Нитроксильные производные 5-фторурацила,обладающие противоопухолевой активностью
Нитроксильные производные 5- -фторурацила общей формулы гле а R,,; д б) R,-R,, R2-H; Н, в R,-H, R,R,;НгС If СНз г) R,-Na, обладающие противоопухолевой активностью . i (О
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН
К АВТОРСКОМY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
»"
»»
»e»
i (F
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3557801/23-04 (22) 11.03.83 (46) 07.06.86. Бюл. N 21 (,7!) Отделение Ордена Ленина института химической физики АН СССР (72) Н.М. Эмануэль, А.Н. Розенберг, В.А. Голубев, Г.Н. Богданов, Л.С. Васильева и Н.П. Коновалова (53)547.854 .4.07(088.8) (56) Dushinsky R. Pleven Е., Heidelberg С. The synthesis of 5-Fluoropyrimidims.-д. Amer. Chem. Soc., !
957, 79, р. 4559.
Патент Великобритании !!"116839-, кл. С 07 и 5/30, опублик. 1969. (!9) (И) (51! 4 С 07 D 239/54, А 61 К 3)/505 (54) НИТРОКСИЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ 5-.
ФТОРУРАЦИЛА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ (57) Нитроксильные производные 5-фторурацила общей формулы
R».M JjF
0 1
1 г Б, р . 1„. 0 !
RãН З НС Сн
Ra=Re ° Д С М CH
3 Ъ г ) R -1!а» Вг=Б
НЗ обладающие противоопухолевой активностью.
1235864
Изобретение относится к новым биологичеСки активным соединениям — нитроксильным производным 5-фторурацила общей формулы
Н
1 гдеа) Б =R<=R>, Я вЂ” — С=О
c) R, =R,, R,=-Н; и С СН
В) Б =Н; Rq R), Я С > С113
r) R, ="а Н ="з, О обладающим противоопухолевой активностью, которые могут найти применение в биологии и медицине.
Известен 5-фторурацил,.который применяется в настоящее время в онкологии при неоперабельных формах рака желудочно-кишечного тракта, рака легкого и яичников. Однако это сое. динение обладает высокой токсичностью, особенно сильно нарушает функцию костного мозга и желудочно-кишечного тракта.
Другой аналог предлагаемого соединения — фторафур — малотоксичный прокт (ЛД о для мышей 750 мг/кг), имеет довольно высокую активность в отношении солидных экспериментальных опухолей: саркомы 180, меланомы Гардинга-Пасси, карциносаркомы Уокера
256, альвеолярного рака печени РС-1.
В клинике препарат применяют при раке молочной железы, прямой кишки, толстого кишечника и раке желудка.
Однако этот препарат угнетает органы кроветворения и вызывает осложнения со стороны желудочно-кишечного тракта, Кроме того, у фторафура так же, как и у фторурацила отсутствуют парамагнитные свойства.
Цель изобретения — получение новых соединений, обладающих противоопухолевой активностью, с парамагнитными свойствами.
Поставленная цель достигается предлагаемыми нитроксильными производными 5-фторурацила общей формулы обладающими противоопухолевой активностью.
Предлагаемые соединения получают конденсацией асс -(триметилсилил)-5-фторурацила (ТХ) с хлорангидридом
2,2,5,5-тетраметил-l-оксил-Ь -пир3 ролин-3-карбоновой кислоты (I II ) в среде инертного растворителя, например бензола, или без растворитеg5
4S
5
1О
30 ля при комнатной температуре или при слабом нагревании.
При взаимодействии соединения
II с двумя молями соединения III происходит замещение обеих триметил-. силильных групп на пирролиноильные остатки Н, и с выходом 74-77% образуется 1 3-ди(?,2,5,5-тетраметил-1-оксил-в -пирролин-3-оил)-5-фторурацил (Х).
При взаимодействии хлорангидрида соединения III с избытком соединения
II происходит селективное замещение одной триметилсилильной группы на ацильный остаток Б>, После гидролитического отщепления оставшейся триметилсилипьной группы получают с выходом 48-507о 1-(2,2,5,5-тетраметил-1-эксил--h. -пирролин-3-оил)-53
-фторурацил (IG)
Натриевую соль 3-(2,2,5,5-тетра3 метил-1-окси-а -пирролин-3-оил)-5-фторурацила (.fr) получают обработкой спиртового раствора дипирролиноилфторурацила (I) эквивалентным количеством алкоголята натрия. При этом селективно отщепляется 1-пирролиноильная группа, и с выходом 9096Х. образуется соль (Ir), которую осаждают из спиртового раствора эфиром.
3-(2,2,5,5-Тетраметил-l-оксил-6 -пирролин-3-оил)-5-фторурацил (Ia) получают обработкой натриевой соли (Ir) эквивалентным количеством разбавленной кислоты, например HCl или Н ЯО4 . Образующееся при этом соединение 1в экстрагируют эфиром или хлороформом. Выход соединения
ia составляет 70-75Х.
Строение полученных веществ однозначно пбдтвержда ется элементным анализом и методами ЭПР-, ИК-, электронной и масс-спектрометрии.
В ИК-спектрах пирролиноил-5-фторурацилов {i а, б, в) присутствует группа полос в области 1670-1760 см, обусловленная колебаниями карбонильных групп урацила и пирролиноильных заместителей. В соответствии с числом карбонильных групп монопирролинфторурацилы (16-Ir) содержат меньшее число карбонильных полос, чем дипирролиноилфторурацил. У натриевай соли (1г) карбонильные полосы урацила (1561 и 1673 cì ) сильно смещены в
- | низкочастотную сторону в результате делокализации отрицательного заряда
1235864 аниона на карбонильные группу урацидержат четыре перекрывающихся полосы, которые обусловлены поглощением нитроксильного пирролиноильного и урацилового хромофоров. Интенсивность этих полос у дипирролиноилфторурацила (I) в 1,5-2 раза вьипе, чем у монопирролиноилфторурацилов (?б,в).
Электронные спектры водных растворов монопирролиноилфторурацилов (Хб,в) и натриевой соли (г) зависят от рН.
При рН и 3 они обусловлены в основном поглощением монопирролиноилурацилов, а при pH > II — поглощением соответствующих анионов. !5
Электронные спектры 3-пирролиноилфторурацила (Is) и соответствующего ему аниона сильно отличаются по частоте и интенсивности полосы, связанной с поглощением урацилового хромофора. У соединения Is эта полоса имеет частоту 41710 см, а ( у.аниона — 33710 см . Такое разли1 чие частот характерно для всех 3-замещенных урацилов и таким образом подтверждает строение соединений
Is и Iã. Спектры 1-пирролиноилфторурацила (IF) и соответствующего ему
50 ла.
В ИК-спектрах всех веществ Т (а-г) присутствуют также полосы валентных колебаний связей С=С пирролина и ура- 5 цила с частотой 1620 †16 см, полосы валентных колебаний протонов метильных групп пирролина (28003000 cM ) и Н-С=С-групп пирролина и урацила (3030-3100 см ). У монопирролиноилфторурацилов (?б, в) имеются также полосы группы N-Н с час— тотой 3200 см
Парамагнетизм полученных веществ подтверждается методом ЭПР. Спектры 15
ЭПР разбавленных растворов монопирролиноилфторурацилов (Хб,в,г) состоят из трех линий, которые характерны для нитроксильных монорадикалов, Спектры ЭПР дипирролиноилфторурацила 20 (I) состоят из девяти линий и харак— терны для нитроксильных бирадикалов, у которых энергия обменного взаимо<4 действия электронов J=I,8 а EI. Констаты сверхтонкого взаимодействия а М и 8-факторы полученных веществ (Ia-г) характерны для нитроксильных радикалов пирролинового ряда.
Электронные спектры ацетанитрильных растворов пирролиноилфторураци- 30 лов в области 12500-50000 см со— аниона близки друг другу, что .также типично для 1-замешенных урацилов.
В масс-спектрах пирролиноилфторурацилов присутствуют молекулярные ионы M,,а также осколочные иопы, подтверждающие число и место присоединения пирролиноильных групп Rq к 5-фторурацилу (Eu). Так, в массспектре 3-пирролиноил-5-фторурацила (Is) присутствуют осколочные ионы м/е 167 fR j H м/е 130 (Eu), а также осколочные ионы м/e (R,NHCONEE ) и м/е 225 pHR Г1НСО1 H ) свидетельг
Ф ствующие о присоединении 2,2,5,5-тетраметил-1-оксил Ь -пирролинсиль3 ной группы к атому И3 урацила. В масс-спектре дипирролиноилфторурацила (Ia) присутствует осколочный ион м/е 296 (Е Р 1Г), обусловленный отщеппением одной иэ двух групп от молекулярного иона M
В отличие от 5-фторурацила пирролиноилфторурацилы (I а-в) хорошо растворимы в органических растворителях: в спиртах, ацетоне, ацетонитриле, диметилформамиде, диметилсульфоксиде. Натриевая соль (Ir) очень хорошо растворима в воде. Ее водные растворы имеют щелочную реакцию. 3-Пирролиноилфторурацил (Is) плохо растворим в воде, но хорошо в водных растворах щелочей или в буферных растворах при рН>10.
3-Пирролиноилфторурацил (Is) и соответствующий ему анион достаточно устойчивы к гидролизу. При комнатной температуре в интервале рН 3-11 соединение Хв и соль соединения Ir не претерпевают заметного гидролитического расщепления в течение часа.
1 -Пирролиноилфторурацил также хорошо растворим в водных растворах щелочей, однако быстро гидролизуется до фторурацила и 2,2,5,5-тетраметил-1-оксил-Ь -пирролин-3 карбоновой кислоты. Скорость гидролиза возрастает с увеличением рН среды.
Пример I . Получение 1,3-ди (2,2,5,5-тетраметил — 1-оксил-Д -пир9 ролин-3-оил)-5-фторурацила (Ia).
К раствору 8,11 г хлорангидрида
2,2,5 5-тетраметил — 1-оксил Ь -пирро3 лин-3 — карбоновой кислоты в 40 мл сухого бензола добавляют в атмосфере сухого азота 5,49 г оас (триметилсил)-5-фторурацила. Оранжевые кристаллы дипирролиноилфторурацила отфильтровывают, промывают небольшим
1235864 количеством бензола и гексана и сушат. Выход 6,8-7,1 г (74-77%). Оранжевые призмы (из толуола), т.пл.
195-198 С. 5
Найдено, %: С 57,4+0,3; Н 5,9+О, I
И 12,1+0,1; F 3,7+0,3; м/е 462 /M /.
С„Н„, И,О, Вычислено, %: С 57,!4; Н 5,98;
N l2 11; F 4 .11%, М 462, 4745 . IP
ИК-спектр в CCI4, 1, см (E. л/моль см): 1621/230/=С =С, 1676/620/, 1705/1100/, 1729/800/, 1762/520/
С=О, 2870/100/, 2935/220/, 2984/310/, СН,; 3030/80/, 3065/70/, 3095/90/; I5
СН," в KHr 1625 С=С; 1675, 1700, 1725, 1760 С=О, 2870, 2935, 2980 СН9, 3052, 3064, 3090 СН.
ЭПР-спектры в толуоле, 25 о
5 "10 М: 9 линий с соотношением амп- 20 литуд О, 6 100:29:33 .95" 32:24:86
0.15. Расстояние боковых линий до центральной, в единицах a> . 0,41:
:0,58; 1:2:2,3 8=2,00560+1.10, а„ =14,18 0,04 Гс.
2S
Электронный спектр в MeCN, Я„д„. см (с, л/моль ° см); 26500 100 пл /8!+2/ 374002100 пл /8200+100/, 44560 60 пл /209009200/, 47000 100
/22400+200/. ЗО
Масс-спектр: м/е (ион) j J/Уд,„„,,%j:
463 (М+!) /1,4/, 462 (М) /4,4/, 447 (М-СН ) /0,22/, 432 (М-NO)
/2,2/, 296 (RCOFU) /5,7/., 281 (НСОРЧ1 СП ) /0,16/, 266 (RCOFU-NO)
/4,7/, 167 (RCO) /16/, 152 (BCOCÍ /16/, 139 (RCO-CO), 137 (BCO-NO) /52/, 109 (RCO-NO-U)
/100/, где R - 2,2,5,5-тетраметил-1 îêñHë-а -пирролинил и -урацил. !О
Пример 2. Получение 1-(2,2, 5,5-тетраметил-1-оксил-й -пирролин-3-оил)-5-фторурацила {Ia).
К раствору 2,02 г хлорангидрида
2,2,5,5-тетраметил-1-оксил-й -пирролин-3-карбоновой кислоты в 100 мл сухого бензола добавляют в атмосфере сухого азота 5,49 г Fac (триметилсилил! †.5-фторурацила.
Оранжево-красные кристаллы пирро-.5р линоилфторурацила отфильтровывают,, промывают бензолом, затем гексаном н сушат. Выход 1,4-1,5 г (48-50%)„
Оранжево-красные иглы (из нитрометана), т.пл. 198-201 С.
Найдено, %: С 52,4 0,3; Н 5,10!:
< 0,05; И 13,8+0,2., м/е 296 /М /
С, Н, FNgO<
Вычислено, %: С 52,70; Н 5,10;
И 14,18, М 296, 2760.
ИК-спектр в NeCN 9, см (Г . л/моль см): 1627 /110/ к С=С, 1685
/330/, 1730 /1700/ C=Î, 2835/40, 2872 /52/„ 2946 /155/, 2983 /210/, СН, 3105 /140/ СН; 3225 /130/ NHý в ваэелиновом масле: 1622 С=С, 1672, !
706, 1724, 1745 C=O, 3055, 3095 СН;
3152; 3195 ИН. о -Ф
ЭПР-спектр в толуоле, 25, 5 ° 10
М:3 линии с соотношением амплитуд:
100:99:90; g=2,00562+3 10; а„, =14 25-0,ОЗ Гс.
Электронный спектр в МеСИ „„,см (E, л/моль ° см ): 26120+ 50 пл
/50+1/, 37120+50 пл /7700+100/, 40700 - 40 /10000+!00/, 47030 40
/I3400220G/, в водной 0,001 М HCI .,184180,/9700/ 47320 80 /cl4400/
Пример 3. Получение натриевой соли 3-(2,,5,5-тетраметил-l— з
-оксил-Ь -пирролин-3-оил)-5-фторурацила (Ir).
К 4,62 r дипирролиноилфторурацила (Ia} приливают 10 мл 1-молярного раствора этилата натрия в абс. зтаноле. Реакционную смесь перемешивают, затем добавляют 40 мл днэтилового эфира. Выпавший желтый осадок соли (lг) отфильтровывают, промывают эфиром и сушат. Выход 2,85-3,05 r
{90-96%}. Соль не имеет четкой температуры плавления, постепенно разлагается при 250-330 С.
Найдено, %: N 13,0; 0,2
С<> Н1 FN>0 Вычислено, %". И 13,20. ИК-спектр в вазелиновом масле, см : 1620 С=С, 1561, 1673, 1738 C=O, 3070 CH Электронный спектр в водной 0,001 М НС! 1 „„,„ см (Я, л/MOJIb.CM) . 37400 50 пл /7200+100/, 417Q0+40 /!3800+100/ 467+100 /12100+100/, в водной 0,001 М ИаОН;33700-30 /8100 +!00/ 44270 50 /15700+300/. ЭПР-спектр в воде, 25, 5 10 М: 3 линии с соотношением амплит д: 1OG:101,80; =2,00514+1.10, а, 14 !! =-15,88+0,05 Гс. Пример 4. Получение 3-(2,2, 5,5-тетраметил-l-оксил- 4 -пирролин3 -3-оил)-5-фторурацила (?в ) . К 1,59 г натриеной соли (1г) приливают 25 мл 0,2 н. НС1. Смесь перемешивают 10 мин и многократно экст1235864 рагируют хлороформом. Хлороформные вытяжки сушат Иа>НО<, растворитель испаряют в вакууме, а остаток перекристаллизовывают из толуола. Пирро линоилфторурацил кристаллизуется в виде мелких желтых игл, т. пл. )69171 С. Выход 1,04-1,)l г (70-75%). Найдено, %: С 52,620,2; Н 5,09+ +.0,05; N 14,320,1, F 6,44+0,005, м/е 296 (M+) ! 20 с1, н РИ,О4 Вычислено, %: С 52,70; Н 5,10; N 14,)8; F 6,41; М 296,276. ИК-спектр в МеСИ, 1, см (Е, л/моль см): 1622 /180/ С=С; 1680 /1330/, 1723 /760/, 1754 /960/ С=О, 2877 /47/. 294 / ) 30/, 2989 /1 90/ СН 3087 /90/ СН; 3270 /140/; в KBr: 1620 С=С; 1665, 1720, 1760 С=О; 2840, 2940, 2990 СН; 3084 СН 3210 NH. ЭПР-спектр в толуоле,25 ; 5.10 М: 3 линии с соотношением амплитуд 100:99:90; g=2,00561+ 1.10 ; а<,„ = 25 --!4.,!5+0,OI Гс. Электронный спектр в МеСИ,Я„ см" (Я, л/моль см): 25140 20 /52,6+ + 0,5/; 38190 .20 пл /8500+200/; 42480+20 /14000*500/ 47430+60 gp /13200 600/, в водной 0,001 М HC) 37410460 пл /72002100/ 417)0+30 /13900:+100/, 46700+70 /12000+100/, в водной, 0,001 М Иаон 33710+30; /8160+150/, 44270 90 /15700>300/. Масс-спектр, м/е ион (7/смаке s%) 297 (М+1) /7,1/, 296 ГМ ) /23/ 282 (НМ"CI з) /26/ 28) (N-СН ) /1,2/, 266 (М-ИО) /12/, 226 (RCONHCONH ) /0,44/, 225 (HRCONCONF ) /1,4/, )67 (RCO) /42/, 152 (RCOCI э) /67/, )39 (RCO-CO) /!6/, 137 (RCO-ИО) /82/, 136 (RCO-HNO) /100/, 130 (Уп) /91/, 109 (RCO-NO-CO) /96/, где R=2 2,5,5-тетраметил-l -оксил- 45 -Ь -пирролинил-3 и урацил. Биологические испытания предлагаемых нитроксильных производных 5-фторурацила. Токсичность соединений определена в острых опытах при внутрибрюшинном введении препаратов и оценена по методу Бернса (по кривым накопления частот гибели животных в зависимости от дозы). Работу вели на мъппах чистых линий. Определение противоопухолевой активности проводили на перевиваемых опухолях крыс и мьппей. Испольэонапы следующие опухоли мышей: лейкемии Ь вЂ 12, Р-388, лейкоэ Ьа,. меланома В-16, аденокарционома 755 (Ca. 755) и опухоли крыс: аритромиелоз Швеца, Карциносаркома Уокера (КСУ), карционома Герена. Лейкемия L-12)0 перевивается внут- 5 рибрюшинно, 10 клеток в 0,2 мл асцитической жидкости, препараты вводили внутрибрюшинно, ежедневно, начиная с 1 — х суток, 5 раэ. Лейкемия P-388. Перевивается 6 внутрибрюшинно, 10 клеток в 0,2 мл асцита, препараты вводили внутрибрюшинно ежедневно, начиная с I --х суток, 5 раз. Лейкоз La острый гемоцитобластоэ, получен в 1955 r от облученпой мьппи. Перевивается внутрибрюшинно взвесью опухолевых клеток (10 клеток). Пре= S параты вводили внутрибрюшинно, первое введение через 3 ч после заражения, затем ежедневно 7 введений. Солидные опухоли перевивали опухолевой взвесью в разведении физиологическим раствором 1:I по весу и вводили подкожно. Препараты вводили внутрибрюшинно, начиная лечение через сутки после перевивки (для карциномы Герена — 7 суток), ежедневно 10 введений. Препараты вводились в эквитоксичных или эквимолярных дозах. Описание условий проведения опытов, критерии оценки противоопухолевого действия и результаты по терапевтической активности приведены в таблице. Критерием оценки противоопухолевой активности на моделях Р-388 и L-1210 является увеличение средней продолжительности жизни (УПЖ) опытных животных по сравнению с контрольными, %, которое вычисляют по формуле IOO(L R -Ь.) ь, где L - время жизни животных в оп опытной группе; Ь„ — время жизни животных в контрольной группе без введения препарата. На модели лейкоза Ьа критерием противоопухолевой активности является кинетический критерий Х=!— (7 /J< ), где J „ и 7„ — удельные скорости роста опухоли селезенки в опыте и контроле соответственно ° 1235864 Сравнительную оценку широт терапевтического действия проводят но химиотерапевтическим индексам Т О И Х»00 — (для лейкемии L 1210) 60 Е ЕЛ»1п » 6о J„0 = — — — — =(для лейкемии Р-388) юо ц где ПЛ, — доза, вызывающая 101 гибели животных; EI1 па е»» и ЕЛ «,», — величины доз, увеличиваю rl »»»O щих продолжительность жизни животных на 60 и 1007. Результаты по антилейкемической активности предлагаемых соединений и взятых для сравнения фторафура и 5-фторурацила также приведены в таблице. на фиг. 1 »»pHBедены кинетические кривые увеличении массы селезенки при лейкозе La: в контроле (!) и при действии зквимолярных (0,2 мМ) доз фторафура (2), 5 -фтора»урацнла (3) и наиболее акт много из предлагаемых соединений 1г (4). Иэ наклонов кинетических -кривых увеличения веса селезенки следует, что наиболее эффективно тормозит рост лейкоза La. препарат Ir Его 30 активность несколько выше. активности 5-фторурацила и во много раз превосходит активность фторафура. В качестве показателя противоопухолевой активности на солидных опухолях используют процент торможе,ния Т увеличения объема опухоли по сравнению с контролем, который вычисляют по формуле 1oo (y„„v,, ) gQ к где 1 „ — средний объем опухоли в контроле; V „ - средний объем опухоли в опыте. 45 Испытания проведены на солидных опухолях . эритромиелоз Швеца, меланома В-16 (В-16), карционосаркома Уокера (KCY) карционома Черена,, аде-. .нокарцинома 755(Са-755). На фиг. 2 представлены кинетические кривые изменения объема опухоли Са-755 в контроле (1) и при действии наиболее активного из описываемых соединений I r (2) и известного противоопухолевого препарата фторафура. Как видно из фиг. 2, соединение Тг значительно тормозит увеличение объема опухоли (707. торможения), тогда как фторафур не проявляет противоопухолевого действия. Проведенные испытания показали, что противоопухолевая активность предлагаемых соединений I (а,б,в) при их скрининге оказалась несколько ниже, чем препаратов, взятых для сравнения, однако она определялась с использованием малых доз этих соединений. Об этом свидетельствуют высокие значения хи»иотерапевтических индексов, рассчитанных для увеличения продолжительности жизни на 403 (,Т,ю ), Таким образом, все предлагаемые соединения обладают противоопухолевой активностью, значительной широтой терапевтического действия и, кроме того, парамагнитными свойст вами. Парамагнетизм пирролиноилфторурацилов I (а-г) обусловлен неспаренHblM»» электронами, которые локализованы, в основном, на атомах азота и кислорода нитроксильной группы. Иаиболее универсальным методом исследования парамагнитных веществ является метоц электронного парамагнитного резонанса (ЭПР), который дает информацию как о структуре веществ, так и о структуре их микроокружения. Спектры ЭПР пирролиноилурацилов I (а-r) позволяют однозначно идентифицировать эти препараты в тканях, крови и выделениях организма, так как,они отличаются от спектров парамагнетиков, присутствующих в организме. Расстояние между линиями ЭПРспек.".ров I (а-r) определяется величиной константы сверхто»»кого взаимодействия аИ, которая зависит от вещества и полярности среды. Характер спектра ЭПР нирролиноилурацилов I (a-г) зависит от вращательной подвижности этих радикалов, поэто.»у по спектрам можно судить о вязкости системы, окружающей препараты. Спектры ЭПР I (а-г), кроме того, анизотропны, поэтому спектроскопия ЭПР позволяет также различать анизотропный и иэотропный характер окружающей препараты среды. 1235864 Пре- Токсячпарат ность ЛД уколь аявотняе Линяю Коля» честно Скеяа лечеАктивность Место перевивкн янокуnvH еован Фпк, х /xn оряо ине, х ННЯ ° cd раиев ескяй J «4,0. 75 I в/Ь зо 6,5 Та З5О n/x 1-1О 8-16 СВАГ, го ст!Ву го с вг го x/Ü 6 ° 5 г 2.0 г„«7,6 1-7 О.S ТЬ 150 Lx 65 1-7 0,2 Тв 550 и/б 4О 6,5 510 . l2IO Вор 20 1-9 100 ° /б 7 ° 5 Тт Л «5,6 1-7 ВОУ 20 в/б !О Р-388 I -7 1 ° 3,5, 7,9 Л «4 ° 2 с!at 20 Т.а ° /a О,7 6,5 во J «4,2 1 ° Э,5; 7,9 100 60 пlк СВАГ 20 В-!Ь 1-1О 75 зо н/к Са-7S5 Ся at 20 1-1О 65 о,з 7О К ряся б/и 20 и/к KCY 1-1O 75 KpucQ a/и 20 Эрятрокяелот ВЬеца и/к 7-14 45 75 9-14 30 Крис« Карцинона Гарема 60 1-10 «20 a/п гв и/к 5-+тор- 100; La уре- 188 цнл Ннкн с at 2O в/б 6 5 1-7 57 7 36 I,З,S,7 0,67 СВАГ 20 и/к Крисп б/и 20 п/к 8-16 1-10 ЭрнтДОННелоа ввела 7«14 Еора- 64О фур Маем С at 20 ° /a - 45 16 О 17! 300 1,5,9 20 и/к 300 1 5 ° 9 - 10 J -г,о 8-16 (IaAF! Эрнт— РОНИелок йвеца кряя и/п 20 я/x " 90 7-14 — 15 Метод ЭПР позволяет не .олько надежно идентифицировать парамагнитные препараты Е (а-r) и определять их ! локализацию в организме, но и с высокой точностью определять малые количества этих веществ. Метод ЭПР позволяет определять до 10 моль. Обычно применяемые лечебные дозы для животных на 3 порядка больше этой концентрации. Использование парамагнитньтх сое-. динений позволяет с помощью метода ЭПР определять их локализацию в организме, следить за накоплением их в органах, крови и выделениях организма. Все это значительно упрощает контроль лечебного ттроцесса и позволяет проводить работы по выяснению механизма противоопухолевой актив10 ности веществ. 1235864 4 6" 8 Ю f2 14 фуг, f t, сул Щ Н l, gym Составитель В. Волкова. Редактор Н. Егорова Техред О.Сопко Корректор О. Луговая Заказ 3058/21 Тираж 379 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открьгий 11.3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4
