Штамм @ @ 8,разлагающий @ -метилстирол

 

Штамм Pseudomonas aeruginosa 8 (Всесоюзная коллекция микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер ВКМ В-1517 Д), разлагающий о(.-метил стирол. (Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

llO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3590730/28-.13 (22) 11.05.83 (46) 07. 10.84. Бюп. И - 37 (72) Л.А. Головлева, А. Н.Илялетдинов, Д. Б.Джус улова и P .М. Алиева (71) Институт биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР и Институт микробиологии и вирусологии AH Казахской CCP (53) 663.18 (088.8) (56) 1. Omori Т., Jigami Y., Minoda Y.Microbial < xidation ofсС -metylsterine and (metylsterine.

"Agricultural and Biological Chemistry". 1974, v. 38, И 2, р.409-415, 2. Авторское свидетельство СССР

У 1033542, кл . С 12 Й 15/00, 1982. (д) С 12 и 1/20, С 02 Р 3/34, С 12 К 1/385 (54) ШТАММ PSEUDOMONAS AERUGlNOSA 8, РАЗЛАГАЮЩИИ К -МЕТИЛСТИРОЛ. (57) Штамм Pseudomonas aeruginosa 8 (Всесоюзная коллекция микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер BKN В-1517 g), разлагающий

OL-метилстирол.

111731r3

Изобретение относится к микробио- логии, представляет собой новый штамм микроорганизмов, способный разлагать<К -метилстирол, и может быть использовано в химической промышленности для очистки сточных вод при производстве синтетического каучука. (, -Метилстирол является высокотоксичным компонентом сточных вод про- 10 изводства синтетического каучука дивинилметилстирольного типа, загрязняющим не только водоемы, но и атмосферный воздух.

Известен бактериальный штамм !5

$107В1, выделенный из почвы, способный частично окислять g — метилстирол, нс. расцепляя при этом ароматическое o.u ûto (1j .

Известен также штамм Вас.111.us 20

ce reu s 3, р а зрушающий c(, -метилстиl>).

Однако известный штамм разлагает

W-метилстирол лишь в концентрации

2 г/л при продолжительности процесса 25

14 сут в условиях ограниченной аэрации или 3 сут при встряхивании на качалке.

Целью изобретения является получение штамма Pseudomonas aeruginosa 8 щ разлагающег î g -метилстирол, т. е, обладающего способностью к дerpapaции К,-метилстнрола с полным окислением алифатического фрагмента и

I расщеплением ароматического кольца.

Итамм выделен из сточных вод производства синтетического каучука.

Птамм полностью деградирует молекулу

8.-метилстирола, используя его в качестве единственного источника угле- 40 рода и энергии при концентрации его в среде 10 г/л. Процесс заканчивается через 2-3 сут. !

Характеристика штамма Pseudomonas неruginosa 8.

Коллекционный номер BKI" В-15170.

Ср eда дл я хр ан ения — МПА.

Форм» и размер клеток: 0,5-0,8» х1,0-2,0 мкм у 24-часовой культуры, выращенной на мясо-пептонном бульоне.50

Клетки палочковидные, монотрихи, тип деления простой, грамм-отрицательные .

На мясо-пептонном агаре культура образует круглые колонии диаметром 55

3-5 мм с ровными краями, слегка выпуклые, гладкие, блестящие, ныделяет в среду зеленоватый пнгмент.

На среде 8-E срС.-метилстиролом образует округлые копонии диаметром

1,5-2 мм.

Физиолого-биохимические признак .

Аэроб, растет при 20-42 С, опти0 мум при 28-35 С.

Оптимум рН 7,0-7,5.

Анаэробно не ферментирует глюкоз

Нитраты редуцирует.

Желатину разжижает.

Крахмал не гидролизует.

Ацетоин не образует.

Обладает оксидазной, каталазной и уреазной активностью.

На среде КИНГ А образует пигмент пиоцианин, на среде КИНГ Б — пигмент флуоресцеин. усваивает сахарозу, глюкозу, фруктозу, рамнозу, арабинозу, ксилозу, мальтозу с образованием кислотыы.

Из спиртов ассимилирует глицерин, этанол, маннит, из органических кислот — ацетат, цитрат, лактат, тартрат и сукцинат, из аминокислот — Ы-валин и !3-алании.

Ассимилирует бензоат, !-оксибензоат, протокатехоат, салицилат, бифенил, слабо растет На пирокатехине, не. усваивает толуол, парамета- и орто-ксилолы, псевдокумол, нафталин, фенилуксусную кислоту.

Пример !. .Культуру Pseudo—

monas aeruginosa штамм 8 вырашивают на мясо-пептонном агаре в течение суток. Суспензию выросшей культуры высевают в колбы емкостью 75О мл со средой 8-Е, разлитой по 100 мл.

Состав среды, г/л: NgS04 7Н20 0-0,8, NaC1 0,5; КН2РО, 0,7 (NH4)2HÐ04 1,5;, вода водопроводная до 1,0 л (фосфаты стерилизуются отдельно в видв раствора в дистиллированной воде) .

К, -Метилстирол вносят .непосредственно в колбу с культурой в концент-. рации 10 г/л. Культуру выращивают на качалке при 200 об/мин температу0

» ра ферментации 29 С, контроль за процессом разложения осуществляют с помощью газовой и тонкослойной хроматографии. Содержимое колбы подкисляют до рН 2,0, трижды экстрагируют зтиловым эфиром, эфир упаривают на роторном испарителе, остаток растворяют в О,1 мл этилового спирта и анализируют методами тонкослойной и газовой хроматографии. В основном

111731

Составитель Т.Мелентьева

Техред М.Тепер Корректор А.Обручар

Редактор Н.Егорова

Заказ 7152/17 Тираж 521 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раупк.кая наб., д. 4/5

Филиал ЛПП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4 процесс разложения осуществляется в первые двое суток, остаточное содержание -метилстирола в среде через двое суток, определенное газохроматографически, составляет 1,57. от исходного, через трое суток

0,037., на четвертые сутки ф -метилстирол в среде не обнаружен. Анализ культуральной жидкости на содержание промежуточных продуктов окисления доказывает полное разложение субстрата — окисление алифатического фрагмента с последующим расщепле нием ароматического кольца по метапути.

Таким образдм, новый штамм Pseudomonas aeruginosa 8, способный полностью разлагаться -метилстирол, может быть использован для деградации

® -ме тилс тир ол а при в ьк оком e r o с одержании в промышленных стоках производства синтетического каучука. Исполь10 эование его в активных илах стоков каучукового производства позволит значительно снизить загрязнение окружающей среды.