Способ диагностики болезни виллебранда

 

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БОЛЕЗНИ БИЛЛЕБРАНДА путем исследования активности фактора yUJ свертывающей системы крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно цитохимически в тромбоцитах определяют содержание гликогена, активность ферментов лактатдегидрогеназы, глюкозо- -гЬосфатдегидрогеназы , сукцинатдегидрогеназы , о6-глицерофосфатдегидрогеназы и кислой фосфатазы, активность последнего фермента определяют до и через 58-62 мин поате вьщерживания крови при тe fflepaтype от 36,8 до 37, и при снижении одного из определенных показателей в сравнении с нормой диагностируют болезнь Виллебранда.

Р (19) (11) СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ГЮ ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ И3ОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОЬЮ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3427793/28-13 (22) 20.04.82 (46) 30.03.84. Бюл. № 12 (72) А.В.Мазурин, И.Н.Цымбал, Т.Г.Плахута и Л.Н.Якунина (71) 2-й Московский ордена Ленина государственный медицинский институт им. Н.И.Пирогова (53) 612.0? (088.8) (56) Плахута Т.Г., Якунина Л.Н. Клинико-лабораторная характеристика бо-. лезни Виллебранда у детей. — "Bonpotf сы охраны материнства и детства

1978, ¹ 9, с. 55 — 60 (прототип) . д(д1) Л 61 В 10/00; G Ol N 33/48 (54) (57) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БОЛЕЗНИ

ВИЛЛЕБРАНДЛ путем исследования активности фактора УШ свертывающей системы крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, дополнительно цитохимически в тромбоцитах определяют содержание гликогена, активность ферментов лактатдегидрогеназы, глюкозо-Б-фосфатдегидрогеназы, сукцинатдегидрогена, k -глицерофосфатдегидрогеназы и кислой фосфатазы, активность последнего фермента определяют до и через

58 — 62 мин после пыдерживания крови при температуре от 36,8 до 37,2 С и при снижении одного из определенных показателей в сравнении с нормой диагностируют болезнь Виллебранда.

1082400

Изобретение относится к медицине, в частности к лабораторным способам диагностики болезни Виллебранда.

Известен способ диагностики болезни Виллебранда путем исследования 5 активности УШ фактора

Однако исследование уровня УШ фактора позволяет выявить лишь патологию плазменного звена гемостаза, но не определяет функциональную активность тромбоцитов. В связи с этим определение только УШ фактора не позволяет с достоверностью говорить о наличии болезни Виллебранда.

Цель изобретения — повышение точности способа.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу диагностики болезни Виллебранда путем исследования активности фактора УШ сверты- 2Р вающей системы крови дополнительно цитохимически в тромбоцитах определяют содержание гликогена, активность ферментов лактатдегидрогеназы {ЛДГ), глюкоза-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6ФД) 2 сукцинатдегидрогеназы (СДГ), d -глицерофосфатдегидрогеназы 9.-ГФД) и кислой фосфатазы (КФ), активность пос. леднего фермента определяют до и через 58-62 мин после выдерживания 30 крови при температуре от 36,8 до

37,2 С и при снижении одного из оцределяемых показателей в сравнении с нормой диагностируют болезнь

Виллебранда.

H p и м е р 1. Саша N., 13 лет, находился в клинике по поводу межмышечной гематомы и носового кровотечения.

С 1 года на коже отмечались мно- 4р гочисленные экхимозы, посттравматические гематомы. В 1,5 года впервые после травмы возникло носовое кровотечение. В 4 года на основании снижения уровня УШ фактора (1 ) и ди- 4 намических свойств тромбоцитов предварительно установлен диагноз болезни Виллебранда. Кровотечения неоднократно повторялись: носовые, из миндалин, дважды кровоизлияния в суставы.

Раннее развитие без особенностей.

Отец клинически здоров, лабораторнотромбоцитопатия (снижение активности

ЛДГ пластинок, уровень УШ фактора

235 ) . У матери в молодости обильные и длительные месячные, лабораторно — болезнь Виллебранда. У брата геморрагических проявлений нет, лабораторно — тромбоцитопатия .

Поступление в клинику связано с появлением межмышечной гематомы в области левой ягодицы после паде— ния. На 4 день госпитализации спонтанно возникло носовое кровотечение.

Было проведено цитохимическое исследование содержания гликогена, активности дегидрогеыаз тромбоцитов и показателей тромбоцитокинетики.

У больного выявлено снижение активности всех исследуемых дегидрогенаэ тромбоцитов: ЛДГ 3,4 гр/тр (при норме 6,99+0,003 rp/тр); Г-6ФД

3,03 гр/тр (при норме 6,49+0,18 гр/тр); о(ГФД 2,63 гр/тр (при норме 5,54+

+0,13 гр/тр); СДГ 2,15 гр/тр (при норме 4,57+0,27 гр/тр).

Результаты исследования показали снижение количества гликогена в тромбоцитах до 59 .

У больного до инкубации тромбоцитов выявлено 59 фосфатаэоположитепь— ных тромбоцитов, после — 9 . Затем по формуле вычисляли тромбоцитопоэз:

Р Nq(t t„). 4 (с — t„) „

1000 42 р

279000 ° (5 9 — 9)

42

332,142 тыс/сут (лри норме

125, 4+5, 6 тыс /сут), где Р— тромбоцитопоээ (тыс/сут);

I — доля фосфатазоположительных тромбоцитов до инкуба?JHH — доля фосфатазоположительных тромбоцитов после инкубации;

И вЂ” общее количество тромбоцитов в 1 мм крови в тыс. в момент исследования.

Таким образом, выявлена функциональная неполноценность тромбоцитов, диагноз болезни Виллебранда подтвержден..установлена тяжелая форма заболевания, тяжелый геморрагический криз.

Ребенок получил следующую терапию:

26 доз криопреципитата, 900 мл антигемофильной плазмы, 800 мл Е-амино— капроновой кислоты, прямые гемотрансфузии от отца по 100 мл трижды, АТФ в/м по 1,0 ежедневно, жженую магнезию 0,5 3, витамины В.,Б аа

0,005 3, В 0,02 ° 3, С 0,1-3 в течение госпитализации. На 12-й день

3 10824 кровотечение прекратилось и на 14 день мальчик выписан в удовлетворительном состоянии с выходом из геморрагического криза.

Пример 2. Оля Л., 13 лет, поступила в клинику с носовым кровотечением для выяснения его генеза.

У отца — периодически носовые кровотечения, лабораторно — болезнь

Виллебранда. У матери в детстве íî- 1ð совые кровотечения, по настоящее время обильные месячные, лабораторно тромбоцитопатия.

Раннее развитие девочки без особенностей. Страдает кровоточивостью с:

4 лет, когда появились частые (практически ежедневные) носовые кровотечения длительностью от 25 до 30 мин до нескольких часов. С 12 лет длительные (10 дней), обильные месячные. При обследовании выявлен умеренно сниженный уровень УШ фактора (337), функциональная активность тромбоцитов снижена также умеренно, что позволило предположить наличие болезни Виллебранда. Однако клиническая тяжесть заболевания нс вполне соответствовала лабораторным показателям. При цитохимическом обследовании методами, описанными в примере 1, удалось выявить значительное снижение содержания гликогена в тром— боцитах (737 гликогенположительных тромбоцитов, показатель интенсивности реакции на гликоген 117 гр), a«â€”

35 тивности их ферментов — ЛДГ до

3,65 гр(тр, Г-6ФД до 3,53 гр/тр, aL-ГФД до 2,8 гр/тр, СДГ до

2,94 гр/тр, КФ до 752 (исследование активности кислой фосфатазы провоо .16 дилось при 36,8 С в теч=-вие 58 мин), что позволило установить заболеваi ние Биллебранда и скоррегировать терапию. Девочка получила внутривенно 3 дозы криопреципитата, 100 мл . 4

Е-АКК, в/м вводилась АТФ по 10 ежедневно, per os получила жженую магнезию 1,0 ° 3, витамины В,,В аа

0 005 3, Вь 0,02 3, С 0,1-3. На

2-й день кровотечение прекратилось, а на 4-й день с выходом из геморра50 гического криза девочка выписана домой в удовлетворительном состоянии.

Пример 3. Больной Саша 3., 3 года 6 мес, страдает кровоточивостью с года в виде экхимозов на коже и носовых кровотечений (редко) .

При обследовании согласно предлагае00 Д мому способу выявлено снижение уровня УШ фактора до 1,032, умеренное снижение динамических свойств тромбоцитов, уменьшение активности

ЛДГ пластинок до 5,42 гр/тр, Г-6ФД цо 5,3 гр/гр, с -ГФД до 4,28 гр/тр, СДГ до 4,29 гр/тр, количества гликогенположительных тромбоцитов до 857, показателя интенсивности реакции на гликоген до 232 гр. Количество фосфатазоположительных тромбоцитов и длительность их жизни были нормальными (957 и 1,99 сут соответственно).

Поставлен диагноз: болезнь Виллебран да, легкая форма.

Огец, 27 лет, клинически здоров.

При обследовании выявлен сниженный уровень УШ фактора (497). Нарушений со стороны динамических свойств тромбоцитов не выявлено. При цитохимическом исследовании выявлсно снижевис количества гликогенположительных тромбоцитов до 76% и активности ЛДГ пластинок до 5,9,гр/тр, что говорило о качественной неполноценности тромбоцитов (ферментопатия) и позвонило поставить диагноз. болезнь Вп;-лебранда, латентная форма. Мать, 28 лет, в детстве отмечались носовыс кровотечения, лабора— торно — громбоцитопатия. У всех

c 6cëåãîD,3:E,P:ì членов этой семьи при исследовании активности кислой фосфатазы идкубация тромбоцптов проводио, лась в течение 62 мин при 37,2 С.

У всех цс той в период криза и

Ремисе -.и oT Å×àåòåp СиижЕНИЕ актИВности ферментoE3 тромбоцитов . Наибольшие иэмецеи|EH выявлены Е3 период кри— за„в и=-р 3од ремиссии OEEEE !EMeioT тецценпию;; повышению, но без норм- .лиза цпп, Выявлена прямая эависимос:ть между актив .Eoc TEN ферментов и динамическими свойствами тромбоцитов от ".Tепенп нарушснт я активности ферментов ".:.свисит тяжесть болезни

Виллсбг3анда.

Таким образом, цитохимическое ис— следование содержания гликогена, активности ЛПГ, Г-бФД, <-ГФД, СДГ, КФ тромбоцитов и тромбоцнтокинетики при болезни Виллебранда позволяет более точно выявлять дисфункцию тромбоцитов и по;3ысить точность диагностики в случае легких и скрытых форм н Я 3 2 /., y с г а E E o P E E T ь г я ж е с т ь з а б Ол е в а— н3 я, глубину геморрагического кр:.за, прогнозировать его течение и, сле1082400

Составитель E.Æèòíèêñía

Редактор А.Маковская Техред .П.Коцюбняк Корректор Л.Шеньо

Заказ 4059 Тираж 688 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 довательно, проводить коррекцию терапии.

Кроме того, выявление скрытых форм заболевания у родителей имеет немаловажное значение при проведении 5 медикогенетического консультирования и даче рекомендаций. Выявление скрытых форм заболения также имеет значение при предоперационном обследовании различных больных и выработке адекватной до- и послеоперационной терапии.