Способ хранения крови

 

СПОСОБ ХРАНЕНИЯ КРОВИ в жидком состоянии, отличающийся тем, что, с целью увеличения сроков ее хранения, кровь под давлением 400-500 атм охлаждают соответственно до (-5)-(-6)С.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН (19) (й) 1(5)) А 61 К 35/14

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3496396/28-13 (22) 27.09.82 (46) 23.11.84. Бюл. Р 43 (72) IO.A.КУденко, А.Г.Звегинцев, И.И.Гительзон, P.A.Ïàâëåíêî и В.Л.Серебренников (71) Институт биофизики Сибирского отделения АН СССР и Институт физики им.Л.В.Киренского (53) 615.378-012(088.8) (56) 1.Гаврилов О.К., Кулешов (0.Я.

Массовая заготовка крови и ее компонентов. М., "Медицина, 1982 (прототип). (54)(57) СПОСОБ ХРАНЕНИЯ КРОВИ в жидком состоянии, о т л и ч а ю— шийся тем, что, с целью увеличения сроков ее хранения, кровь под давлением 400-500 атм охлаждают соответственно до (-5)-(-6) С.

1124974

Изобретение относится к медицине и может быть использовано при хранении крови.

Известен способ хранения крови в жидком состоянии при 4ОС с консервантом ЦОЛИПК-7S jl) .

Однако известный способ не обеспечивает длительного хранения крови с сохранением функциональной активности ее компонентов °

Целью изобретения является увеличение сроков хранения крови.

Укаэанная цель достигается тем, что согласно способу хранения крови . в жидком состоянии, последнюю под давлением 400-500 атм охлаждают 15 соответственно до (-5) †(-6) С.

Пример. Контейнер предварительно стерипиэуется и заполняется кровью. Используются кбнтей неры двух типов: стеклянные и резиновые (силиконовые). Контейнер заливается дистиллированной водой и кипятится в течение 30-45 мин в закрытом виде в стерилизатбре для шприцов. Затем стерилизатор с кон- 75 тейнером переносится в бокс. В боксе находится кровь, привезенная со станции переливания крови. Кровь, стабилизированная гепарином из расчета 5 ед. на 1 мл крови берут во флаконы емкостью 50 мл. В стерильном боксе вскрывается завальцованный флакон с кровью, и кровь наливается в контейнер, предварительно извлеченный из стерилизатора и ополоснутый физраствором. Это

35 делается в целях избежания гемолиэа водой,,в которой кипятился контейнер. Заполненный кровью контейнер помещается в камеру высокого давления, которая представляет собой ци- 40 линдр с завинчивающимися гробками и с электровводами для измерения . давления и температуры. Полость каме, ры заполняет глицерин, который бес контактно; передает давление образ- 45 цу, так как контейнер с кровью пред(ставляет собой цилиндр с пробками, играющими роль поршня. В камере ручным насосом создается давление.

Следующая операция, охлаждение камеры, осуществляется в криостате до заданной температуры. Образец с кровью хранится в течение определенного времени:(5,10,20,30 сут). Затем начинается обратный процесс: камеру вынимают иэ криостата и через 15-20 мин, когда ее температура достигает комнатной температуры, начинают плав но сбрасывать давление до атмосферного. Такая последовательность операций необходима для предотвращения 60 замерзания крови. Температура в контейнере поднимается медленно, в течение нескольких минут. B случае быстрого Сброса давления, кровь ка". кое-то время находится при отрицатель.65 ной температуре, что неизбежно приводит к гемолизу . После сброса давления образец извлекается из камеры для биохимических анализов. Определяется процент разрушенных эритроцитов, содержание гемоглобина, выход калия в плазму, содержание калия в эритроцитах, Р о — характерный показатель, использующийся для оценки положения кислородно-диссоционных кривых, приведенный к стационарным условиям (4 37О и рН 7,4), по формуле Р О-- Р + 0,48 рН 7,4, где P фактически наблюдаемое парциальное давление кислорода при рН опыта.

Морфология исследуется на мазках под микроскопом (определяется число нормоцитов, шиповидных,сфероцитов). Кроме исследования красного ряда, исследуется белая кровь — фагоцитарная активность лейкоцитов по биолюминесцентному тесту. Все эти показания сравниваются с предвари- тельно исследованными на контрольной гепариниэированной крови в день забора.

В табл.1 дана сравнительная оценка хранения крови по предлагаемому и известному способам.

В камере создается давление 400 атм и температура-(5+0,1) С.Образцы крови хранятся в этих условиях 5-30 сут (табл.1). Через 5 сут исследуют жизнеспособность клеток крови и получают следующие результаты: разрушение эритроцитов менее 1% и составляет .0,5+0,5%. Сфероцитов и шиповидных клеток не обнаружено, а в известном их количество за это время увеличивается до 80%. Содержание калия в плазме по предлагаемому способу составляет 20,5 7 1,2 мг%, а по известному содержание калия в плазме к 5 сут увеличивается до 33,9+3,5мг%.

Содержание калия в эритроцитах по предлагаемому способу к этому времени составляет 289+3,0 мг%, что выше, чем в известном (257+0,3 мг%).

Р через 7 сут хранения составляет

19,3$1,29 мм рт.ст., а по известному способу — 15,2+0,95 мм рт.ст.

Фагоцитарная активность лейкоцитов за 4 сут хранения почти не изменяется (90-95%), а в известном составляет 0%.

Через последующие 10, 20 и 30 сут почти все параметры, характеризующие функциональное состояние крови (табл.2), лучше,чем в известном.

В табл.2 приведены результаты экспериментов по хранению эритроцитов крови, стабилизированной гепарином (разрушение эритроцитов в процентах).

Преимущества предлагаемого способа по сравнению с известным эак» лючаются в том, что в известном уже через 12 ч лейкоциты практически

1124974 все теряют свою активность, а в предлагаемом способе активность остается высокой даве череэ 22 сут хранениями предлагаемый способ эффективнее по сохранению функциональных свойств красной кровиу хранение крови не требует никакиХ консервырукицих растворов, некоторые нэ которых токсичны.

Предлагаемый способ такие позволяет увеличить срок хранения крови при сохранении ее функциональной активности.

1124974

Ol с с0

+I

3Ч с

33Ъ л л

00 с о

+I о с

3Ч лф

ОЪ . с

333 <Ч с

° У

Л3

Cf

333, Ц;

33I j (!

3Ч СЧ с м

3Ч с

3Ч

3Ч

О\

3Ч +1

РЪ с

О3 л л

Ch с о

+! л

an л

4 Ъ с л

+1 с

Al с

ОО

+1 л

3Ч

Сч с

+!

° Ф (Ч

EO

+3

3 с

00 (Ч с

+I о

Ч)

3Ч Ф с

\Р

+1

in Ф

ПФ о с

3Ч

3Ч с

Ф Ъ

+I о о

С"Ъ оа

Ю с (Ч

+I

Р3 с

ОЪ !

3Ъ

33Ъ с

РЪ

+I

33Ъ с

РЪ

РЪ

РЪ с л

Н

Зс с о

3Ч

3 с

С Ъ

+l ь с л

Зс

3Ч с

+I

33Ъ с

Ю (Ч (О

\ о н о с

all!

Г) с л!

3Ч с о Ч

3Ч

СЧ

+I

0Ъ с

ОЪ

an о с о

C) ь

<Ч

C) с

+ л

Ю !

Г Ъ

in

+1

lA ао о

СЧ

+3

СО

+! о

+3 +3

3Ч О

« ъ 3 an a о <ч w а î ч а оо о

Л3 Л! Л «» СЧ СЧ СЧ <Ч ГЧ РЪ

Ц

Ф и

Ч Ф а

Ф а Ф

Ф М

Ф йо оы

О Ф он о ое

L aa) о

Е

1 ю

ФО мо

W 3»

5 $ ах

3» Н о х Ф х ю

Х FJ

Ф х а0 Х ах

33 Х

Ф ж х ах и а

Х ох н а

М И

R""

fe c

I3I ал

33! °

Ф

R aap ал

П3 Н аФ нц. х ю

Ф Ю н оо ао !

=3 о

1124974

Таблица2

Количество,Ъ,разрушенных эритроцнтов за .вуемЯм сУт

100

80+4,1

7 +1,9

3 +0,9

О, 5+0 5

20+2

5+1 ° 7

2, 5+О, 7

0,5+0,5

0,5+0, 5

0,5+0,5

0,5+0,5

0,5+О, 5

05+05

1, 2+0,7

-9+0,1 "7+0 1

-6 5+0,1

-6,0+0,1

800

23+2,5

12 +2,3

2 +0,7

1,0+0,6

1,0 «+0»б

10+2, 5

5<.1

1,0+0,7

600

550

500

0,5+0,5 0,5+0,5

-5,5+0,1

450

0,5+0 5

О, 5+0,5

-5, ОтО, l

-4, 510, 1

400

2 0+0,7 3,0 +0,7

1,0+0,6

1,0+0,6

1,0+0,6

1,8+0,8

350

-4,0+0,1

3i0 +0,7

2,010,6

300

2,2+0,7 5,0 11,2

-3,0+О,l

-2,0+0,1

200

2,6+0,9 8,0 +2,0.100

Составитель Н.Гуляева

Техред Т.Маточка Корректор Е.Сирохман

Редактор О. Черниченко

Заказ 8323/5 Тираж 687

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, %-35, Раушская наб., д.4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная,4