Способ идентификации @ @
СПЬСОВ ВДЕНТИФИКАЦИИ IERSINIA PSEUDOTUBERCULOSIS путем посева исследуемой культуры на питательную среду с последующим инкубированием при и учетом вьфосших колоний, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения его точности, исследуемую культуру параллельно инкубируют при 18-26 С, при этом оба посева осуществляют на питательную среду, содержащую, г/л: Сердечно-мозговая 30-40 основа 0,5-1,5 Глюкоза 10-20 Агар-агар Дистиллированная Остальное вода при рН /,1-7,3, затем с выросшими Q € культурами проводят реакцию агглютинации эритроцитов барана в присут Л ствии 0,5-1,5% D-маннозы и идентифициру т lersinia pseudotuberculosis при наличии роста при 37 С и агглютинации эритроцитов.
СОЮЗ СО8ЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
„„SU„„A (51)4 С 12 0 1/04 С 12 R 1/Ol
g(.l ° 1
c . (\
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР
flO ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (2 1) 3744747/28-13 (22) 24.05.84 (46) 23. 11.85. Бюл. 9 43 (71) Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский. противочумный институт (72) С.О.Водопьянов, А.В,Родионова и Б.Н.Мишанькин
1 (53) 576. 8. 093. 1 (088. 8) (56) Авторское свидетельство СССР
У 988865, кл. С 12 N 1/00, 1981.
Методические рекомендации по лабораторной диагностике кишечного иерсиниоза. Иркутск, 1979, с ° 21. (54)(57) СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ EEKSINIA PSEUDOTUBERCULOSIS путем посева исследуемой культуры на питательную среду с последующим инкубио рованием при 37 С и учетом выросших колоний, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения его точности, исследуемую культуру параллельно инкубируют при 18-26 С, при этом оба посева
0 осуществляют на питательную среду, с оде рж ащую, г/л: с
Сердечно-мозговая основа 30-40
Глюкоза 0,5-1,5
Агар-агар 10-20
Дистиллированная вода Остальное при рН,, t-7,3, затем с выросшими
С культурами проводят реакцию агглюти- Е нации эритроцитов барана в присутствии 0,5-1,5X D-маннозы и идентифицирууют Iersinia pseudotuberculosis С о при наличии роста при 37 С и агглютинации эритроцитов.
Составитель Г.Смирнова
Техред О.Ващишина Корректор М Демчик
Редактор Н.Яцола
Заказ 7232/27 Тираж 524 Подписное
ВНЙИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4
Изобретение относится к медицинс- . кой микробиологии и касается идентификации Iersinia pseudotuberculos1sе
Цель изобретения — упрощение и
l повышение точности способа.
Пример 1. Клетки I.pseudotuberculosis штамм 43/III и I .entегоcolitica штамм 10702 засевают петлей на секторы двух чашек с сердечно-мозговым агаром, содержащим, r/ìë: сердечно-мозговая основа 30, глюкоза 0 5, агар-агар 10, дистиллированная вода остальное, рН 7,1.
Одну чашку инкубируют при 37 С, другую при 18 С. Через 18 ч.культивирования ставят реакцию гемагглютинации. На дно чашки Петри для предотвращения растекания восковым карандашом наносят несколько взаимопересекающихся штрихов. Пипеткой вносят 1-2 капли 37-ной взвеси эритроцитов барана, содержащей 0,57 Р-маннозы. В капле эритроцитов осторожно растирают петлю исследуемой культуры. Чашку осторожно покачивают. Положительный результат — наличие маннозореэистентного температурно-зависимого гемагглютинина — характеризуется появлением через 30-60 с хлопьев склеенных эритроцитов. При отрицательном результате взвесь остается гомогенной.
Клетки I.pseudotuberculosis образуют манноэорезистентный гемагглютио нин только после выращивания при 37 С.
Клетки I.entегоcolitica подобного склеивания эритроцитов не вызывают:
Пример 2. Клетки I.pseudotuberculosis 43/III u I. entегоcolitica 10702 штрихом засевают на сектора двух чашек с сердечно-мозговым
93170 2 агаром, содержащим, г/л: сердечномозговая основа 35, глюкоза 1, агарагар 15, дистиллированная вода остальное, рН 7,2. Одну чашку инкубио руют при 22 С, другую при 37 С.
Реакцию агглютинации эритроцитов барана ставят в присутствии 1ХВ -манноэы. Далее опыт проводят как в примере 1.
10 Пример 3. Клетки I.pseudotuberculosis 43/III u I. entегоcolitica 10702 штрихом засевают на сектора двух чашек с сердечно-мозговым агаром, состава, г/л: сердечно-моз-
15 говая основа 40, глюкоза 1,5, агарагар 20, дистиллированная вода остальное, рН 7,3. Одну чашку инкубируют при 26 С, другую при 37 С. Реакцию агглютинации эритроцитов бара20 на ставят в присутствии 1,57 Э-маннозы. Далее опыт проводят как в примере 1. При исследовании набора 66 штаммов псевдотуберкулезного микроба
1-71 серотипов и 76 штаммов возбуди25 теля кишечного иерсиниоза различного происхождения и давности выделения обнаружено, что все исследованные клетки I.pseudotuberculosis образуют температурно-зависимый маннозорезис30 тентный гемагглютинин (вызывают склеивание эритроцитов после культи о вирования только при 37 С, но не при
18-26 С), 76 штаммов возбудителя .кишечного иерсиниоза не образовывают гемагглютинина ни при одной иэ температур культивирования.
По сравнению с известным предлагаемый способ не требует использова-, ния тест-культуры и антибиотиков, 40 присутствие последних в среде приводит к получению ложноположительных результатов.
