Питательная среда для спорообразования гриба entomophthora thaxteriana
(19)SU(11)1111276(13)A1(51) МПК 6 A01N63/00(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯк авторскому свидетельствуСтатус: по данным на 10.01.2013 - прекратил действиеПошлина:
(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ СПОРООБРАЗОВАНИЯ ГРИБА ENTOMOPHTHORA THAXTERIANA
Изобретение относится к области защиты растений и может быть использовано для получения покоящихся спор гриба. Для получения глубинных покоящихся спор гриба Е. thaxteriana известна среда на основе пептона, дрожжевого экстракта, мальтозы. Недостатки аналога состоят в том, что для приготовления ее используют дорогие дефицитные продукты, а выход покоящихся спор гриба невысокий. Известна также питательная среда, состоящая из 1,0-1,5% соевой муки, 4-6% глюкозы и воды [2] Основными недостатками этой среды являются продолжительность процесса культивирования и высокое содержание дорогостоящей глюкозы. Цель изобретения сокращение длительности культивирования и утилизация отходов от производства препарата. Для достижения цели в питательной среде для спорообразования Entomophthora thaxteriana, включающей соевую муку, глюкозу и жидкую основу, в качестве жидкой основы используют фильтрат культуральной жидкости того же гриба при следующем соотношении компонентов, мас. Соевая мука 1,0-1,5 Глюкоза 1,0-2,0
Фильтрат культуральной
жидкости Е. thaxteriana Остальное
Фильтрат культуральной жидкости стимулирует спорообразование, что выражается в повышении скорости роста культуры и быстром синхронном спороношении уже на 3-4 сутки роста (без использования фильтрата высокий титр спор достигается лишь на 6-7 сутки), а также в более высоком выходе покоящихся спор 1,4-1,8
106 спор/мл. Кроме того, использование фильтрата культуральной жидкости позволяет снизить норму расхода глюкозы. Технология приготовления среды. Фильтрат культуральной жидкости от предыдущего цикла выращивания стерилизуют при 0,5 ат 20 мин, в стерильном виде он может хранится 5-6 месяцев. В приготовленном фильтрате определяют остаточное содержание глюкозы и добавляют, учитывая полученные результаты, 1-2% глюкозы так, чтобы общее количество сахаров в среде равнялось 4-6% Кроме того, в среду вводят 1,0-1,5% соевой муки. Затем проводят повторную стерилизацию среды при 0,5 ат 20 мин. Если фильтрат используется для приготовления питательной среды сразу после отделения биомассы, то стерилизацию проводят только один раз после добавления глюкозы и соевой муки при 0,5 ат 20 мин. П р и м е р 1. В фильтрат культуральной жидкости, полученный от 5-суточной культуры (остаточный сахар около 3%) вводят 1% соевой муки и 2% глюкозы, стерилизуют при 0,5 ат 20 мин и засевают инокулюмом в количестве 4% Культивирование проводят при 27-28оС и начальном рН среды 6,6-6,8. Контролем служит вариант без использования фильтрата со следующим соотношением компонентов среды, мас. Соевая мука 1
Глюкоза 5 (что равно
суммарной концент-
рации сахара в опыте)
Вода Остальное
На 2 сутки роста в варианте с использованием фильтрата культуральной жидкости титр спор достигает величины 1,7106 спор/мл, в то время как в контроле лишь 0,7 106 спор/мл. П р и м е р 2. Для выращивания гриба используют свежий фильтрат 7-суточной культуры (остаточный сахар 3%)в который добавляют 1% соевой муки и 1% глюкозы. Культивирование проводят при 27-28оС и рН 6,8-7,0. Титр спор на 3 сутки роста достигает величины 1,0106 спор/мл, на 5 сутки 1,4106 спор/мл. В контрольном варианте с 1% соевой муки и 4% глюкозы (равно суммарной концентрации сахара в опыте) без фильтрата культуральной жидкости количество образующихся спор не превышает величину 0,6106 спор/мл. Использование предлагаемой среды позволяет сократить продолжительность культивирования в 2,0-2,5 раза, повысить продуктивность процесса в 1,5-2,0 раза, сократить расходы на питательную среду в 2-3 раза и утилизировать отходы при получении биопрепарата.
Формула изобретения
Глюкоза 1,0 2,0
Фильтрат культуральной жидкости E. thaxteriana Остальное
