Питательная среда для выращивания гвоздики @ @
ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ГВОЗДИКИ IN VITRO, содержащая натрий фосфорнокислый двузамещенный , аммоний азотнокислый, кальций хлористый,этилендиаминотеттраацетат натрия, калий азотнокислый , магний сернокисльпй, калий фосфорнокислый однозамещенный, железо сернокислое, цинк сернокислый, борную кислоту, марганец сернокислый, медь сернокислую, кобальт хлористый, натрий молибдёновокислый, калий йодистый, тиамин, глицин, аденин,/Эиндолилукеусную кислоту, кинетин, .гибtSepeллoвyю кислоту, сахарозу |и воду, о т л и ч а ю щ а я с я тем, что, с целью усиления роста корневой системы и увеличения выхода саженцев, она дополнительно содержит дестиобиотин при следующем соотношении компонентов, мг/л: Натрий фосфорнокислый 169-172 двузамещенный 1640-1660 Аммоний азотнокислый 435 - 445 Кальций хлористый Этилендиаминотетра37 ,2-37,4 ацетат натрия 1850-1910 Калий азотнокислый Магний сернокислый 365-375 калий фосфорнокисльШ однозамещенный i 169-171 Железо сернокислое 27,5-28,0 Цинк сернокислый 8,5т8,7 § Борная кислота 6,0-6,4 Марганец сернокислый 22-22,5 (Л Медь сернокислая 0., 024-0,025 Кобальт хлористый 0,024-0,025 Натрий молибдёновокислый 0,24 -0,26 Калий йодистый 0,8 -0,85 Тиамин 0,5-1,0 Глицин 1,0-2,0 Аденин 1,0-5,0 /3 -Индолилуксусная кислота 0,5-2,0 Кинетин 0,5-2,0 Гибберелловая кислота 0,1-0,5 0,,1 Дестиобиотин Сахароза 18000-22000 Вода До 1 л
I (19) (И) СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCKOlVIY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Е
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3402423/30-15 ,(22) 18.02.82 (46) 07.12.84.. Бюл. Р 45 (72) И.Я.Жола и У.Я.Каулиньш (71) Научно-производственное объединение Биохимреактив и Сельскохозяйственное предприятие Меристемовые культуры (53) 581.143.5(088.8) (56) 1.Коблиц К. Культура изолированных органов, тканей и .клеток растений. М, Колос, 1970, с.192-197.
2. Т1йввЕгН1 for Plantearl.
1971, 75, Р З,р.391. (54) (57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВыРА)цИВАНИЯ ГВОЗДИКИ 1N VlTRO, содержащая натрий фосфорнокислый двузамещенный, аммоний азотнокислый, кальций хлористый, зтилендиаминотеттраацетат. натрия, калий азотнокислый, магний сернокислый, калий фосфорнокислый однозамещенный, железо .сернокислое, цинк сернокислый, борную кислоту, марганец сернокислый, медь сернокислую, кобальт хлористый, натрий молибденовокислый, калий иодистый, тиамин, глицин, аденин,P— . индолилуксусную кислоту, кинетин,. .гибберелловую кислоту, сахарову ! ,иводу, отличающаяся, тем, что, с целью усиления роста кор3(51) А 01 G 31/00; А 01 Н 3/00 невой системы и увеличения выхода саженцев, она дополнительно содержит дестиобиотнн при следующем соотношении компонентов, мг/л:
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 169-172
Аммоний азотнокислый 1640-1660
Кальций хлористый 435 — 445
Этилендиаминотетраацетат натрия . 37,2-37,4
Калий азотнокислый 1850-1910
Магний сернокислый 365-375
Калий фосфорнокисль)й однозамещенный1 169-171
Железо сернокислое 27,5-28,0
Цинк сернокислый 8,5-.8,7
Борная кислота 6,0-6,4
Марганец сернокислый 22-22,5
Медь сернокислая 0.,024-0,025
Кобальт хлористый 0,024-0,025
Натрий молибденовокислый 0,24 -0,26
Калий иодистый 0,8 -0,85
Тиамин 0,5-1,0
Глицин 1,0-2,0
Аденин 1,0-5 0
В-Индолилуксусная кислота 0 5-2,0
Кинетин 0,5-.2,0
Гибберелловая кислота 0,1-0,5
Дестиобиотин 0,01 0,1
Сахароза . 18000-22600
Вода До 1 л
1127550
15
25
35
50
60
Изобретение относится к получению безвирусного посадочного ма.териала растений методом выращивания меристемной ткани на искусственных питательных средах, в частности к питательным средам для культивирования тканевых культур, меристем растений.
Известна среда для культивирования т.каневых культур, содержащая L -аминокислоты, макроэлементы, микроэлементы и добавки витаминов биотина, холйна, фолиевой кислоты, пантотената кальция, тиамина,рибофлавина, аскорбиновой кислоты, сильно увеличивающие корнеобразование
Ы
Однако для данной среды характерны несовместимость активатора роста корневой системы биотина с другими рострегуляторами и недостаточно интенсивный рост корневой системы.
Известна также среда Мурасиге и
Скуга для.культивирования тканевых культур, обеспечивающая нормальное развитие меристем разных культур и корневой системы (2) .
Среда содержит макроэлементы, микроэлементы и биологически активные вещества при следующем соотношении компонентов, мг/л:
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 170,0
Аммоний азотнокислый 1650,0
Кальций хлористый 440,0
Калий азотнокислый 1900,0
Магний сернокислый 370,0
Калий фосфорнокислый однозамещенный 170,0
Железо сернокислое 27,8
Натрий ЭДТА 37,3
Цинк сернокислый 8.6
Борная кислота 6,2
Марганец сернокислый 22,3
Медь сернокислая 0,025
Кобальт хлористый 0,025
Натрий молибденовокислый 0,25
Калий иодистый 0,83
Тиамин 0,4
Пиридоксин 0,5
Витамин РР 0 5
Глицин 2,0
Аденин 80,0
Гидролизат казеина 1000,0
Мезоинозит 100, 0
Р-Индолилуксусная кислота 2,0
Кинетин 0,2
Гибберелловая кислота 0,1
Сахароза 30,000,0
Arap 10,000,0
Вода До 1 л
Однако для известной питательной среды характерны сравнительно невысокий выход полученных саженцев, особенно в осенний период,и длительное развитие корневой системы атериала, что увеличивает сроки оста саженцев.
Кроме того, длительное пребывание меристем в лабильном состоянии с неразвитой или слаборазвитой корневой системой требует соблюдения стерильности, температуры, освещения и других условий, уменьшает выход .саженцев, снижает мощность стендов культивирования, увеличивает себестоимость продукции.
Цель изобретения — усиление роста корневой системы и увеличение выхода саженцев.
Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания растений in vitro, содержащая натрий фосфорнокислый двузамещенный, аммоний азотнокислый, кальций хлористый, этилендиаминотераацетат натрия, калий азотнокислый, магний сернокислый, калий фосфорнокислый однозамещенный, железо.сернокислое, цинк сернокислый, борную кислоту, марганец сернокислый, медь сернокислую, кобальт хлористый,. натрйй молибденовокислый, калий иодистый, тиамин,глицин, аденин, 3- индолилуксусную кислоту, кинетин, гибберелловую кислоту, сахарозу и воду, дополнительно содержит дестиобиотин при следующем соотношении компонентов, мг/л:
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 169-172
Аммоний азотнокислый 1640-1660
Кальций хлористый 435-445
Зтилендиаминотетраацетат натрия 37,2-37,4
Калий азотнокислый 1850-1910
Магний сернокислый 365-375
Калий фосфорнокислый однозамещенный 169-171
Железо сернокислое 27,5-28,0
Цинк сернокислый 8,5-8,7
Борная кислота 6,0-6,4
Марганец сернокислый 22 -22,5
Медь сернокислая 0,024-0,025 кобальт хлористый 0,024-0,025
Натрий молибденовокислый 0,24-0,26
Калий иодистый 0,8 -0,85
Тиамин 0 5 -1,0
Глицин 1,0 -2,0
Аценин 1,0 -5,0 индолилуксусная кислота 0,5 -2,0
Кинетин 0,5 -2,0
Гибберелловая кислота 0,1 -0,5
Дестиобиотин 0,01 -0,1
Сахароза 18000 -22000
Вода До lл
Дестиобиотин в период неблагоприятных условий в начале посадки меристем на питательную среду, когда еще не образовался организм, приспособленный для вегетации, стимулирует развитие корневой системы, рост
1127550 растений и, возможно, обеспечивает потребность растения в биотине.
Действие дестиобиотина не снима ется рострегуляторами.
В среду можно добавить гидролизаты белков или заменить Р -индолилуксусную кислоту наet, -нифтилуксусную кислоту, однако в данной среде они дополнительный эффект стимулирования не создают.
Пример 1. Среду готовят путем растворения в бидистиллиро,ванной воде при следующем соотношении компонентов, мг/л:
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 169,0
Аммоний азотнокислый 1640,0
Кальций хлористый 435,0
Этилендиаминотетраацетат натрия 37,2
Калий азотнокислый 1850,0
Магний серноккслый 365,0
Калий фосфорнокислый одноэамещенный. 169,0
Железо сернокислое 27,5
Цинк сернокислый 8,5
Борная кислота 6,0
Марганец сернокислый 2.2,0
Медь сернокислая 0,024
Кобальт хлористый 0,024
Натрий молибденовокислый- 0,24
Калий иодистый 0,8
Тиамин 0,5
Глицин 1,0
Аденин 1,0 р -Индолилуксусная кислота 0,5
Кинетин 0,5
Гибберелловая кислота 0,1
Дестиобиотин 0,01
Сахароза 18000,0
Вода До 1 л
После установления рН среды до
6,0 раствор разливают в пробирки по
5 мл и в течение 20 мин стерилизуют в автоклаве при избыточном давлении
0,8 †. 1,0 атм.
В стерильном боксе в каждую пробирку размещают одну меристему, штатив с пробирками помещают в климатическую камеру, где иэ меристем развиваются растения, которые пересаживают в горшки с торфяным субстратом.
Выход саженцев по сравнению с известным способом составляет
103,8%.
Пример 2. Питательную среду для выращивания гвоздики in vitro готовят по примеру 1, растворением в бидистиллированной воде при следующем соотношении компонентов, мг/л:
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 170,0
1650,0
440,0
Аммоний азотнокислый
Кальций хлористый
Этилендиаминотетраацетат натрия
Калий азотнокислый
Магний сернокислый
Калий фосфорнокислый однозамещенный
Железо сернокислое
Цинк сернокислый
Борная кислота
Марганец сернокислый
Медь сернокислая
Кобальт хлористый
Натрий молибденовокислый
Калий иодистый
Тиамин .Глицин
Аденин
Р -Индолилуксусная кислота
Кинетин
Гибберелловая кислота
Дестиобиотин
Сахароза
Вода
37,3
1900,0
370,0
170,0
27,8 °
8,6
6,?
22,3
0,0245
0,0245
1S
0,25
0,83
0,75
1., 5
2,5
1,0
1,0
0,25
0,053,0
20000,0
До l л
Пример 3. Питательную среду для выращивания гвоздики in vitro готовят как в примере 1 растворением в бидистиллированной воде при следующем соотношении компонентов, мг/л:
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 172,0
Аммоний азотнокислый 1660,0
Кальций хлористый 445,0
Этилендиаминотетраацетат натрия 37,4
Калий азотнокислый 1910,0
Магний сернокислый 375,0
Калий фосфорнокислый одноэамещенный 1.7 1, 0
Железо сернок ислое 2 8, 0
Цинк сернокислый 8, 7
Борн а я кислота 6, 4
Марганец се рнокислый 2 2, 5
Медь с ернокисла я 0, 0 2 5
Кобальт хлористый 0, 0 2 5
Натрий молибденовокислый 0, 2 6
Калий иодис тый 0, 8 5
Тиамин 1, 0
Глицин 2,0
Аденин 5,0
Р-Индолилуксусная кислота 2,0
Кинетин 2,0
Гибберелловая кислота 0,5
Дестибиотин 0,1
Сахароза . 22000,0
Вода До l л
40
50
Выход саженцев по сравнению с известным способом составляет. 5 119,2%.
Выход саженцев по сравнению с.известным способом составляет 151,8%.
1127550
Составитель Е.Шкрадюк
Техред Т. Маточка КоРРектоР С.Шекмар
Редактор С.Саенко
Заказ 8773/2 Тираж 721 Подписное
ВНИИПИ Росударственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035» Москва, Ж-35, Раушская наб, д.4/5 филиал ППП Патент, г.ужгород, ул.Проектная, 4
Применение предлагаемого состава питательной среды позволяет увеличить выход саженцев на б — 743 в зависимости от времени года и снизить себестоимость получаемой продукции.
