Питательная среда для культивирования бифидобактерий штамма @ @ n 1

 

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БИФИДОБАКТЕРИЙ ШТАММА BACTERIUM BIFIDUM № 1, содержащая источник азотистых соединений, соевый экстракт , сернокислое железо, хлористый натрий, лактозуS агар-агар, отлича.нгщаяся тем, что, с целью повышения выживаемости бифидобактерий в качестве источника азотистых соединений используют ферментативный гидролизат лошадиного сывороточного альбумина с содержанием амннного азота 160-700 мг) при следующем содержании компонентов , мас.%: Сернокислое железо 0,0002-0,001 0,4-0,6 Хлористый натрий . соевый 3,0-7,0 экстракт 0,8-t,2 Лактоза W 0,075тО,1 Агар-агар с Ферментативный гидролизат лошадиного сьюороточного Остальное альбумина О) со 00

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (!9) (11> (51)4 С- 12 N 1/20, С 12 R 1:01 -:р

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ (54) (57) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ

КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БИФИДОБАКТЕРИЙ

ШТАММА BACTERIUM BIFIDUM У содержащая источник азотистых

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ll0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЦТИЙ

Н ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТБУ (21) 3600085/28-13 (22) 03.06.83 (46) 15.07.85. Бюл. Ó 26 (72) Н.П. Ефимова, А.М. Ивакина, Г.Д. Борискина, Л.А. Пределина и В.А. Несчисляев (71) Пермский ордена Трудового

Красного Знамени научно-исследовательский институт вакцин и сывороток (53) 577. 15(088.8) (56) Гончарова Г.И. К методике культивирования Bacterium bifidum. — :.

"Лабораторное дело", 1968, В 2, с. 100-102.

Регламент производства бифидумбактерина сухого 1214-81. соединений, 10Х-ный соевый экстракт, сернакислое железо, хлористый натрий, лактозу, агар-агар, отличающаяся . тем, что, с целью повышения выживаемости бифндобактерий,-в качестве источника азатистьы соединений используют ферментативиый гидролизат лошадиного сывороточного альбумина с содержанием аминнаго азота 160-700MrX при следующем содержании компонентов, мас.X:

Сернокислое железо 0,0002-0,001

Хлористый натрий . О;4-0,6

1ОХ-ный соевый экстракт 3,0-7,0

Лактоза 0,8-1,2

Агар-агар 0,075-.0,1

Ферментативный гидролизат лошадиного сывороточного альбумина .Остальное

1167198

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для производства препарата — бифидумбактерина.

Цель изобретения — повышение вы живаемости бифидобактерий.

Сущность изобретения заключается в следующем.

Питательная среда включает сернокислое железо, хлориотый натрий, 10 лактозу, соевый экстракт и агарагар и содержит в качестве источника азотистых соединений гидролизат сывороточного а ьбумина при следующем содержании компонентов 15 на 1 л среды, вес.Х:

Железо сернокислое 0,0002-0,001

Натрий хлористый 0,4-0,6

10Х-ный соевый экстракт 3,0-7,0 20

Лактоза 0,8-1,2

Агар-агар 0,075-0,1

Альбуминовый гидролизат с содержанием аминного азота 160-200 мгХ Остальное 25

Известно, что сывороточный альбумин содержит значительное количество цистеина, что позволяет отказаться от введения данного компонента в состав альбуминовой среды и исполь- З0 зовать в качестве активатора ферментативной активности бифидобактерий более дешевый компонент — сернокислое железо. Соевый экстракт, получаемый . из кормового соевого шрота, содержит витамины группы В и используется в ка-.честве витаминной добавки.

Приготовление альбуминового гидролизата.

На 1 л альбуминовой фракции бел- 40 ков лошадиной сыворотки, получаемой после высаливания глобулинов, добавляют 220 г сернокислого. аммония и тщательно перемешивают до полного рарастворения соли. Полученный раствор 45 фильтруют через фильтровальные кассеты в мешках из технического волокна.

Осадок альбуминов в мешках помещают под механический пресс для более полного удаления иэ него смачиваю- . 50 щей жидкости. Степень отпрессовки альбуминов является достаточной, "е когда осадок белка, приобретает желтовато-оранжевый цвет и становится ломким. Отпрессованный альбумин . 55 счищают с мешков и хранят при 4 С не

0, более 30 дней. Сухой альбумин закладывают в вискоэные гильзы по 80

100 r в каждую, помещают в диализационные ванны с проточной водопроводной водой (температура воды +5-10 С).

Диализ длится 20-24 ч до достижения

О,ЗХ-ной концентрации сульфата аммония в растворе.

Содержание белка в диалиэате составляет 13-16Х. Диализат разводят дистиллированной водой до 5Х содержания альбумина.,Добавляют панкреатин

10 г на 1 л, хлороформ 20-30 мл на

1 л.

Гидролиз ведут в течение 40-48 ч при 450С с периодическим перемешиванием до прекращения нарастания аминного азота. В процессе гидролиза

РН поддерживают на уровне 8,0-8,5, добавляя 20Х-ный раствор NaOH. При " прекращении. нарастания аминного азота (420-600 мгХ) гидролизат декантируют, устанавливают с помощью трихлоруксусной. кислоты РН 4,7, кипятят 10 мин, фильтруют через миткаль. В готовом гидролизате устанавливают РН 7,0 с помощью

20Х-ного раствора NaOH и стерилизуют при 110. С 30 мин.

Пример 1. Альбуминовый гидролиэат разводят до содержания аминного азота 160 мгХ дистиллированной водой, С помощью 20Х-ного раствора

Na0H устанавливают РН 7,6.К 800 мп гидролизата добавляют 0,002 г сернокислого железа, 4 r хлористого натрия, 0,75 r агар-агара.

Кипятят 10 мин и добавляют 8 г лактозы н 30 г 10Х-ного соевого экстракта. Объем среды доводят до.

1.л добавлением альбуминового.гидролиэата с таким же содержанием аминного азота (160 мгХ). Среду стерио лизуют при 110 С в течение 30 мин.

П р и м е. р 2. Альбуминовый гидролизат разводят до содержания аминного азота 180 мгХ дистиллированной водой. Устанавливают РН

7,8 с помощью 20Х-ного раствора NaOH.:

К 800 мл .гидролиэата добавляют

0,005 r сернокислого железа, 5 r хлористого натрия 0,8 г агар-агара.

Кипятят 15 мин и добавляют 10 r . лактозы и 50 г 10Х-ного соевого экстракта. Объем среды доводят до

1 л добавлением альбуминового гидролизата с содержанием аминного азота

280 мгХ. Среду стерилиэуют при 110 С в течение 30 мин, Количество выросших колоний бифидобактерий до и после лиофильной сушки в зависимости от лрименяемой

10 среды представлено в таблице.

Количество колоний в разведениях

Среда.

Суспензия

1 о

Сухой препарат

10 10 10 10 . 10

1+1 18+2

1+1 14+2

Альбуминовая

5+1

1+1

5+1

18+2

Блаурокка (контроль) 1+1

5+1

5+1

15+1

Составитель В. Голимбет

Техред М. Герг ель Корректор В. Синицкая

Редактор М. Товтин

Заказ 4389/27 Тираж 525 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r, Yaropop ул. Проектная, 4

1167198 4

Пример 3. Альбуминовый гид" зкстракта. Объем среды доводят до ролизат разводят до содержания 1 л добавлением альбуминового.гидаминного азота 200 мг дистиллиро- ролизата (аминный азвт 200 мгХ). ванной водой. С помощью 20 -ного Среду стерилизуют при 100 С в течео раствора NaOH устанавливают, рН 7,8. ние 30 мин.

К 800 мл гидролизата добавляют

0,01 г сернокислого железа1 6 r хлористого натрия, 1,0 г агар-агара.

Кипятят 10 мин и добавляют 12 г . лактозы и 70 г 10 -ного соевого

Питательная среда для культивирования бифидобактерий штамма @ @ n 1 Питательная среда для культивирования бифидобактерий штамма @ @ n 1 Питательная среда для культивирования бифидобактерий штамма @ @ n 1 

 

Похожие патенты:

 

Наверх