Способ регенерации церулоплазмина

 

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А 61 К 35/14

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3384159/28-13 (22) 21.01.82 (46) 23.05.85. Бюл. № !9 (72) К. А. Мошков, О. П. Борисова, А. С. Яковлев, В. Г. Маслов, В. О. Рождественская и С. А. Нейфах (71) Институт экспериментальной медицины

АМН СССР и Институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера (53) 615.361.018.51/55 (088.8) (56) Ryden 1. et а1., Biochemistry, 1976, 15, р. 3411 — 3417.

„„Я0„„1156692 А (54) (57) СПОСОБ РЕГЕНЕРАЦИИ ЦЕРУЛОПЛАЗМИНА путем гельфильтрации его на сефадексе, отличающийся тем, что, с целью увеличения сроков хранения и повышения степени очистки, целевой продукт предварительно кристаллизуют путем диализа против 0,02 — 0,03 g натрий-ацетатного буфера при рН 5,2 — 5,3, а гельфильтрацию проводят в 0,01 — 0,05 М натрий-ацетатном буфере, содержащем 0,01 — 0,05 М хлористый натрий, при рН 6,0 — 7,5.

1156692

Составитель Е. Колчина

Техред И. Верес Корректор О. Билак

Тираж 722 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, )K — 35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор Л. Зайцева

Заказ 3218/5

Изобретение относится к биологии, а именно к получению белков крови, касается восстановления биохимических свойств церулоплазмина, и может найти применение в биохимии и медицине для регенерации частично утраченной при хранении активности церулоплазмина.

Цель изобретения — увеличение сроков хранения и повышение степени очистки.

Пример. Операции по регенерации белка проводили при 4 — 5 С. 35 мл раствора церулоплазмина, который хранился до регенерации в течение 6 мес. в стерильных условиях при 4 — 5 С и имел соотношение Рмо/Р тв=

=0043, диализировали против 8 л 0,025 М натрий-ацетатного буфера с рН 5,25. Длительность диализа при постоянном перемешивании — 3 сут. Кристаллический осадок отмывали на центрифуге до значения оптической плотности супернатанта Duhio(0 01 и растворяли в 0,25 М натрий-фосфатном буфере с рН 6,5 до концентрации церулоплазмина 10Я. Раствор церулоплазмина диализировали на магнитной мешалке против

200-кратного избытка 0,03 М натрий-ацетатного буфера с рН 7,1, содержащего 0,03 М хлорида натрия, в течение 2 сут при непрерывном перемешивании. После диализа раствор подвергали гель-фильтрации на колонке с сефадексом Г-200 в указанном буфере и собирали фракции элюата, в которых степень регенерации церулоплазмина составляла 98 — 100gо. Для церулоплазмина, подвергнутого регенерации, соотношение

Duhio/Рив было равно 0,048 — 0,049, а соотно15 шение 1н/1в, измеренное методом ЭПР, составляло 1,6 — 1,9.

Выход регенерированного продукта 60Я.