Способ выращивания средиземноморской мидии

 

СПОСОБ ВЬП А1ЦИВАНИЯ СРЕДИЗЕМНОМОРСКОЙ МВДИИ My tilus edul is g§lloprovincialis, предусматривающий нерест произ.водителей, установку в местах нереста субстратов для оседания личинок и дальнейшее подращивание осевших личинок на .субстратах, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода товарной продукции мидий, перед нерестом осуществляют подбор родительских популяций или особей для скрещивания их по фенотипу эстеразы гепатопанкреаса , при этом подбор проводят так, чтобы получить 50-100% молоди с гетерозиготньм фенотипом. Одрозец

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

А (19) (11) ф(Я) А 01 К 61/00

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

И АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТБУ

Иракец

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ГЮ ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОЧНРЫТИЙ (21) 3642285/28-13 (22) 14.09.83 (46) -15.06.85. Бюл..Ф 22 (72) В.А. Дехта (71) Азовский научно-исследовательский институт рцбного хозяйства

:(53) 639.42.065(088.8) (56) 1. Патент С)ОА У 4080930, кл. А 01 К 61/00, опублик. 1978.

2. Бардач Д., Ритер Д, и Маклар-ни У. Аквакультура, М., "Пищевая . промыпленность", 1978, с. 284-286.

;(54)(57) СПОСОБ ВЫРАЩИВАНИЯ СРЕДИЗЕМНОМОРСКОЙ МИДИИ Nytilus edulis

gyl loprovincial is, предусматривающий нерест производителей, установку в местах нереста субстратов для оседания личинок и дальнейшее подращивание осевших личинок на субстратах, Ф отличающийся тем, что, с целью повышения выхода товарной продукции мидий, перед нерестом осуществляют подбор родительских популяций или особей для скрещивания их по фенотипу эстеразы гепатопанкреаса, при этом подбор проводят так, чтобы получить 50-100Х молоди с гетероэиготным фенотипом.

Ъ 1 1161

Изобретение относится к аквакультуре, а именно к способам выращивания.средиземноморской мидии (Mytilus

edulis ga1loprovincislis) и может быть использовано в мидийных хозяйст. вахе

Известен способ выращивания двустворчатых моллюсков-.мидий, согласно которому молодь, полученную после нереста, выращивают в Искусственных 1п условиях до желаемых размеров, осуществляя кормление ее водорослями, задаваемыми в высоких концентрациях P), Известный способ позволяет ускорить темп роста мидий, однако при этом требуются затраты на получение водорослей, Наиболее близким к предлагаемому

r;o технической сущности и достигаемому результату является способ выра . щивания средиземноморской мидии, предусматривающий нерест производителей, установку в местах нереста субстратов для оседания личинок и даль-.р нейшее подращивание осевших личинок на субстрате. При осуществлении данного способа субстраты а осевшей молодью переносят в условия, наиболее благоприятные для роста мидий (21.

Однако данный способ не обеспечивает селективного повышения таких хозяйственно важных качеств выращиваемых мидий как темп роста и выживаемость выход продукции мидий полЭ

3$ костью зависит от температурных и погодных условий.

Цель изобретения — повышение выхода товарной продукции мидий.

Поставленная цель достигается тем, что согласно способу выращивания средиземноморской мидии (Nytilus edulis яа11оргоч1псхalis), предусматривающему нерест производителей, установку в местах нереста субстратов для осе- 4 дания личинок и дальнейшее подращивание осевших личинок на субстратах, перед нерестом осуществляют подбор родительских популяций или особей для скрещивания их по фенотипу эстераэы гецатопанкреаса, при этом подбор осуществляют так, чтобы получить 50100Х молоди с гетероэиготным фенотином.

На фиг.1.изображены три фенотипа у зстеразного локуса, полученные при электрофорезе эстераз гепатопанкреаса мидий (АА и В — гомозиготы, АВ—

045 2 гетероэиготы); на фиг.2 — рост степени гетерозиготности с увеличением веса мидий (по оси ординат — . гетерозигот, по оси абсцисс — весовые классы, вес. в мг.). Каждый столбец диаграммы показывает Х гетерозигот в соответствуницем весовом классе, на фнг.3 — рост степени гетероэнготности с возрастом мидий, Сущность способа заключается в использовании явления гетерозиса по темпу роста и выживаемости средиземноморской мидии, маркированного зстераэным локусом, Явление гетерозиса обнаружено при исследовании природных популяций средиземноморской мидии населяющей Азовское море. У мидий одного возраста, взятых в Азовском море из Обиточного залина (100 экземпляров, сеголетки), Каэантипского залива (50 экземпляров, 2 r), Железинской Банки (50 экземпляров, 2 r), взвешивали мягкие ткани, а затем выделяли гепатопанкреас. Гепатопанкреас гомогенизировалн с добавлением

40 . раствора сахароэы в соотношении

1:1. Гомогенат центрифугировали. Надосадочную жидкость подвергали дискзлектрофорезу в блоке 10Х полиакриламидного геля (концентрирующий гель

4, рН 6,7, разделяющий гель 10Х, рН

8,7, электродный буферный раствор рН 8,3, ток 25 мА/см ).

По окончании злектрофореза гелевый блок для выявления зон активности неспецифических эстераэ (ферменты, гидролиэующие эфирную связь карбоновых кислот с нафтолом) помещали в ,инкубационную смесь состава 97 мл

0,05 N Трис-НС1 буферного раствора рН 7,1+3 мл 1 -ro раствора И.-нафтилацетата + 100 мг прочного, синего PP соли. Инкубацию проводили в темноте при 37 С до появления коричневого окрашивания в зонах локализации hepмента. В средней зоне полученных Аереграмм обнаружено три феиотипа (фиг.1.). Подвижность компонентов

А и В составляет соответственно 0,67 и 0,63. Образование двух гомоэнготных (АА и ВВ) и одного гетерозиготного (АВ) фенотипов контролируется по типу однолокусной диаллельной системы.

Весовые значения мягких тканей мидий ранжировали и разбили на 4-5 классов в каждой выборке. Получили кривые

1распределеиия веса тканей в выборках, которые подчиняются нормальному зако»

1161045

АА х ВВ = 100X (Ав?, где AA и В — гомоэиготные;

AS — гетерозиготный фенотип эстеразного локуса..ну. Затем анализировали степень гетероэиготности по эстеразному локусу в каждом весовом классе. Обнаружено четкое повышение гетерозиготности с увеличением веса тканей мидий во 5 всех выборках (фиг.2). Коэффициенты корреляции для выборок иэ Обиточного залива, Казантипского залива, Железинской банки соответственно составляет 0,99 (р = О,ООl) 0,90 (р =

0,01) и 0,86 (р.= 0,01). Расчет средневзвешенных весовых значений показал, что вес мягких тканей у мидий с гетерозиготным фенотнпом

-выше у сеголеток на 20,5Х, а у двух- 15 леток на 10Х, чем у мидий с гомозиготными фенотипами; Сопоставление долей гетерозиготных фенотипов у разновозрастных мидий показало достоверные их различия. У более 20 взрослых мидий доля гетерозигот выше, чем у молодых форм. Различия в доле гетерозиготных фенотипов эстеразного локуса у мидии Азовского моря составляет от 28Х для двухлетнего 25 до 52% для четырехлетнего возраста (фиг.З).

Увеличение доли гетерозигот с возрастом соответствуеу их большей выживаемости (на ЗОХ), чем мидий с гомозиготными фенотипами. Кроме того, исследования природных популяций а также выборок, взятых с корреляторов мидийного хозяйства, показали, что доля гетерозиготных фенотнпов у молоди мидий не превышает 30%.

Приведенные результаты исследования природных популяций средиземноморской мидии, населяющих Азовское море, свидетельствуют о том, что ми- 4, дии с гетерозиготным фенотипом по эстераэному локусу (АВ} обладают более высоким темпом роста (на lO а их выживаемость на ЗОХ больше, чем мидии с гемоэиготными фенотипами

АА и ВВ).

Способ осуществляют следующим образом.

Молодь мидий с долей гетерозиготHblx фенотипов эстеразного локуса 50% 50 получают путем подбора природных . популяций для скрещивания из разных . мест обитания. Генетический контроль при.подборе популяций и получаемого потомства осуществляют методом диск- М ,электрофореза в 10% полиакриламидного геля эстераз гепатопанкреаса. Расчет ожидаемого соотношения фенотнпов у получаемой молоди производят с помощью уравнения Харди-Вайнберга, согласно которому при обозначении частоты аллелей эстеразного локуса в популяции мидий А и В через р и к соответственно, первое поколение молоди от этой популяции имеет следующее сочетание фенотипов р2 (АА) + 2 (АВ) + к (ВВ).

Частоты аллелей выражаются в долях единицы, при этом сумма частот равна единице. Для вычисления частоты аллеля к числу особей гомозиготных по данному аллелю прибавляют 1/2 числа гетерозиготных фенотипов и полученную сумму делят на объем выборки.

При выборке 100 мидий со следующим соотношением фенотипов 5 (АА) + 10 (АВ)

+ 85 (ВВ), частота аллеля А будет

P(A) (5+10:2)/100 0,1 и для другого аллеля 1((В) = (85+10:2)/100 =

= 0 9. Соотношение фенотипов в первом поколении при скрещивании внутри популяции, используя уравнение ХардиВайнберга, имеет следующий вид

0,01 (AA) + 0,18 (АВ) + 0,81 (ВВ), 1% (АА) + 18X (АВ) + 81X (ВВ).

Подбор популяций проводят так, чтобы у вновь образованной родительской популяции соотношение частот аллелей было равно i:I или близкое к нему. Такое соотношение аллелей в родительской лопуляции необходимо для получения 50Х особей мидий с гетерозиготным фенотипом. Это вытекает из уравнения Харди-.Вайнберга, иэ которого доля гетерозигот в одном поколении равна удвоенному произведению частот аллелей (2 p% ) . .Следовательно, если в результате подбора популяций получают значения частот аллелей р (А) и Ъ (В) равные 0,5 и 0,5 соответственно, то доля гетерозигот у получаемой молоди мидий равна 2 х 0 5 х 0,5 0 5 или 50Х.

Иолодь,мидий с 100Х гетерозиготностью по эстеразному локусу полу-. чают путем подбора родительских пар для скрещивания, используя закон расщепления признаков Г. Иенпеля.

При этом руководствуются следующей схемой скрещивания

Пример 1. Предварительно исследуют природные популяции с целью обнаружения необходимых сочетаний в них фенотипов и частот аллелей эстеразного локуса. Для этого в раз- 5 личных местах обитания отбирают мидий не менее 100 экземпляров в каждой выборке. У мидий выделяют гепатопанкреас, гомогенизируют его с добавлением 40% раствора сахарозы в соотношении 1: 1, гомогенат центрифугируют. Надосадочную жидкость подвергают электрофорезу.в 107 полиакриламидном геле (концентрирующий гель 47, рН 6,7; разделяющий. гель

107, рН 8,7; электродный буфер рН 8,3 ток 25 мА/с ). По окончании электрофореза гелевый блок для выявления эстеразной активности помещают в ин-.. .убационную смесь следующего соста- @ ва: 97 мл. 0,05 И Тряс-НС1 буфера рН 7,1-3 мл 1%-ного раствора o(-нафтилацетата + 100 мг прочного синего

РР соли. После окрашивания фореграмм анализируют соотношение гомозиготных и гетерозиготных фенотиков и частоты аллелей в каждой выборке. Обнаружена следующее соотношение фенотипов

5 (AA) + 10 (AB) + 85 (8B) с частотами аллелей р(А) = 0,1, k (В) = 0,9. ЗО

Доля гетерозигот в первом поколении от этой популяции составляет. 18Х (из уравнения Харди-Вайнберга доля гетерозигот равна удвоенному произведению частот аллелей, 2 р1 ), Анализз других мест обитания мидий показал, что существует популяция с соотношением фенотипов (64 (AA)+32(АВ)+4(ВВ) и частотами аллелей р (А) = 0,8, 4 (В) = 0,2. Рассчитывают доли фено- 4в типов, которые получаются при скрещивании равных долей двух популяций мидий. В результате смешения двух равных долей популяций мидий для скрещивания доли фенотипов составляет 34,5(АА) + 21(АВ) + 44,5(ВВ), а частоты аллелей р (А) = 0,45 и 1 (В)

= 0 55, что показывает простой расчет средних. Из уравнения ХардиВайнберга (tI + 2р + g ) рассчиты- у вают соотношение фенотипов у молоди

Ф в первом поколении, оно равно

20(АА) + 49(АЗ) + 31(ВВ). Таким образом, в результате подбора популяций для скрещивания можно увеличить долю получаемой молоди мидий с гетерозиготным фенотипом эстеразного локуса с 18 до 49%. Для этого с помощью мидийной драги производят отлов мидий донорской популяции с частотами аллелей р(А) = 0,8 и

1 (В) = 0,2. Выловленных мидий распределяют равномерно в соотношении

1:1 среди популяции, обитающей в районе хозяйства. Отлов и подселение донорской популяции проводят до наступления массового нереста мидий, в это же время устанавливают субстраты, на которых происходит оседание молоди. После нереста и оседания миций полученный шпат (осевшая молодь) содержал 49-50% мидий с гетерозигoTHbIM фенотипом эстеразного локуса. Параллельно проводилось наблюдение за контрольной группой мидий из популяции, обитающей в районе хозяйства.

Сравнение результатов выращивания двух групп мидий по 1000 экземпляров в каждой группе показало, что в первой группе (контроль) доля гетерозигот составляет 18%, во второй 507..

Так как естественная смертность выращиваемых мидий зависит от условиИ окружающей среды, то эффективность применения предложенного способа различна.

Данные по выращиванию этих групп приведены в табл.1.

Вследствие того, что выживаемость гетерозиготных фенотипов на 30% выше, а их темп роста на 20Х больше, чем у мидий с гомознготными .фенотипами, по окончании выращивания получают соответственно и долю мидий с гетерозиготными фенотипами больше на 307., а средний вес особей с гетерозиготными фенотипами больше на 207, чем гомозиготкых особей.

Из табл.1 видно, что в благоприятных условиях выращивания (выживаемость гетерозигот 100%, гомозигот 707), выход товарной мидии на 21Х больше при увеличении доли гетерозигот с 18% до 507..

В табл. 2 приведены данные по выращиванию таких же двух групп мидий по 1000 экземпляров в каждой.

Как видно из табл. 2 в случае снижения выживаемости выращиваемых мидий (гетерозигот 507., гомозигот 20%), что является следствием неблагоприятных условий,. эффективность предложенного способа выращивания возрастает до 47%.

1161045

Таким образом, повышение гетерозиготности по эстеразному локусу мидий с 18 до 50Х позволяет увеличить выход товарной мидии в эавИсимости от условий среды на 21-477.

Пример 2. Получение 100% молоди мидий с гетерозиготным фенотипом эстеразного локуса (АВ) начинают с выращивания г6мозиготных линий (АА) и (ВВ). Для этого каждую пару 10 половозрелых мидий (самец + самка) высаживают в отдельные садки, где происходит их нерест и оседание молоди на субстратах. После получения молоди родительские особи. анали- 15 эируют с помощью диск-электрофореза ,эстераз гепатопанкреаса в 10% полиакриламидного геле (по примеру 1).

Анализ показал, что при скрещивании в садках возникают следующие сочетания родительских пар по фенотипу зстеразы АА х BS; АА х АВ; ВВ х АВ;

AS х АВ; АА х АА; ВВ х ВБ. Соотношения фенотипов у полученной молоди от этих сочетаний в соответствии с законом расщепления признаков Менделя будут

1. AA х ВВ = 100X. АВ

2. АА х АВ - "50X АА + 50X АВ

3. ВВ х АВ = SOX ВВ + 50X АВ 30

4. АВ х АВ = 25X АА + 507. АВ+ 25Х ВВ

5. АА х АА = 100% АА

6. ВВ х ВВ = 100X ВВ

Молодь мидий, полученную в садках от скрещивания по вариантам 1-4, вы- 3 ращивают до желаемого размера и реализуют. В садках с вариантами 5 и 6 получены гомозиготные линии мидий (AA) и (ВВ). Мидии гомозиготных линий с наступлением у них половой зрелос-. 4р ти используют для получения молоди с долей гетерозиготных фенотипов

100Х. Для этого подбирают родительские особи по следующей схеме

1. Самки (АА) х самцы (ВВ)

100% АВ

2. Самцы (AA) х самки (ВВ) — 100% АВ

Подобранные таким образом родительские особи помещают в садки, где происходи их нерест и оседание молоди на субстратах. Затем осевшую молодь выращивают до желаемого размера.

Для сравнения результатов выращиьали две группы мидий по 1000 экземпляров в каждой. В первой группе доля гетерозигот составляет

18Х, во второй tOOX.

В табл. 3 приведены результаты чыращивания при условии выживаемости мидий с. гетерозиготными фенотипами

100%, с гомоэиготнымн 70% (с учетом того факта, что выживаемость гетерозиготных фенотипов на 30% выше, а их темп роста на 20Х выше, чем у мидий с гомозиготным фенотипом).

В табл. 4 приведены результаты выращивания таких же двух групп мидий по 1000 экземпляров в каждой, но при выживаемости гетерозиготных особей 5%, а гомозиготных — 207.

Из табл. 3 и 4 следует, что увеличение доли гетерозиготных фенотипов у мидий с 18 до 100Х позволяет повысить эффективность их выращивания на 50-120Х. Различия в эффективности выращивания зависят от условий выращивания, т.е. от смертности мидий в процессе их роста на субстратах.

Применение предложенного способа выращивания, направленного на подбор популяций и отдельных особей мидий для скрещивания позволяет увеличить долю гетерозигот эстеразного локуса до 50-100Х которые обладают большим . темпом роста на 20Х, а выживаемость

\ их на ЗОХ вьппе, чем у гомоэигот. Чем хуже условия, в которые попадает выращиваемая мидия, чем выше эффективность предъявляемого способа. Таким образом, повышение гетерозиготности выращиваемых мидий íà 50-100% обеспечивает увеличение продуктивности при промьппленном выращивании мидий на мидийных хозяйствах 20-120Х или в оеднем на 707.. г

Экономический .эффект от применения предложенного способа составляет

11200 руб. в r. с t га.

116104

Таблица 1

Конец выращивания

Группа ачало выращивания

Выход, Х

Общий вес

Число мидий с фенотипом

Средний вес одной мидии с фенотипом

AA Вв

АВ, 1

АА, ВВ

АВ

AA ВВ

АВ

1 18Х (AS) 820

1,2

180

2 50Х (АВ) 1,2 г

500

500

Т аблица 2

Группа

Начало выращивания

Конец выращивания исло мидий фенотипов

Число мидий с фенотипом

Общий вес

Выход, Х

АВ АА,ВВ

АА,ВВ

180 820

500 500

Таблица 3

Группа чало выращивания

Выход, Х

Общ вес сло мидий с фенотипом

АВ AA,В

18Х (АВ) 180 820

l2

100Х (АВ1

1000 нет

У 1

18Х (АВ)

Р 2

50Х (АВ) испо мидий с фенотипом

1 r 180 570 786 г 100Х

1 г 500 350 950 г 121Х

Средний вес одной мидии с фенотипом

АВ AA ВВ

1,2 г 1 г 90 164 272 г 100Х

1,2 r 1 r 250 100 400 r 147Х

Конец выращивания исло мидий фенотипом

АВ АА,В

Средний вес одной мидии с фе-, нотипом

АВ АА,ВВ

1,2 r 1 г 180 570 786 r 100Х

1,2 г нет 1000 нет 1200 r 153Х

1161045 таблица 4

Группа . ачало выращивания

Конец выращивания

АВ АА,ВВ

АА „ВВ

АА1в

1,2 r 1 r 90 164 272 г 100Х

180

820

100Х АВ .1000

1,2 r нет 500 нет 600 г 220Х нет

18Х АВ исло мидий с фенотипом

Средний вес о ной мидии с ф нотипом сло мидий Общий фенотипом вес

ыход, Х

Дрие. 3 .Составитель С. Филиппова

Редактор Н. Воловик Техред Т.фанта КорректорМ. Демчик

Заказ 3874/б Тираж 743 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

1)3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород,,ул. Проектная, 4

Способ выращивания средиземноморской мидии Способ выращивания средиземноморской мидии Способ выращивания средиземноморской мидии Способ выращивания средиземноморской мидии Способ выращивания средиземноморской мидии Способ выращивания средиземноморской мидии Способ выращивания средиземноморской мидии Способ выращивания средиземноморской мидии 

 

Похожие патенты:

Изобретение относится к рыбоводству, в частности к способам получения гибридов рыб

Изобретение относится к области охраны окружающей среды, а именно к способам экологического контроля водных сред разного целевого назначения с помощью биотестирования

Изобретение относится к рыбоводству и может быть использовано в рыбной промышленности для создания необходимых условий обитания рыбы: физико-химического, гидрологического режимов и естественной кормовой базы, что позволяет увеличить продуктивность существующих рыбных водоемов

Изобретение относится к рыбоводству и может быть использовано для лечения отравлений рыб токсикантами, загрязняющими водную среду

Изобретение относится к рыболовству, а именно к устройствам для разведения раков

Изобретение относится к способам повышения выживаемости и жизнеспособности личинок и молоди рыб и рыбообразных в условиях воздействия стрессорных факторов, возникающих в процессе пересадки, сортировки, транспортировки рыб, а также при воздействии некоторых токсикантов, загрязняющих водную среду, и может быть использовано в рыбоводстве

Изобретение относится к рыбоводству, а именно к способам разведения раков

 

Наверх