Способ культивирования лямблий

 

№ 128571

Класс ЗОЬ, 14

СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

А. Е. Карапетян

СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЛЯМБЛИЙ

Заявлено 30 октября 1959 г. за ¹ 642717/31 в Комитет ио делам изобретений и огкрытий ири Сонет з1иниегро13 СССР

Оиублнковано в;:1>к?ллетсие изобретений» № 10 за 1960 г.

Пред я Га)ется I)01 06 км. ьтl1в)1 ровя1111 я:!я ъ! о, l ни, oT, 1!1»! я юlци 1 1ся тем что их ЗЯсевают и цеl!Трифу! иру!0T вмг cTP. с д!)о?кжепо 1обными Грибкамн рода Candida в недельную культуру куриных фиброплястов, содержащую пенициллин и стрептомнцин, Способ осуществляется следующим образом. Содерж!!мое двенадц;1типерстной кишки (дуоденальное содержимое). взятое у больных, не лсечившихся акрихином, разводят равным объемом солевого раствора н центрифугируют при 600 — 1000 обг.!1ин в течение 10 лтн, отсясыва îT надосадочную жидкость, к осадку добавляют 2 — 3 !1.1 культуральной жидкости из флаконов, где культивируются куриные фибропласты. Oc Iдок взбалтывают и снова центрифу,ируют, повторяя эту операцию еще

2 раза.

После последнего центрифугирования снова добавляют 2 — 3 лгл культуральной жидкости, осадок тщательно разбивак:т и засевают по

0,5 — 1 лг.г в инсулиновые флаконы с культурой куриных фибропластоз, выращенных на среде № 2, после чего в среду на кончике скальпеля вносят немного пенициллина и стрептомицина.

Флаконы плотно закрывают резиновыми пробками и укладыва!от в наклонном (5 — 7 к горизонтали) положении. Культивирование ведут в термостатах при 37 .

В состав среды № 2, на которой выращивают куриные фиброплясгы, входят: 20% фильтрованной человеческой сыворотки, 5% куриного эмбрионального экстракта, 25% бульона Хоттингера и 50% солевого рас! вора Эрла. Реакцию питательной среды устанавливают путем пропус. кания углекислоты в пределах рН 7,4 — 7,6.

На второй день после посева во флаконы с культурой лямблий добавляют по 1 лгл питательной среды, В дальнейшем заменяют лишь половину культуряльной жидкости.

Смену фазы производят ежедневно. Оптимальной реакцией питательно i среды для выращивания лямблий является рН 7,2 — 7,4. № 128571

Предмет изобретени «I

Способ культивирования лямблий, отличающийся тем, что, с целью облегчения IIx исследования, лямблии центрифугируют и засеваюг вместе с дрожжеподобными грибками рода Сапс1Ыа в культуру куриных фибропластов, в которую добавляют затем пенициллин и стрептомицин.

Комитет по дел м изобретений н открытий при Совете Министров СССР

Редактор А. К. Лейкина Гр. 139

Поди. к печ. 28.1г -60 г.

Тираж 700 Цена 25 коп.

Информационно-издательски1i отдел.

Объем 0,17 п, л. Лак. 3690

Типография Комитета по делам изобретений и открытий прн Совете Министров СССР

Москва, Петровка, 14.

Через 4 — 5 дней, одновременно с дрожжеподобными грибками начинают размножаться лямблии: среди фибропластов появляются попарно р асположенные пар азиты.

Пересевы производят в культурах со сплошным ростом, когда количество лямо 1ИЙ В 1 Я.1 еу.1ьтуральпой жидкости содер?кится IIc менее

100 тысяч. За 2 4 час до пересева необходимо заменять половину культуральной жидкости новой фазой. 41?..акон с культурой энергично встряхивают, причем большинс1во лямблий переходит в раствор. В каждый новый флакон засевают по 20 — 30 тысяч лямолий В 1 ял жидкости.

В старый флакон набирают новую порцию питательной жидкости и продолжают культивирование исходного штамма. Определенное количество лямблий (30 — 40 тысяч в 1 ягл) находится в надосадочной ?кидкости. При ежедневных сменах фазы надосадочную жидкость не выбрасывают, а засевают в новые флаконы.