Штамм бактерий @ @ ,используемый при мочке льна

 

Штамм бактерий Clostridium felsineum 84 (Всесоюзная коллекция микроорганизмов института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер ВКМ В 1527Д), используемый при мочке льна. г (/) с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОцИАлистичесних

РЕСПУБЛИК

„„SU„, 1155618 A 15Р С 12 Н 15/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТКОЙ (21) 3569157/28-13 (22) 14.02.83 (46) 15.05.85. Бюл. 1Ф 18 (72) Н.П.Аврова и Ю.M.Âîsíÿêoâñêàÿ (71) Всесоюзный научно-исследовательский.институт сельскохозяйственной микробиологии (53) 663.18(088.8) (56) 1. Возняковская Ю.М., Попова Ж.П.

Экологические особенности культур вида Clostridium gurfelli,". "Микробиология", 1977, 66, 2, с. 311-317.

2. Авторское свидетельство СССР

Ô 293045, кл. С 12 N 1/02, заявл.

1969. (54) ШТАММ БАКТЕРИЙ С1 0$ТКПППМ

FELSINEUM 84, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ПРИ МОЧКЕ

ЛЬНА. (57) Штамм бактерий Clostridium

felsineum 84 (Всесоюзная коллекция микроорганизмов института биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, коллекционный номер ВКМ.В 1527Д), используемый при мочке льна.

1155618

Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к получению активных споровых.материалов для мочки льна и представляет собой новый штамм бактерий, используемый при мочке льна.

Известна культура Clostridium

gurfelli, применяемая при мочке льна (11.

Однако она не способнапри обычной 10 тепловой мочке в кислой среде разлагать пектиновые вещества, поскольку не синтезируют фермент полигалактуро назу.

Наиболее близким к предлагаемому 15 является штамм Clostridium felsineum 13 (ВНИИСХ), применяемый при мочке льна и способный разрушать пектиновые вещества Е23.

Недостатками данного штамма явля- 29 ются низкая активность продуцируемых им пектолитических ферментов, неспособность к мочке льна в регенерированной мочильиой жидкости, а также неустойчивость при хранении, приво- 25 дящая к образованию различных морфологических форм и малое спорообразование при промышленном выращивании.

Цель изобретения — повышение активности спорового препарата для Зо мочки льна.

Поставленная цель достигается штаммом бактерий Clodtridium felsineum 84 (Всесоюзная коллекция микроорганизмов АН СССР, коллекционный .номер ВКМ В 1527Д), используемым при мочке льна.

Штамм бактерий Clostridium felsiпеыв 84 выделен с льносоломы, Полученный штамм идентифицирован 4О по определителям Берже (1974) и

Prevot (1966) и имеет следующие морфолого-культуральные и физиологическую характеристики.

Морфолого-кулнтуральные признаки. 4$

Величина клеток 12-часовой культуры

3-бхай,2 мкм. Клетки имеют вид палочек, которые через 15-30 ч превращаются в клостридии, имеющие форму сигар и через 48-80 ч споруются. В молодом,Я возрасте палочки очень подвижны, перитрихи„ окрашиваются по Граму.

В клостридиальной стадии также подвижны, в клетках просматривается про= . спора и накапливается гранулеэа . .Я

На агаризовакной среде растет толь= ко в анаэробных условиях, образуя колонии оранжевого цвета, выпуклые, с ровными краями, с вросшей в агар более темной точечной серединой, диаметр колонии 2-6 мм.

На жидкой питательной среде при оптимальных температуре и рН проходит полный цикл развития и активно сбра" жнвает крахмал и пектиновые вещества с образованием rasa (в % по объему) водорода 54-60, углекислого газа

40-46.

Физиолого-биохимические признаки.

Молоко с лакмусом, свертывает, нодкисляет, образует газ, желатину активно разжижает, целлюлозу разлагает в анаэробных условиях в присутствии стартовых доз углеводов. Анаэроб. Оп о тимум температуры для развития 35-37 С.

Оптимальные значения рН 5,4-7,2.

Отношение к источникам углерода.

Растет на средах с различными углеводами, подкисляя среду и образуя газ. Активно используют ксилозу, глюкозу, лактозу, сахарозу, галактозу, фруктоэу, арабинозу, мальтозу,. декстрин, крахмал, пектин; не использует рафинозу, спирты не усваивает.

Отношение к источникам азота. Слабо использует.соли аммония и хорошо развивается на средах с органическими формами азота, такими как казеин, пелтон, кукурузный экстракт, аминокислотами (цистеином, цистином, аспарагиновой и глутаминовой, гистидином, тирозином, аргинином).

Признаки штамма устойчивы, штамм не патогенен для человека и животных.

HITE Clodtridium felsineum 84 хранится в музее Всесоюзной .коллекции микроорганизмов института биохимии и физиологии микроорганизмов,АН СССР и имеет коллекционный номер ВКМ

В 1527Д.

Сущность изобретения заключается в том, что штамм Clostridium felsineum 84 способен при выращивании образовывать споры, обладающие активным комплексом пектолитических ферментов, играющих существенную роль в процессе мочки льна.

Бактериальный споровый препарат получают путем выращивания штамма

Clostridium fe1siueum 84 на питательной среде следующего состава, г/л: картофельный или кукурузный крахмал

15-22; кукурузная мука 5-7; кукурузный экстракт 4-5; мел 4-6; аммоний сернокислый 1; 50%-ный раствор хлорного железа 3 мл; рН среды 5,8-7,4.

1155618

После выращивания в 1 мл культуральной жидкости содержится 200 — 280млн спор, Таблица 1

ПТЭ

Штаммы

Оптическая плотность

Величина еличина зон зон

510 нм ТБК 235 нм 550 нм ТБК

13 785

84 1496

619

0,98

3,30

0,27

5,60

1,89

0,35

Продолжение табл.1

КолиВыживаемость спор при хранении в1мл

ПГТЭ честно спор, млн/мл

12 мес 12 мес, Х измененных форм

6 мес

3 мес

235 нм 550 нм ТВК

25-30

13 2,30

84 7,00

1,06

60 45

60

2,04

206

208 208 208

li8 е

3ффективность действия препарата . Clostiidium felsineum 84, на цроцесс. пектолитин, полученного из культуры мочки льна отражена в табл. 2.

Таблица 2

1 В ваде рН 5,2

72 „, 1,2

54 +1,1

45- —+,1,2

Внесены споры Cl. felsiaeum 13

Внесены споры Cl. felsineum 84

В

2 В регенерированиой иочильной жидкости рН 6,8-7,0

52 1,3

В табл. 1 представлена сравнительная характеристика спор предлагаемого штамма и известного, из которой видно, что новый штамм образует споры, обладающие хорошей выживаемостью в течение. одного года, а также высбкой активностью пектолитическнх ферментов, значительно превосходящей известный: по пектинметнлэкстераэе в 1,9 раза, полигалактуроназе в

i,3-1,8 раза, пектин-трансэлнминазе

1,7-1,9 раза, попигалактуронат-трансэлиминаэе в 2-3 раза; и при этом образует в 3,5 раза больше спор, что соответственно увеличивает выход

l0 целевого продукта.

1155б18

Продолжение табл.2

Внесены споры Cl. felsineum 13

Внесены споры С1, felsineum 84

50 +1,2

42 + 1,3

П р и м е ч а н и е. 1 млрд. спор/r - титр препарата.

Составитель 3. Фалунина

Редактор Л. Авраменко Техред С.Мигунова Корректор(.. Шекмар

Заказ 3042/23

Тирах 525

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная; 4

Предлагаемый штамм отличается от штамма-прототипа тем, что, образуя более активный комплекс пектолитических ферментов, он сокращает процесс мочки льна по сравнению со штаммом-прототипом при обычной тепловой мочке на 9 ч (на 27 ч по сравнению с контролем) и при мочке в регенерированной мочильной жидкости на 10 ч, в то время как штаммпрототип в последнем случае вообще неэффективен. Таким образом, предлагаемый штамм Clostridi. felsineum

84 позволяет получать препарат для мочки льна хорошего качества за счет сбалансированного синтеза пектолитических ферментов.

Ожидаемый экономический эффект от применения препарата, изготовленного на предлагаемом штамме Clostridium felsineum 84 может составить

5-10 руб. на 1 т льносоломы или

10-20 руб. на 1 кг препарата.