Способ диагностики кардиосклероза

 

С целью повьппения точности и ускорения способа ткань миокарда взвешивают , измельчают и помещают в гомогенизатор . Добавляют 20-кратный объем среды и,1деления: 0,1 М фосфатный буфер , рН 7,3, с 0,1% тритона Х-100. Гомогенизируют при 0°С 2,5 мин при 900 об/ мин. Из гомогената отбирают аликвоту для определения креатина

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ASTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР пО делАм изОБРетений и ОтнРытий (21 ) 381 7305/28-14

° °

22) 2. 10. 84

46) 23.01,87. Бюп. У 3 (71) Институт сердечно-сосудистой хирургии им. А. Н. Бакулева и Таджикский государственный университет им. В. И. Ленина (72) В. В. Авилов, Д. Б. Сапрыгин, С. П. Смотров, П. М. Аширов, Л. Н. Фурцева, Ф. Г. Ислам-заде и А. В. Колб (53) 616.07(088.8) (56) Medugovac T. Cavdiov a scular

Res., 1980, 14, 551-554, „„SU,„, 1285375 А1 (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ КАРДИОСКЛЕРОЗА (57) С целью повышения точности и ускорения способа ткань миокарда взвешивают, измельчают и помещают в гомогенизатор ° Добавляют 20-кратный объем среды выделения: 0,1 М фосфатный буфер, рН 7,3, с 0,1Х тритона Х-100.

Гомогенизируют при 0 С 2,5 мин при

900 об/ мин. Иэ гомогената отбирают аликвоту.дпя определения креатина (100 мкл). Гомогенат центрифугируют при 4 С 20 мин при 10000 g. При необходимости гомогенат перед измерением разводят 0 05 М трис-НС1, рН

7,3, с 0,5Х бычьим сывороточным альбумином до 500- н 2000-кратного разведения по отношению к массе ткани.

Строят калибровочную кривую и при снижении уровня креатина относительно нормы диагностируют кардиосклероз.

1 }? 853

Изобретение относится к медицине, точнее к кардиологии.

Цель изобретения — повышение точ-. ности и ускорение способа за счет определения креатина в биоптате миокарда, Способ осуществляют следующим образом.

Ткань миокарда взвешивают, измельчают ножницами и помещают в гомогени-10 затор "тефлон-стекло", Добавляют 20" кратный объем среды выделения: 0,1M фосфатный буфер рН 7,3 с 0,1Х тритоо на Х-100, Гомогенизируют при 0 С

2,5 мин при 900 об/мин. Из гомогената отбирают аликвоту для определения креатина 100 мкл. Гомогенат центрифугируют при 4 С 20 мин при 10000 g, При необходимости гомогенат перед измерением разводят 0,05 M трис-HCl рН 7,3 с 0,5Х бычьим сывороточным альбумином до 500- и 2000-кратного разведения по отношению к весу ткани, Пример 1, При операции на открытом сердце у больного А. взяты

25 биоптаты из шести участков миокарда.

Биоптаты больного А. измельчают ножницами и помещают в гомогенизатор

"тефлон — стекло". Добавляют 20- кратный объем среды выделения: 0,1 М фосфатный буфер рН 7,3 с 0,1Х тритона Х-100. Гомогениэируют при 0 С

2,5 мин при 900 об/мин, затем 1 ентрифугируют при 4 С 20 мин при 10000 g.

Из гомогената отбирают аликвоту для 35 определения креатина 100 мкл. При необходимости гомогенаты перед измерением разводят 0,5 M трис"НС1 буфером рН 7,3 с 0,5Х бычьего сывороточного альбумина до 500- и 2000-кратно- 40

ro разведения по .отношению к весу ткани. 100 мкл исходного гомогената депротеинизируют добавлением 100 мкл

12Х трихлоруксусной кислоты, Через

30. мин гомогенат центрифугируют 10 мин 45 при 3000 g. Дпя построения калибровочной кривой используют растворы креатина в концентрации 0; 2,5; 5; 10 и 20 мкГ/мл. Измерение концентрации креатина в депротеиииэированных образцах производят по известной мето75 дике. Полученные реэ ультаты, выраженные в мкГ/мя, пересчитывают в мг/г ткани умножением на 60. Измеренное содержание креатина в миокарде больного A. равно 1,45 0,06 мг/г. Диагноз: кардиосклероз.

Пример 2, 11ри операции на открытом сердце у больного. Н. взяты биоптаты иэ семи участков миокарда, Гомогенизацию биоптатов и определение содержания креатина в них производят согласно примеру 1. Измеренное содержание креатина в миокарде боль" ного Н, равно 1,73+0,07 мг/г. Диагноз: кардиосклероз.

Пример 3. Во время операции с использованием искусственного кровообращения и кардиоплегии у больного Д. взяты биоптаты из пяти участков миокарда. Гомогенизацию биоптатов H определение содержания креатина в них производят согласно примеру l.

Измеренное содержание креатина в миокарде больного Д. равно 2,11+

+0,3 мг/г. Диагноз: кардиосклероз.

100 мкл.исходного гомогената депротеиниэируют добавлением 100 мкл

12Х трихлоруксусной кислоты. Через

30 мин гомогенат центрифугируют

10 мин при 3000 g. Дпя построения калибровочной кривой используют растворы креатина в концентрации 0;

2,5; 5; 10 и 20 мкг/мп. Измеренйе концентрации креатина производят в депротеинизированных образцах. Полу" ченные результаты, выраженные в мкГ/мп, пересчитывают в мг/г ткани, умножением на 60.

Формула и э обретения

Способ диагностики кардиосклероза, включающий взятие биоптата миокарда и определение в пробе концентрации азотсодержащеro компонента, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения способа,.определяют уровень креатина и при снижении этого показателя относительно нормы диагностируют кардиосклероз.

В}}ИИПИ Заказ 7638/46 .иРаж 776 Подписное

Произв.-полигр. пр-тие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4