Штамм черных дрожжей @ @ @ -11,используемый для очистки сточных вод от фенолов и лигнина

 

Штакм черных дрожжей Ехоphialar nigrum R-11 (депонирован в Центральном Музее промьюшенных микроорганизмов института ВНИИгенетика , коллекционный номергЦМПМу-309), используемый для очистки сточных вод от фенолов и лигнина.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (1а (11) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCH05IIV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ CCCP

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21 ) 3507167/28-13 (22) 02.11.82 (46) 07.02.84..Бюл. 9 5 (72) В.В.Лавленко, В.N.Õàðëàìîâ, В.И.Чемерилова и С.С.Тимофеева (71) Научно-исследовательский институт биологии при Иркутском государственном университете им..А.A,éäàíîâà (53) 663.13(088.8) (56) 1. Авторское свидетельство СССР

М 657063, кл. С 12 N 15/00, 1977.

2. Авторское свидетельство СССР

N 912684, кл. С 02 F 3/34,. 1981.

ЗИЮ С 12 N 15/00// С 02 F 3/34, С12 8100 (54) ШТАММ ЧЕРНЫХ ДРОЖЖЕЙ ЕХОРНХАЬА

NIGRUM R-11, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ОЧИСТКИ СТОЧНЫХ ВОД OT ФЕНОЛОВ И ЛИГНИНА. (57) Штамм черных дрожжей Exophials nigrum 8-11 (депонирован в

Центральном Музее промышленных мик-. роорганизмов института "ВНИИгенетика", коллекционный номер:ЦМПМ (-309), используемый для очистки сточных вод от фенолов и лигнина.

1071637

55

Изобретение.относится к микробйо-, логической промышленности и может быть использовано для биологической очистки сточных вод от органических соединений, в частности от фенольных и серосодержащих соединений, 5 на предприятиях целлюлозно-бумажной нефтяной, углехимической H других областей промышленности.

Известен штамм Citroobacter гreundii 21 для очистки сточных вод от додецилсульфатов.

Известен штамм Pseudomonas ер 1 с для очистки промышленных сточных вод от алкилсульфатов tll.

Известен также способ очистки 15 сточных вод от фенолов грибами 21.

Недостатками этих штаммов является невысокая активность деструк- . ции по отношению к фенольным. соединениям. 20 целью изобретения является штамм, который cIToco6eH утилизировать фенолы и лигнин.

Поставленная цель достигаетСя тем, что используют штамм черных дрожжей вида Hxophialà nigrum 8-11, который осуществляет биологическую очистку от фенолов и лигнина.

КультуРа "черных дрожжей", идентифицированных как Е,niprum вщ4е- 30 лена из проб байкальской "воды, отобранных в прибрежной зоне Южного

Байкала с использованием мембранных фильтров.

01тамм Б-11 выделен методом клони- З5 . Рования с применением микроманипуля" тора и последующего рассева. Получе» . но около сорока клонов, послуживших материалом для селекции и токсикогенетических испытаний.

Штамм черных дрожжей Ехophialа 40

nigrum R-11 хранится .в коллекции лаборатории генетики НИИ биологии

Иркутского госуниверситета и в кол-::. Ф лекции ВНИИ генетики промышленных микроорганизмом (Москва), где ему 45 присвоен регистрационный номер

ЦМПФ11- 309.После проверки на патогенность для теплокровных животных и человека, а также для злаковых сельскохозяйственных культур 50 штамм Н-11 рекомендован к внедрению в промышленности, как непатогенный. штамм черных дрожжей. Exophiala

nigrum R — 11 обладает следующими признаками.

Морфологические признаки. В жидких средах при 22 С беэ встряхивания штамм образует овально-удлиненйые клетки 5,2> 8,3«1,9-4,7 мкм. Раз- 60 множение верхушечным или боковым почкованием, часто односторонним.

ИУ округлых крупных клеток образуют. ся гифы мицелия. Мицелий 30-суточной. культуры сильно развит, септированный, нерегулярно-разветвленный, в основном истинный, субстратный или воздушный. . Культуральные признаки. При росте в жидкой глюкоэо-пептонной среде или на сусле на 3 сут наблюдается помутнение, на дне осадок, неясная пленка, колько отсутствует или частичное. Через месяц кольцо очень толстое, на поверхности среды обособленные дерновинки мицелия, На дне незначительный осадок дрожжеподобных клеток, мути нет.

На агаризованных средах штрих прямой, профиль выпуклый, край ровный, цвет черный блестящий, консистенция слабослизистая. Через месяц штрих черный или буровато-серый, неравномерно-опущенный, поверхность складчатая, край ворсинчато-окаймленный.

Гигантская колония .достигает диа-, метра 19-25 мм, выпуклая, опущенная, буровато-серая с ровным краем, с приподнятой центральной частью, окруженной. гладким черным валиком, редкие радиальные складки.

Физиологические признаки. Лэроб, образует черный пигмент, сахара не сбраживает. Хорошо ассимилирует Dглюкозу, D-ксилозу, сахарозу, раство римый крахмал, глицерин, D-молочную кислоту, медленно ассимилирует

Ж-рамнозу, - -арабинозу,.малйтозу, D- аннит, D-сорбит, Слабо ассимилирует D-галактозу, рафинозу, этанол, дульцит, i-инозит, не ассимилирует, лактозу, лимонную кислоту, гексадекан ° Иэ источников азота .ассимилирует нитриты, в среде без витаминов рост медленный, на среде с 50%-ной глюкозой не растет, выдерживает концентрацию яас1, равную 7%.

Оптимальная температура роста

20-25 С, при 30-37еС не растет. Чувствителен к 100 мкм/мл циклогексимида, обладает уреазной активностью, кислотообразование на меловом arape отсутствует, желатин не разжижает, жир не гидролизует, эфир и крахмалоподобные соединения не образует.

Штамм 8-11 способен утилизировать феноли.

Пример 1. I. 1òàìì черных дрожжей Ехо P hi а1 a nip rum R-.11 выращивают на сусло-агаре или глюкоэопептонной среде при 25 С, делают смыв, В 100 мл воды, содержащей пиро-, катехин или любой другой фенол: гидрохинон, фенол, гваякол в концентрации 10 м, вводят суспензию 2 r черных дрожжей и через 24 ч определяют остаточное содержание фенолов методом потенциометрического титрования.

Степень очистки от пирокатехина

96,65, от гидрохинона - 86,2%, от фенола - 84,3В, гваякола - 82,3%.

1071637

Штамм R-11 способен усваивать лнгнин в качестве источника углевод ного питания.

Пример 2. Данные приведены в табл. 1.

Штамм В-11 способен расти íà средах, где единственным источником углеводного питания является диоксан-лигнин.

Пример 3. Интенсивность прироста штамма й-11 íà 1%-ном растворе диоксан-лигнина приведена в табл. 2.

Через 20 сут культивирования концентрация клеток в 1 мл питательной диоксанлигниновой,среды увеличива- 15 ется в 9,9 раэ по сравнению с исход. ной. 3а 5 сут штамм R-11 усваивает

30% лигнина, растворенного в нейт ральной среде..

Показана высокая устойчивость ур штамма R-11 к органическим и неорганическим соединениям и их смесям, встречающимся в промстоках сульфатцеллюлозного производства. !

Питатель- Количество ная среда колоний на чашку

Прирост клеток, % уеР

100

Азотная основа+ лигнин (0,5%) 84 . 142,4

Таблица, 2

Продолжительность культивирования, сут, Показатели

6,53 35 1 I

64,5

52,4

53,2

8,0

9,9

8,1

5,4

Коэффициент прироста

Таблица 3

Концентрация, мг/л

СоедИнение (смесь) 93,1+- 9,7

87,0 " 9 7

100. 100

81,4 + 4,0

Смесь метилосернистых соединений (50% ДИСО, 40% ДИДС, 10% ДИС) 1000

91,2+ 2,9

89,9 + Зу8

100

На1 8 юю»«юю юйее

ВНИИПИ Заказ 67/21 Тираж 522 Подписное

Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул.Проектная,4

Концентрация клеток в 1 мл (х 10 ) Смесь монофенолов (80% гваякола, 9,5% о-креэола, 9,5% ванилина, 1% фенола ) Смесь дифенолов (50% гидрохинона, 25% пирокатехина, 25% реэорцина)

Смесь моно-дифенолов (50% смеси монофенолов, 50% смеси дифенолов) Пример 4, В табл. 3 приве-, дена выживаемость штамма R-11 при действии высоких концентраций соеди. нений и смесей, Полученный штамм позволяет очицать стоки сульфатцеллюлоэных предприятий и может быть рекомендован .как компонент микробиоценоза, осушествляэщего биологическую очистку от фенолов и лигнина, не вызывает вторичнЬго загрязнения.

Таблица 1

1 14 16 20