ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3646524/23-04 (22) 29,09.83 (46) 07. 12. 8.7, Бюл. № 45 (71) Институт органической и физической химии им. А.Е.Арбузова Казанского филиала АН СССР (72) Г.В.Романов, В.Н.Назмутдинова, ° А.Н.Пудовик, Г.Х.Гильманова, А.С.Киреева и А.Э.Усманова (53) 547.26 .118.07(088.8) (56) Пурдела Д., Выпчану P. Химия органических соединений фосфора., "Химия", M., 1972, с. 188-189.

Батыева Э.С. Реакции присоединения и замещения в ряду амидов кислот трехвалентного Aochopa. Автореферат докторской диссертации, Киев, 1978.

Авторское свидетельство СССР

¹ 811782, кл. С 07 F 9/24, 1979.

Пудовик А.Н. и др. Новый метод синтеза фосфиновых и тиофосфиновых кислот. ЖОХ, .1963, 33, с. 3353.

Пудовик А.Н. и др. Ы-Аминобензилфосфины. Синтез и некоторые из свойства, ЖОХ, 1978, 48, с. 1008.

Кибардин А.М. и др. Взаимодействие диэтилацетилфосфита с N-бутилизобутироимином. Изв. Ан СССР, сер. хим.

1981, с, 2652.

Пудовик А.Н. и др. Реакции полных фосфитов с илифоровыми основаниями в присутствии фенола, ЖОХ, 1969, 39, с ° 1645.

Назмутдинов P.Я. Взаимодействие полных эфиров фосфорноватистой кисло- . ты с соединенями, содержащими кратные связи. Кандидатская диссертация.

Казань, 1979. (51)4 С 07 F 9/24, 9/46, 9/48, А 61 К 31/66 (54) (57) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ N-(1-ЦИАНОБЕНЗИЛ) -АИИЛОФОСФИТА ИЛИ ФОСФОНИТА общей формулы

R гр 7 СН-С6Н5

СН3 Cm где R=R ÎÑ2Í5 и при R вЂ” С?НБ

R-CN, заключающийся в том, что цианид трехвалентного фосфора общей формулы

В, 1Г

В где R u R имеют вьппеуказанные значения, Ф

Ф подвергают взаимодействию с метилбензальамином при эквимольном соотношении реагентов при комнатной температуре, причем, в случае получения фосфита при R и R вЂ” ОС Н процесс Я, Мю ведут в присутствии катализатора l181 краун-6 взятого в количестве 0 00120,002 моль на 1 моль исходного реагента.

114

Изобретение относится к химии фосфорорганических соединений, а именно к новому способу получения N-(1-цианобензил) -амидофосфита или -фосфонита общей формулы

В, 1 I I ..Р вЂ” 2 вЂ” Сн вЂ” С Н5

С 3 С где R = R = ОС Н или при R вЂ” C2H5

R вЂ” CN, которые обладают антивирусной активностью и могут найти применение в медицине.

Известен способ получения амидов кислот трехвалентного фосфора взаимодействием галоидангидридов кислот трехвалентного фосфора с аминами или амидогалоидфосфонитов и амидогалоидфосфитов со спиртами в инертных органических растворителях в присутствии третичных органических оснований.

Известные способы имеют существенный недостаток, так как получаемые амиды загрязнены солями аммония, которые существенно влияют на реакционную способность амидофосфитов и могут изменить направление процесса.

Кроме того, для получения соединений формулы I известными способами необходимы труднодоступные цианоалкиламины.

Известен также электрохимический способ получения амидофосфитов.

Однако в этом случае требуется применение специальной аппаратуры: электрохимической ячейки, потенциостата, инертной атмосферы. Кроме товЂ” го, по этому методу не могут быть получены амиды с цианогруппой в боковой цепи.

Соединения формулы 1 в литературе не описаны и являются новыми.

Целью изобретения является разработка простого и доступного способа получения N-(1-цианобензил)-амидофосI фита или -фосфонита, которые обладают антивирусной активностью.

Поставленная цель достигается описываемым способом получения N-(1-цианобензил)-амидофосфита или -фосфонита общей формулы I который заключается в том, что цианид трехвалентного фосфора общей формулы

В, R

-CN

3041 где R = R = ОС Н или при R вЂ” С Н

R вЂ” CN, подвергают взаимодействию с метилбензальамином при эквимольном соот5 ношении реагентов при комнатной температуре, причем в случае получения

I фосфита при R u R вЂ” ОС Н > процесс ведут в присутствии катализатора (187краун-б, взятого в количестве 0,00120,002 моля на 1 моль исходного ревЂ” агента. Уменьшение количества каталиэатора снижает скорость процесса и выход целевого продукта. Увеличение количества катализатора ведет к осмолению реакционной смеси и уменьшению выхода продукта.

Реакция протекает по схеме

Р Я

2О р-CN+C,Н СН-мСН Р- Ы вЂ” СНС Н г 5 Ь 1 6 5

СН, СИ

Указанная реакция является не очевидной. Так, например, известно, что фосфины, ацилфосфиты и триалкилфосфиты реагируют с азометинами с образованием соединений с P-С-, а не

P-N-фрагментом.

В описываемом способе используетЗО ся не известная ранее реакция цианидов трехвалентного фосфора с азометинами, что обеспечивает образование амидофосфитов с функциональной цианогруппой в амидном радикале и при атоме фосфора. Найдено, что при введении цианогруппы в молекулу амидофосфитов, повышается их устойчивость к окислению, а также они становятся биологически активными.

40 Строение полученных соединений доказано данными KPC и ЯМР вЂ” спектроскопии, состав подвержден данными элементного анализа.

Пример 1. N-Метил-N (1-циано4 бензил)-амидоэтилцианофосфонит.

К 4,4 г (0,04 моль) С H P(CN) g прикапывают 4,5 г (0,04 моль) С Н СН=

NCH при комнатной температуре. Разгонкой выделяют 6,4 r (58 ) продукта

5О с т, . 135 С (0,07 мм); с1 1, 1 164; и 1,5500.

Найдено, Е: С 62,30; Н 6,1;

Р 13,44; N 18,20.

С „ Н N P

Вычислено, Е: С 62,34; Н 6,06;

P 13,42; N 18,18.

Спектр КРС (q, см ) 2240, 2170 (C=N);

ЯМР P (д, м.д.): +44 38.

3 114

Пример 2; N-Метил-N-(1-цианобензил)-амидо-О,О-диэтилфосфит.

А. К смеси 7,6 г (0,05 моль) (С Н О)дРСИ и 6,1 г (0,05 моль)

С Н СН=NCH прибавляют 0,04 г (0,00015 моль) 318 3-краун-6. Смесь разогревается до 70 вЂ” 80 С и постепенно темнеет. Через 3 ч разгонкой смеси вьщеляют 4,6 r (347) N-метил5-(1-цианобензил)-амидо-О.О-пиэтил- фосфита с т.кип. 105 С (0,03 мм);

d 1,0440; n g i 5000. Спектр ЯМРэ Р (сР» м д ) +148; KPC (4» см ) 2230.

3041

4 для отделения осадка и специального охлаждения.

Испытание противовирусной активности проводили по отношению вируса

А2 штамм Ленинград 32/74.

Репродукцию вируса гриппа и испытание противовирусной активности проводили на переживающих кусочках хорионаллантоисной оболочки (ХАО) куриного эмбриона (КЭ).

B процессе работы была доказана возможность культивирования фрагментов ХАО и репродукции вируса в растворе Хенкса. Для определения токсичности соединение разводили (с коэффициентом 2) на растворе Хенкса и разливали по 0,5 мл в 6 лунок панели, куда вносили по фрагменту ХАО (1,5вЂ”

2 мм). Через 48 ч инкубации проверя5 l0

Уменьшение количества (18)-краун-6 ниже 0,015 r снижает скорость процесса и выход целевого продукта.

Б. К смеси 7,6 г (О 05 моль) (С Н,О) PCN и 6,1 r (0,05 моль)

C H CH=N-СН прибавляют 0,01 r (0,000037 моль) (183-краун-6 и выдерживают трое суток при комнатной температуре. Разгонкой вьщеляют 7,8 r (54X) N-метил-N-(1-цианобензил)-ами.до-О,О-диэтилфесфита с т.кип. 103 С (0,03 мм); d, 1,0647; n ð 1,5040.

Спектр ЯМР Р,р » м.д.) + 148; KPC (4» см " ):2230 (C=N).

В. К смеси 7,6 г (0;05 моль) . (С Н О) PCN и 6, 1 г (О, 05 мОль)

CgH CH=NCHg прибавляют 0,015 г (0,00006 моль) (18)-краун-6 и выдерживают сутки при комнатной температуре. Разгонкой выделяют 10,1 г (75X) продукта с т.кип. 105 С (0,03 мм);

d 1,0648; и р 1,5040. Спектр КРС (4 см ):2230 (C=N) ЯМР» Р (с м.д.

+ 148.

Г. К смеси 7,6 г.(0,05 моль) (С>Н О)

Разгонкой выделяют 10,6 r (80X) продукта с т.кип. 105 С (0,03 мм); 1 е

1,0647; п 1,5040. Спектр KPC (4» см ):2230 (СгИ) ЯМР » P (d, м.д.)

+ 148.

Описываемый способ получения амидофосфитов по сравнению с известными обладает рядом преимуществ.

Он позволяет получить чистые про:дукты, не загрязненные примесями (со лями аммония).

Способ осуществляется в отсутствии растворителей и соединения получают в мягких условиях, при комнатной температуре, не требуются фильтрования ли состояние оболочек. Минимальной токсической дозой считается та наименьшая концентрация, которая вызывает гибель клеток ХА0.

Вирус пассивировали заражением

10=11 вЂ” дневных куриных эмбрионов. по общепринятой методике. Испытание проводили АЛ-лантоисным вирусом, титр которого на куриных эмбрионах был

-S равен 10 и на клетках ХАО не меньше

10, титр гемагглютинина 2048.

Испытания проводили с 1, 10 и 100 дозами вируса и с каждым разведением соединения (с коэффициентом 2), концентрациями меньшими, чем минимальная токсическая доза для клеток ХАО, и с каждой дозой вируса становился опыт на ХАО в 6 лунках панели. Через 48 ч инкубации при наличии жизнеспособных клеток определяли наличие вируса в реакции гемагглютинации с 17 взвесью эритроцитов крови человека I (О) группы.

40 вируса гриппа А2 штамм Ленинград 32/74 при концентрации соединения 125вЂ”

250 мкг/мл и при заражении одной дозой вируса при концентрации 15,6;

31,2; и 62,5 мкг/мл. Минимальные концентрации соединений, задерживающих

«5 репродукцию вируса в 8 вЂ” 16 pas меньше минимальной токсической дозы для

ХАО. Как видно из данных таблицы, антивирусная активность полученных соединений находится на уровне из45 В тех же условиях ставили контрольные опыты о ремантадином (см. таблицу). Новые соединения задерживают репродукцию при заражении 100 дозами

5 I 143041 б вестных соединений, обладающих анти- штамм Ленинград 32/74 в переживающих вирусной активностью. клетках XAO.

Таким образом, N-(1-цианобензил)- Способ их получения является opvo амидофосфит и -фосфонит обладают про" стадийным, позволяет получать целевые тивовирусной активностью, они предот- 5 продукты из доступных реагентов и с вращают репродукцию вируса гриппа А2 хорошим выходом.

Антивирусная активность по отношению к вирусу гриппа А2 штамм

Ленинград 32/74

Соединение

Химиотерапевтнческий индекс для ХА0

Доза вируса

100 10 1

Минимал. Концентратокснч- цня соеность, динення, мкг/мл мкг/мп

С2Н СНЗ Q

Р - Й - СНС,Н, СИ

62,5

5" 1№ б- 66№ 6¹ 66 Ф 6 Ф- 5-1

6g 6№ 3-3 Ф 8