Способ приготовления диагностических типоспецифических противоботулинических сывороток типов а,в,с,е

 

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДИТВЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистииеских

Распублик (1ц 128568 (61) Дополнительное к авт. сана-ву (22) Заявлеио01.06.59 (21) 629603/31-16 с прнсоединеннеи заявки Ит— (23) Приоритет (43) Опубликовано 15,09 78.Бюллетень %34 (45) Дата опубликования опнсання04.08.78

2 (51) М. Кл.

А 61 К 35/16

Гееудеретеенный немктет

Совете Мкнкетрее СССР ее делам нэебретеннк н еткрмтнй (53) УДК 615.373 (088. 8) (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ

ТИПССПЕПИФИЧЕСКИХ ПРОТИВОБОТУЛИНИЧЕСКИХ

СЫВОРОТОК ТИПОВ А, В» Е.

Изобретение относится к способам пркготовпения диагностических типоспецифических противоботулинических сывороток типов А, В, С, Е путем иммунизации пошадей.

Предлагаемый способ отличается от известного тем, что, с цепью повышения специфичности сывороток, подбирают пошадей, имеющих в сыворотке крови не более одного типа противоботупинического антитоксина, и иммуниэируют их проверенным на специфичность анатоксином, попученным из высокотоксигенного штамма СС.BotuK4DUs при 35 С на пепсинпептонном бульоне или рыбо-кукурузной среде (для типов А и В), на бульоне

Хоттингера или среде иэ кислотного гидропиэата каэеина с добавлением кукурузного:экстракта (для типа С) и при 28 С на бульоне Хоттингера и рыбо-казеиновой среде (дпя типа Е) °

Лошади, в сыворотке крови которых содержится несколько типов естественных ботулинических антитоксинов, не могут быть использованы дпя иммунизации с пелно получения указанных сывороток.

Ботунинические анатоксины типов А о и В готовят при 35 С из токсинов, понученных как на пенсии-пептонном бульоне, так и на рыбо-кукурузной среде, имеюшей B своей основе сопянокиспотный гидролиэат рыбной и кукурузной муки.

Рыбо-кукурузная среда имеет спедующ щий химический состав, мг:

Обший азот 300-400

Белковый азот 100-15 0

Аминный азот 80-120

На этих средах получают ботупиничес1е кие токсины типа А активностью 2000001000000 ед/мл дпя белых мышей, типа В-500000-1000000 ед/мп из которых попучаются высокоиммуногенные анатоксины с антитоксиннсь-свяэываюшей споза собностью 0,01-0,003 мл.

Ботулинические анатоксины типа С готовят при температуре 35 С как на бупт оне Хоттингера, так и на среде из киспотного гидропизата казеина с добавпеИ нием в качестве источника факторов роо1285

Способ приготовления диагностических типоспецифических противоботулинических сывороток типов А В, С, Е путем иммунизации лошадей, о т л и ч аю ш и и с я тем, что, с цепью повыше25 ния специфичности, подбирают лошадей, имеющих в сыворотке крови не более одного гипа прогивобогулинического антигоксина, и иммунизируюг их проверенным на специфичносгь анагоксином, полученным из высокогоксигенно о шгамма

СС.5otutinus при 35 С на пепсинпептонном бульоне или рыбр-кукурузной среде (для гипов А и B), на бульоне

35 Хоггингера или среде из кислотного гидролизага казеина с добавлением кукурузо ного экстракта (для гипа С) и при 28 С на бульоне Хоггингера и рыбо-казеиновой среде (для гипа Е).

40 та 3% кукурузного экстракта Казеиновая среда должна иметь следующий химичес кий состав, мг:

Обтий азот 230-300

Белковый азот 130-180

Аминный аз от 90-120

Токсины, полученные на этой среде, имеюг активность 500000-1 000000 ед/мл на среде Хоггингера 10000-200000 ед/мл для мышей, из которых получаюгся высо- 1О коиммуногенные анагоксины с ангигоксиносвязуюшей способность 0,01-0,003 мл.

Ботулинические анатоксины типа Е о готовят при температуре 28 С на бульоне

Хоттингера и на рыбо-казеиновой среде, включающей смесь кислотного гидролизата рыбной муки с кислотным гидролизатом казеина, В качестве источника факт ров роста добавляют 3% кукурузного экстракта, Рыбо-казеиновая среда должна иметь следующий сосгав, мг:

Общий азот 1 50-230

Белковый азот 35-60

Аминный азот 7 0- 1 30

На этих средах сила токсина типа E равна от 50000 до 150000 ед/мл дпя мышей.

Токсин перед обезвреживанием обязательно проверяется на специфичность путем посгановки реакции нейтрализации.

К 5-7-суточным фильграгам, культур добавляют 8% формапина. Сбезвреживание о продолжается при температуре 38 С от трех до четырех недель, в зависимости л от типа обезвреживаемого токсина.

Проверку стерильности антигена производят, согласно инструкции, по проверке бакпрепаратов. Антиген высеивают на среду Тароцци полужидкий агар, 68 4 сахарный бульон, косой агар и среду

Сабуро, Высевы выдерживаются в термостате на первых двух средах 21 день, на остальных средах 7-8 дней.

Иммуногенные свойства проверяются на пяти морских свинках, каждой из которых вводится 5 мл антигена. Через четыре недели всем морским свинкам вводигся под кожу 100едсоогвегсгвующего гоксина. Токсин типа Е вводится в дозе до 30 ед. Антиген счи гае гс я имеющим удовлетворительные иммуногенные свойства, еспи более 50/о морских свинок остаются здоровыми, Проверенные на сгерильносгь, безвредность и иммуногенные свойства анатоксины пригодны для иммунизации лошадей.

Формула изобретения

Редактор Е, Месропова Техред Е. Давидович Корректор Л, Веселовская

Заказ 5225/50 Тираж 703 Подписное

UHHHFIH Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5 филиал ППП "Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4