууме, остаток затирают э эфиром и получают 2-бензамидо-2-дезокси-3-0- (1-L-(1-D-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоил-2-оксиэтил|-карбамоилметил-D-глюкопиранозу в виде бежевого порошка, т. пл. 100-115 С (о )y = +23 (Н О, 10 с = 0,886), которая кристаллизуется с помощью 2 моль воды и 1 моль трифторуксусной кислоты.

0,28; CHCC : CH OH = 1:1 (тонкослойный сйликагель, Мерк).

15. Выход 60%, 1,16 r.

Прлучение исходного сырья. Аналогично описанному в примере 3 конденсируют 5,7 r 2-фенил-4,5-(3-0-. — карбоксиметил-5,6-0-изопропилиден20 -D-глюкофурано)- д2 -оксазолина с

4,9 r гидрохлорида cx . амид- у- трет—

-бутилового эфира L-серил-D-глютаминовой кислоты при прибавлении

2,3 мл триэтиламина и 5,2 r 2-эток25 си-N-карбэтокси-1,2-дигидрохинолина в 45 мл дихлорэтана. После 18 ч о при 40 С образуется кристаллизат.

Прибавляют дополнительно 50 мл дихлорэтана, охлаждают в ледяной ба30 зе фильтруют и кристаллы промывают холодным диэлорэтаном. Аналитически чистые бесцветные кристаллы 2-фенил-4,5- 13-0-(1-L-(1-D-карбамоил-3-трет -бутилоксикарбонилпропил)—

-карбамоил-2-оксиэтил )-карбамоил-метил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано)- д2-оксазолина имеют т. пл. 187-188 С (с )20 = +7О (СН ОН, с = 1,125).

Вычислено: С 42,60; Н 5,27;

40 N 7,99, С Н й40т 2 06 Н2О 0,957 CFyCOOH

Йайдено: С 42,87; Н 5,32;

N 8,20

II ример 5. 6,4 г 2-фенил45 -4 5- (3-0- (1-L-(1-D- h -пропилкарбамоил-3-Трет-бутоксикарбонилпропил)—

-карбамоилэтил -карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано)- д -оксазолина гидрируют 1,8 r г

50 5:"5-ного Pd/С в 80 мл тетрагидрофурана и 20 мл воды до прекращения процесса, отфильтровывают от катализатора и концентрируют. HI = 0,58.

СНСРЗ . CH30H = 3:1 (тонкослойный

55 силикагель, Мерк). Выход 5,8 r.

Затем полученную кислоту промывают с 10 мл ионообменника Dovex-50 х 4, 50 мл тетрагидрофурана и

25 мл воды 15 ч при комнатной тем60 пературе и 12 ч при 40 С. После фильтрования, очистки углем (Darco-G-60), вторичного фильтрования и сублимационной сушки получают бесцветную, аморфную 2-бензамидо— 2-дев окси- 3-0- (1- L — (1 — D- N- -проЪ

1060118

12 пилкарбамоил-3-карбоксипропил )—

-карбамоилэтил)-карбамоилметил-D-глюкопиранозу, т.пл. 65-140 С и (с } = +28 (вода, c = 1,03), 0,48 СНСС : CH OH = 1:1 (тонкослойный силикагель, Мерк). Выход 65% = 4,15 г.

Исходное соединение. Аналогично описанному в примере 3 конденсируют 5,25 г 2-фенил-4,5-(3-0-карбоксиметил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано)- й2 -оксазолина и трифторуксуснокислотную соль с — n -пропиламид-г -бензилового эфира L-аланил-D-глютаминовой кислоты, -полученного из 6,2 г а(. — n -пропил-амид— - -бензилового эфира Б-трет -бутилоксикарбонил-L-аланил-D-глютаминовой кислоты и 4,2 мл трифторуксусной кислоты в 2,5 мл дихлорэтана

6 ч при 40 С в 60 мл дихлорэтана с прибавлением 7,75 мп триэтиламина и 4,8 г 2-этокси-N-карбэтокси-1,2-дигидрохинолина. После 20 ч при

40 С прибавляют 50 мп хлороформа, встряхивают два раза с водой и воду два раза с хлороформом. После высушивания и концентрирования хлороформной фазы получают 15 г -масла, которое очищают 200 r силикагеля по Мерку путем вылывания простым эфиром, затем хлороформом— ацетоном 7:3. Получают 6,4 г бесцветного аморфного 2-фенил-4,5— 13-0-(1 †-(1-D-лропил-карбамоил-3-трет -бутоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил}-карбамоилметил-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано}- й2-оксазолина, Rf = 0,35 СНС83: ацетон = 7:3 (тонкослойный силикагель, Мерк).

Вычислено: С 51,08, Н 6,79 °

N 9,16, H O 4,72

С2Ь Н 6М4011 1, б Н20 (11,48)

Найдейо: С 51,15, H 7,00, и 9,49,) н20 4,77.

Пример б. 8,3 r 2-фенил-4,5- 13-0- (1-метил-1-(1-D-карбамоил-3-трет -бутилоксикарбонилпропил)-карбамоилэтил )-5,6-0-изопропилиден-D-глюкофурано }- д -оксазолина

2 оставляют стоять 15 ч при комнатной температуре в смеси иэ 20 мп трифторуксусной кислоты, 60 мл хлористого метилена и 2 мл воды. Затем упаривают в вакууме и остаток растворяют простым эфиром. Получен-. ный розовый порошок растворяют в

200 мл воды и очищают 0,5 угля (Darco-G-60). После фильтрования и упаривания получают бесцветную аморфную 2-бензамидо-2-дезокси-3-0-(1-метил-1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилзтилj-карбамоилметил-D-глюкопиранозу, т. пл.

110-120 C,(оЦ = +31 (Н О, с

0,88), Pf = 0,52 ацетой:этанол т:1 (тонкослойный силикагель, Мерк), которая кристаллизуется с 0,6 моль трифторуксусной кислоты и 1,7 моль воды. Выход 52Ъ, 4,15 г.

Получение исходного сырья. 7,3 г

2-фенил-4,5-(3-0-карбоксиметил-5,6— 0-и3опропилиден-D-глюкофурано)— — д 2-оксазолина, 6,5 гидрохлорида

d -амид- у- трет -бутилового эфира с -амино-иэобутироил-D-глюталр новой кислоты и 2,9 r сложного изобутилового эфира хлормуравьиной кислоты растворяют в 25 мл диметилформамида и 50 мл дихлорэтана. К этому прибавляют по каплям при температуре от«

15 -15 до -10ОС в течение 30 мин раствор 6,1 мп триэтиламина в 20 мп дихлорэтана. Затем нагревают до комнатной температуры и перемешивают еще 15 ч при комнатной температуре.

Прибавляют 50 мл дихлорэтана, встряхивают с водой, два раза с 0,5 н.

NaOH и три раза с водой, водные фазы — два раза дихлорэтаном, органическую фазу высушивают и после упаривания получают 16,6 г масла.

его очищают на силикагеле/ Мерк),. путем вымывания СНС9 : С Н OH = 19:1.

Получают 9,7 г бесцветного аморфного 2-фенил-4,5- }3-0- f1-метил-130 — (1-D-карбамоил-3- трет -бутилоксикарбонилпропил ) -карбамоилэтил j-5, 6-0-изопропилиден-D-глюкофурàíoj— — д2 -оксазолина. Оптическое вращение (с(,} > = +б (СНС? З, с = 1,027), т. пл. 75-89 С, .

Rf=0,35, СНС1:С Н ОН=9:1 (тон-, кослойный силикагель, Мерк).

Вычислено: С 46,31, Н 5,86;

N 8 57; Н20 4,69

С2 Н 34N4O11 . 0,6 CF3COOH 1,7 Н20

40 (653,59)

Найдено: С 46,59; Н 6,00 N 8,74

Н20 4,53.

Аналогичным образом получают следующие соединения.

45 4,1 г (85,7Ъ) 3-0- ((Ь-1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил) †карбамоил-. этил }-карбамоилметил)-2-ацетамидо-2-деокси-В-глюкоза, (g)20 = - 10 + 1О (вода, с = 0,930).

Вычислено: С 43,08; Н 6,59;

N 11,16; Н20 4,67

С18 НЗо N40 „1,30 Н20 (501 87)

Найдено: С 42,85 Н 6,61;

N 11,26, Н О 4,67.

3,85 г - (75,7%:) 2-бензамидо-2-дезокси-3-0- (L-1- (D-1, 3- трет -N-метилкарбамоилпропил ) -карбамоилэтил)-карбамОилметил-D-глюкопираноза, пл. 125 132 C,(k}2D +24 (H20g с = 0,93).

Вычислено: С 50,55 Н 6,89, N 11,91, Н О 5,51

С2 Н>>N50so 1i8 НРО (600)

Найдено: С 50,18, Н 6,81;

N 11,65; Н20 5,73

65 2,43 г (50,4%) 2-бензамидо-2-деок1060118

10

Вычислено: С 46,34) Н 6,55;

N 11„38 60

С ) Н З ««40 1 (492,48 )

Найдейо: С 46,07, Н 6,44;

N 10«96.

4,17 г (87Ъ ) сложного диметилового эфира 2-ацетамидо-3-0- )()к-) — (р- g5 си-3-0-(L-1-(D-1,3-rper -метоксикарбонилпропил)-карбамоилметил)-карбамоилметил-D-глюкопираноза в виде гидрата, т. пл, 80-90 C,,(o(,)го = +25 (СН ОН, с = 1,017) °

4,16 r (81Ъ) 2-бензамидо-2-дезокси-3-О-jL-1-(D-1-N-карбамоилметил-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил)-карбамоилметил-D-глюкопираноза, т. пл. 163-170 С.

Вычислено: С 49,02; Н 6,34;

N 10,99, Н20 3,99

С2 ««,«« О 1,41 Н20 (637,01)

Найдено: С 49,85, Й 6,48) и 10, 64; Н20 3,99

4,16 г (93Ъ) 2-бензамидо-2-де- 15 зокси-3-0-(«,-1-(D-1-карбамоил-3— карбоксипропил) †карбамоилпройилД-карбамоилметил-D-глюкопираноза, т. пл. 114-155 С.

Вычислено: С 50,95; Н 6,31 20

N 9,90} «lzo 1,98 . C24««34N4O q 0,62 HZO (565, 71)

Найдено: С 50,69; Н 6,47, N 9,76, Н20 1,98

4,28 г (85Ъ) 2-бензамидо-3-дезокси-3-0-(L-1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоил-2-метилпропил)-1-карбамоилметил-D-глюкопираноза,(g}2a = +32 (с = 0,78, вода), Вычислено: С 49,72, Н 6,70, N 9,28; Н20 5 86

С23-H36N40qq 1,96 Н20 (603,9)

t-«айдейо. "С 49,82, Н 6,67, N 9109>H20 5186 °

3 91 г (82Ъ ) 2-ацетамидо-3-0I

- ((D- 1- к арб амоил- 3- к ар бо кси пропил )—

-карбамоилметил-карбамоилметил)-2-деокси-D-глюкоза,(o() > = +27

zo» о (с = 0,944, вода).

Вычислено: С 43,97; Н 6,08

N 12,06 40

С.- Нг ) О „(464,43)

Найдено: С 43,72) Н 5,88)

N 12,20

3,57 r (81Ъ,) 2-ацетамидо-3-0-I(L-1- (D-1, 3-дикарбамоилпропил )- 45

-карбамоилэтил)-кареамолметил)-2о

-деокси-D-глюкоза, (g ) о = +7 0» 1 (вода, с = 0,514).

Вычислено: С 43,26) Н 6,78 }

И 14,01, Н20 4,46 50

С 8 Н 3„)«g О о 1,24 HzO (499,81 )

Найдейо: С 43,22, Н 6,72, N 14,11, . Н20 4,46.

4,54 r (95Ъ) 2-ацетамидо-3- )((р-1-(D-1-карбамоил — 3-карбоксипропил)— .-карбамоилметил -карбамоилоролил). -2-деокси-1)-глюкоза, (с() = +46+1 го (вода, с = 0,630), -1, 3-дикарбоксипропил ) -карбамоилэтил)-карбамоилметилj-2 деокси- D-глюкоза, («}2 = +А+10(вбда, с = 0,0814).

Вычислено: С 45,66, Н 6,75;

7 99 Н20 3,54

С2о Н33««30)г °,1,03 Н20 (526,05) .

Найдено: С 45,90; Н 6,70;

N 8,00; H O 3,60

4,4 г (92Ъ) 3-0- ((L-1-(D-1-карбамоил-1-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил)-карбамоилметил)-2-деокси-2-пропионамидо-D-глюкоза„ (д(}2 = +8 (вода, с = 1,146).

Вычислено: С 42,90 Н 6,93;

N 10,53 Н20 7,42

О.)„" 2,19 Н20 (531,93)

) .Найдено: С 42,66; Н 7,01, «« 10,54> Н О .7,42

4,29 г (89Ъ ) 3-0- (t L-1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоил- этил $-карбамоилметил )-2-каприноиламидо-2-деокси-р-глюкоза, (о«) zo = +11 (вода, с = 1,052).

Вычислено: С 52, 87; Н 7, 85

N 9,49

Сгь Н46" «Ом (590 67)

Найдено: С 52,60, Н 7,73;

N 9 21е

4,55 r (95,2Ъ) 2-ацетамидо-2-деокси-3-0- ЦЬ-1-(D-1,3-трет-метилкарбкомилпропил)-карбамоилэтил) †карбамоилметил )-Р-глюкоза,(с«)zo = +31 ,(вода, с = 0,41).

Вычислено: С 44,67, Н 7,26;

N 13,02

Сго Н 3 0 а«01о 1, 79 Н 0 (537,77)

Найдено: С 4Ч,38, «Г 7,40, N 13,31, 4,02 r (84Ъ) 2-ацетамидо-3-0- Ц?-1- (D-1-карбамоил-3-карбоксипропил )—

-к арбамоил-2-окси этил )-карбамоилметил j-2-деокси-D-глюкоз а,(сЦ гв= +10 (вода, с = 1,653) .

Вычислено: С 43,72; Н 6,12, N 11,33

С 18 Н 3о 17 4 О «2 (4 9 4 с 4 5 )

Найдейо: С 43,51; Н 6,03, N 11,11

4,41 г (92Ъ) 2-ацетамидо-3-0— ((Ь-1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилбутил }-карбамоилметил)-2-деокси-D-глюкоза, (с(. ) гР = +12 о (вода, с = 7,22).

Найдено: С 45,11, Н 7,03

N 10,29; Н.О 4,38

2Р««3411420 „. 1,29 Н20 (529,75)

Вйчислейо: С 45,35; Н 6,99;

Б 10,58; K О 4,38

4,34 г (69,5Ъ) 3-0- f(L — 1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоилэтил)-карбамоилметилj-2-деокси-2-стеароил-амидо-D-глюкоза, (с )г = +24 (диметилформамид, с — 0,663}, Вычислено: С 58 10; Н 8,89, N 7,97.

106011с.

Составитель Г. Коннова

Редактор A. Огар Техред М,Надь КорректорГ.Огар

Заказ 9870/61 Тираж 387 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открнтий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб, д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

С3ф Hg N4O (702,89), Найдено: С 57,92; Н 8,95;

N. 7,81, -(4, 55 r (95% ) 2-ацетамидо-3-0(Ь-1- (D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоил-2-метилпропил )-карбамоилметил )- 2-деок си- D- глюкоз а, (а() в = +11 (вода, с = 1, 096 ) .

Вычислено: С 45i53; Й 6,98

N 10/62 Н20 3.99

С2 Н 040 ° 1.,17 Н О (527,59)

Найдено: С 45,80; Й 6,81, 10,65, НяО 3,99, 4,41 r (92%) 2-ацетамидо-3-0— (L-1-(D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-карбамоил-3 -метилбутил)- карбамоилметил-2-деокси-D-глюкоза, (с(I О = 16 (вода, с = 1,060), Вычислено: С 46,66 ° Н 7,16 °

И 10,36; Н О 3,71

С,1 НЗь N40q„1,11 HgO (540,53)

Найдено: С 46,45; Й 7.,04, N 10,06, Н О 3,71

4,21 r (88%) 2-ацетамидо-3-0— Ь- 1- (D- к арб амоил- 3- к ар бо к си пропил ) -карбамоилпропил )-карб амоилметил)-2-деокси-D-глюкоза, (а()20 = +11

;вода, с = 1,019) .

Вычислено: С 44,27; Н 6,79, О 4,46

С Нзгиао„„. 1,28 (515,54)

Найдейо: С 44,32; Н 6,73

N 10,78, Н О 4,46.

4,13 r (86%) 2-ацетамидо-3-0(L-1-(О-1-карбамоил-метилкарбамо-1

10 ил-3- карбоксипропил ) — карбамоилэ тил ), — к арб амоилметнл $- 2-деокси- D- глюкоз а, белый порошок,(рГ)2Е = +10 (вода, с = 0,706).

15 Вычислено: С 43 24; Н 6,43 .

-N 12,61, Н О 3,61

С ОН О ° 1,11 Н О (555,50)

Найдено: С 43,10; Н 6,30;Й.12.,90;

Н20 3, 61, 4, 46 г (93% ) 2-триметилацетамидо-2-деэокси-3, 0-. (-1- (D-1-карбамоил-3-карбоксипропил)-1-карбамоилэтил)-KBp6clMoHJIMeTHJ1 )- 8 p p -D-глюкоза, (cL) = -7 (c = 6,6, метанол).