Способ получения диэтилового эфира @ -(2-хлорэтил)- @ - нитрозоуреидо @ -1-этилфосфоновой кислоты

 

Изобретение касается фосфорорганических соединений, в частности способа получения диэтилового эфира el (2-хлорэтил-Ы-нитрозоуреидо - -1-этилфосфоновой кислоты (ЭФ), который обладает активностью против злокачественных опухолей и может быть использован в медицине. Цель - создание соединений указанного класса , обеспечивакядих лучшую активность и меньшую токсичность. Синтез ЭФ ведут из дизтилового зфира 1-амийозтилфосфоновой кислоты и р-хлорзтилизоцианата при 0-25 С в среде галоидуглеводорода (СНС) с последую1цей обработкой NaNOj в среде НСООН. Испытания ЭФ показьгоают, что он в сравнении с известной Ы,К-бис- -(2-хлорэтил)К-нитрозомочевиной оказывает лучшее действие на лейкомию Р-388, процент выживаемости составляет 534 против 503. Токсичность: составляет 60,1 против 26 мг/кг. 4 табл. СО 00 о оо о tsD 4

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (1Ю (И) А3

1 (.111(1;„;,, I 1Р ll,;

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТ .Ф

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3665922/04 (22) 16.11.83 (31) 8219199 (32) 17.11.82 (33) PR (46) 07.04.87. Бюл. У 13 (71) Адир (FR) (72) Жильбер Лавьелль и Клод Кюденнек (FR) (53) 547. 239. 07 (088. 8) (56) Experimental Evaluation of

Antitumor Drugs in the USA and USSR

and Clinical Correlations. — National Cancer institute monograph 55, 1980, р, 257. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ДИЭТИЛОВОГО

ЭФИРА Ф -CN-(2-ХЛОРЭТИЛ)-N-НИТРОЗОYPFHg0I-1-ЭТИЛФОСФОНОВОИ КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается фосфорорганических соединений, в частности способа получения диэтилового эфира (5D 4 С 07 С 127/19, С 07 F 8/40, А 6 1 К 3 1 l 7

Ы -(N- (2-хлорэтил-N-нитрозоуреидо1-1-этилфосфоновой кислоты (ЭФ), который обладает активностью против злокачественных опухолей и может быть использован в медицине. Цель создание соединений укаэанного класса, обеспечивающих лучшую активность и меньшую токсичность. Синтез

ЭФ ведут из диэтилового эфира 1-аминоэтилфосфоновой кислоты и Р-хлоро этилизоцианата при 0-25 С в среде галоидуглеводорода (СНС1 ) с последующей обработкой NaN0t в среде

НСООН. Испытания ЭФ показывают, что он в сравнении с известной N N-бис-(2-хлорэтил) К-нитрозомочевиной оказывает лучшее действие на лейко- мию P-388, процент выживаемости составляет 534 против 503. Токсичность:

LD ЭФ составляет 60,1 против

26 мг/кг. 4 табл.

1303024

Таблица !

Испытуемое Доза, соединение мг/кг

Увеличение

Число выОтношение доз

ОП

ИП выживаемос- живших жи(ИП) вотных на

60-й день ти животных по сравнению с конисследоватрольными, % ния

1,43

5/8

503

BCNH

6/6

534

1 25

Изобретение относится к способу получения нового химического вещества, B частности с -(N-(2-хлорэтил)-N нитрозоуреидо)-1-этилфосфоновой кислоты формулы 5

1.7Н О CH

Г-СН-йН-С-И-СН СН,СС(Т)

С,Н,О О

О f0 который может найти применение в медицине.

Цель изобретения — разработка способа получения соединения формулы (I), который по сравнению с известным соединением обладает более высокой активностью и меньшей токсичностью.

Пример 1. Получение рацемического диэтилового эфира d.-(N-(2-хлорэтил) N-нитрозоуреидо)-1-этилфосфоновой кислоты.

Пример 2. Стадия А. Диэтиловый эфиро -(ч1-(2-хлорэтил)-уреидо этилфосфоновой кислоты, Раствор 46,65 r (0,26 моль) диэтилового эфира d.--аминоэтилфосфоновой кислоты в 400 мп хлороформа охо лаждают до 0 при перемешивании и добавляют стехиометрическое количество свежеотогнанного Р -хлорэтилизоцианата (22,5 мл или 0,26 моль).

Температура достигает 15 C. Перемешивают еще 1 ч при комнатной температуре, затем концентрируют раствор, выпаривая хлороформ, при пониженном давлении без нагревания, 40

72 г продукта, полученного в форме масла, используют в сыром виде.

Стадия Б. Диэтиловый эфир с -(" †(2-хлорэтил)-N-нитрозоуреидо1-1— этилфосфоновой кислоты..

Раствор 35,4 r (0,12 моль) по— лученного на стадии А продукта в

200 мл муравьиной кислоты охлаждают до 5 С при перемешивании. Добавляют избыток нитрита натрия (15 г, 0,22 моль) частями в течение 30мин.

Перемешивают еще 30 мин при 10 С, затем концентрируют в вакууме при температуре ниже 30-40 С. Поглощают маслянистый осадок смесью воды-хлористого метилена в количестве 400200 мл. Декантируют, экстрагируют снова 200 мл CPäС1 . Промывают органическую фазу 100 мл воды, насыщенной углекислым газом до концентрации 107, затем 300 мл воды. Сушат, концентрируют. Полученные кристаллы тщательно поглощают. в небольшом количестве изопропилового эфира. После осушивания получают

29 г целевого продукта. Перекристаллизовывают из 750 мл этилового эфира при флегме.

Выход 527. Т.пл. 85 С.

ИК, см : (NH) V(C0) соответственно 3220; 1720.

ПМР (8): 1,20-1,80, m, 1Н; 3,403,70, m, 2Н; 3,90-5 00, m, 5H; 7,40, и 1Н.

Соединение (Х) испытывалось на способность удлинять выживаемость мыпей, носителей опухолевых клеток, инокулированных интераперитонально (ИП) или орально (ОП).

Сравнительные данные по активности соединения (?) с известным Ж, М-бис-(2-хлорэтил)-N-нитрозамочевиной (RCNH) на лейкомию Р 388 у мьппей

СД2Х! (имплантация 10 клеток) представлены в табл. 1.

303024 4 нием числа и веса легочних метастаз-, по отношению к неподвергнутым лече" нию животным.

Антиметастатическая активность

5 соединения (I) на образование очагов легочных метастаз после внутримьш ечной инъекции клеток карциномы

Льюиса приведена в табл. 2.

Таблица 2

Образование метастаз после обработки соединением (I) животных " девятью ежедневНеобработанные контрольние животные

Образование метастаз после обработки ВСКИ животных девятью ежеднев ними дозами

5 10 моль/кг

Показатели ними дозами

4 10 моль/кг (ИП) (ИП) Вес мета40,5+19,9

0 стаз на

18-й день, мг

Число ме тастаз, N

10

Первая обработка на следующий день после инокуляции.

Продолжение табл.3

Как видно из табл. 2 соединение (I) препятствует образованию метастаз. 35

Влияние известного соединения (BCNH) и соединения (I) на кроветворную способность у мышей по отношению к необработанным животным оценивается расчетом элементов перифе40 рической крови и костного мозга (бедренная кость) и обнаружением разведенных клеток, содержащихся в костном мозге, и представлено в

45 табл. 3.

Таблица 3

2 3

7,93 моль/

/кг 10 (Соединение (I)) Результаты показывают, что через

3 дня после ИП-введения самый низкий уровень концентрации раковых клеток.

Результаты получены при использовании эффективной дозы для BCNH (11,75 моль/кг.10 ) и соединения (I) (7,93 моль/кг.10 ), Влияние токсичного действия соединения (I) и известного BCNH на печень определяется путем измерения ге патитного фермента аланина аминотрансферазы (БСРТ) в сыворотке крыс

"Лонг Эванс .

Нормальная концентрация в крови указанного фермента от 7,5 до

l9 меж. ед./л.

11,75 моль/ 1,55 10 = 37=53X (-47X)

/кг 10 =31X (-69X) (BCNH) 3 1

Контроль — необработанние жинотние.

Как видно из табл. 1, процент выживаемости BHUtp H oTHoplpHHe активных доэ ОП/ИП лучше для соединения (I).

Антиметастатическая способность соединения (I) измеряется сокращеКонтроль 5 10 =100X 70=100X

2. 1 10 =42X 51=73X (- 7X) (-587.) 5 1303024 6

Результаты действия BCNH и соеди- гепатитного фермента у крыс "Лонг нений (I) на уровень циркулирующего, Эванс" приведены в табл. 4. таблица 4

Уровень фермента в сыворотке, МЕ/л,через

1 день 2 дня 5 дней 9 дней

Показатели

BCNH (ИП)

14,1 моль/кг.

"10

22,7

27,3

11,8

19,7

Соединение (I) (ИП)

9,5 моль/кг 10 10,5

9,2

10,2

9,9

Контрольные животные

10,5

12,6

10,5

l0,9

Среднее значение, полученное измерений. от 2-4-х отдельных

t уреидо1-1-этилфосфоновой кислоты формулы

СрО СН, P -CH -NH-C-N -CH CH С1 и ll

2 2

CH0 0 0

Способ получения диэтилового эфира А-fN-(2-хлорэтил)-N-нитрозоСоставитель С.Полякова

Редактор М.Бланар Техред И.Попович Корректор А.Зимокосов

Заказ !227/57 Тираж 372 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Соединение (I) не имеет гепотит25 ной токсичности.

Токсичные данные Щ соединения (I) и BCNH соответственно (при интераперитонеальном-введении) составляет 60,1 и 26 мг/кг.

Указанные результаты свидетельствуют о том, что соединение (Т) является по сравнению с известным соединением BCNH более активным и менее токсичным.

Формула изобретения отличающийся тем, что диэтиловый эфир 1-аминоэтилфосфоновой кислоты обрабатывают 8-хлорэтилизоцианатом при температуре от

0 до 25 С в галоидуглеводороде, полученный при этом диэтиловый эфир д.-(N-(2-хлорэтил)-N-уреидо)-этилфосфоновой кислоты обрабатывают нитритом натрия в муравьиной кислоте,