Способ получения производных аминоакридин- @ , @ -(d)- и (l) -n-гликозидов или их соляно-кислых солей
.. Способ получения производных аминоакридин-о,-(В)- и (Ь)-Н-гликозидов общей формулы I Z CV Ч Ъ |где или 1 ; R .- Н или СН, , при Х,Х-Н, Z-H, NHj, NHR, , Y, -NO, NHR,, ,, C HjOBr, NHR, 2 1 . J -р Т где R,6i - oij-, / -, D-глюкопиранозильный и 2 ,3 ,4 ,6 -тетраацетил- -oi-,5-Б-глюкопиранозильный остаток; при Y,-Yj,-Z-H X,, или X,-NH, а , где R, - сахарный остаток, определенный выше, а также р -D - галактопиранозильный 2 ,3 , 4 ,6 -тетраацетил-в -,/3-В-галактопиранозильный,щ -L-рамнопиранозильный, ;oJ-,p-D - рибопиранозйльный, -лактопиранозильный остатки, или X, -/1-В-глюкоплранозиламиногруппа, а Xj-ot-L - рамнопиранозиламиногруппа, или их солянокислых солей, заключающийся в том, что производные аминоакридина общей формулы II CO Cln где n и R - имеют указанные значения; при х -н, z -H, NH,; Y -NO,, кн„; 2 ,, C,jHjO, Br, или при X -NHj, вводят в реакцию с одним или двумя соответствующими сахарами в водноэтанольной или водно-ацетоновой среде в течение 30-480 мин при темперао, туре от 40 до 80 С, реакционную 1 ч при смесь выдерживают не менее ;0-25°С, продукт реакции вьщеляют, при необходимости производят разделение монои дигликозидов, вьщеляют в виде нейтральных оснований или солянокислых солей общей формулы I. CO 4 о iu СЛ CM
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
O% Of) yg 4i C 07 H 7/06
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н IlATEHTY
Y
Y
С „
-1l с4
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ll0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕГЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3396152/23-04 (22) 26.02.82 (31) 474/81 (32) 27,02.81 (33) HU (46) 15.10.87. Бюл. 111 38 (71) Биогал Дьедьсердьяр (HU) (72) Антал Ковач, Андраш Липтак, Пел Нанаши, Лорант Яношши, Иштван Чернуш, Янош Эрдей, Иштван Касаб, Кальман Полиа и Андраш Несмельи (HU) (53) 547.917.07(088.8) (56) Kuhu R., Chem.Ber., 68, 1765, 1935.
Ibid 69, 1745 {1940) .
Nanhsi P,". Nature 171, 475, 1953.
Frerejacque, М., Compt. Rend.
202, 1190, 1936. ,(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ
АМИНОАКРИДИН-М,/3- (D) — и (Ь)-N-.ÃËÈÊÎЗИДОВ ИЛИ ИХ СОЛЯНО-КИСЛЫХ СОЛЕЙ (57) .; Способ получения производных аминоакридин-nL, †(D) — и (L)-N-гликозидов. общей формулы I
z,:где п=О или 1;
R ..— â€”Н или СН при Х, Х Н, Е Н, НН, ННК,, 7 ЯО где R e -М вЂ, P â€, D-глюкопиранозильный
1 2 и 2,3,4,6 -тетраацетил-eL-,P-D-глюкопиранозильный остаток; при Y, -Y -Z-Н
Х,=Х2-NHR или Х,-NH, а Х -NHR где R — сахарный остаток, определенный выше, а также
P -D — галактопиранозильный 2,3
4,6 -тетраацетил-g-,P-D-галактопиранозильный, -L-рамнопиранозильный, oL-,P-Р— рибопиранозильный, 8 -лактопиранозильный остатки, или Х, — P -Р-глюкопнранозиламиногруппа, а Х2-ы-L — рамнопиранозиламиногруппа, или нх солянокислых солей, заключающийся в том, что производные аминоакриднна общей формулы II где и и R — имеют указанные значениями при Х -Н, Z -Н, NH ; Y -NO, NH или при Y =Y"-=Z -Н Х -NH2, вводят в реакцию с одним или двумя соответствующими сахарами в водноэтанольной или водно-ацетоновой среде в течение 30-480 мин при температуре от 40 до 80 С, реакционную смесь выдерживают не менее 1 ч при
:0-25 С, продукт реакции вьщеляют, при необходимости производят разделение моно- и дигликозидов, вьщеляют в виде нейтральных оснований или солянокислых солей общей формулы I.
1346045
Изобретение относится к способу получения новых производных аминоакридин-Ы,P †(D) или †(L)-N-гликозидов и их солянокислых солей общей форму5
JIbl I:
2 -ll х 1»»
О
®Ъ где п=О или 1;
R-Н или СН при Х»=Х -Н, Z-H, NH, NHR,, Y» -ИО, >5 где R(a-,P- D-глюкопиранозильный и
2,3,4,6 -тетраацетил-»»-,P-D-глюко( пираноэильный остаток, при У,=У =Е-Н Х,Х вЂ” NHR, или
Х, -ЯН, а Х -ННР», где R< — сахарный остаток, определенный выше, а также Pr -D-галактопиранозильный, 2,3,4,6 -тетраацетил-о»,-
P-D-галактопиранозильный, о», -L-рамнопираноэильный, ac â€,t(-D-рибопиранозильный, -лактопиранозильный остатки, или Х,-В- †глюкопиранозиламиногруппа, а Х -g-L-рамнопиранозиламиногруппа, 30 обладающих противоопухолевой и антигрибковой активностью.
Цель изобретения — получение новых производных гликозидов аминоакридина, обладающих антигрибковой и противоопухолевой активностью и меньшей токсичностью.
П р и м е p !. 3,6-Ди-(P-D-глюкопиранозиламино)-акридин.
В снабженной обратным холодильни- 40 ком и мешалкой круглодонной колбе емкостью 3 л суспендируют при энергичном перемешивании 66,0 r (0,33 моль) моногидрата D-глюкозы и 36,9 r (0,15 моль) 3,6-диамино-акридин-гид- 45 рохлорида в смеси 1350 мл ацетона и
150 мл воды. Суспенэию нагревают до о
45 С и затем смешивают с 10 мл концентрированной соляной кислоты. После перемешивания примерно в течение 60
5 мин раствор становится прозрачным, спустя еще 2-3 мин начинает осаждаться продукт. Реакционную смесь в течение 1 ч выдерживают в бане с ледяной водой, после чего осадок отделяют.
Осадок растворяют в 250 мл воды и раствор перемешивают с ? л ацетона.
Хлопьевидный осадок отделяют, промывают сначала 200 мл этилацетата, затем IOO мл эфира и сушат в вакууме.
Переосаждение повторяют еще 2 раза.
Получают 70,0 г (87,5%) продукта.
Т.пл. !90-195 С;(о ) =-145,8. (с=0,75, диметилформамид); ТСХ: силикагель
60 F 254, элюент — ацетон и гидроокись аммония в соотношении 65:35;
Rf†=,41.
С Н, О,о N э(мол. вес 533,27)
Вычислено, %: С 56,26; Н 5,86;
N 7,88.
Найдено, %: С 55,42; Н 5,69;
N 8,01.
Пример 2. 3-Амино-6-P-D-глюкопиранозил-амино-акридин.
Отделенная согласно примеру 1 от осадка жидкая фаза наряду с непрореагировавшим исходным соединением и небольшим количествомдиглюкозида содержит также моноглюкозид. Раствор выпаривают в вакууме. 3 r из полученных
15 г остатка после выпаривания вносят в заполненную 300 г силикагеля С колонну диаметром 7 см и высотой 25 см и элюируют »приготовленной в соотношении 65:35 смесью ацетона с гидроксидом аммония. Собирают фракции по
10 мл, их состав контролируют с помощью тонкослойной хроматографии. Для этого готовят такую же смесь растворителей, как для колоночной хроматографии. Содержащие моногликоэид фракции объединяют и выпаривают в вакууме. Остаток обрабатывают 50 мл зтилацетата и затем отфильтровывают.
Выход 1,25 г; т.пл. 190 С;
foe) =-95,3 (c=0,55, диметилформ амид); ТСХ: силикагель 50 F 254, элюент — ацетон с гидроксидом аммония в соотношении 65:35; Rf=0,79.
Вычислено, %: С 61,42; Н 5,70;
N 11,32.
С»9 Н, О N (мол. вес 371, 19) .
Найдено, %: С 60,95; Н 5,60;
N 15,05.
Пример 3. .3,6-Ди-(-м f3 -D-галактопиранозил-амино) — акридин.
В снабженной обратным холодильником и мешалкой круглодонной колбе емкостью 3 л при перемешивании суспендируют 60,0 г (0,33 моль) D-галактозы и 36 9 г (0,15 моль) 3,6-диаминоакридин-гидрохлорида в смеси
1350 мл этанола и 150 мл воды. Суспензию при перемешивании нагревают о до 70 С и смешивают с 7,5 мл концентрированной соляной кислоты. Медленно мутнеющий из-за хлопьевидного осадка
1346045
Т.пл. 225 С; (MJ =+73,6 (c=l,25, хлороформ); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — дихлорметан и ацетон в соотношении 7:3; Rf=0,62. раствор перемешивают еще 2 ч при указанной температуре и затем выдерживают в течение 16 ч в холодильнике о (+4 С). Жидкую фазу отделяют и остаток растворяют в 150 мл воды. Раствор при постоянном перемешивании приливают в 3 л этанола, содержащего 57 воды. Выпадающий хлопьевидный осадок отфильтровывают и высушивают. Переосаждение описанным образом повторяют двукратно.
Выход 60,5 r (75,6X) т.пл. 200 С; (о 3 =-25,4 (с=0,31, диметилформамид);
ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент— ацетон и гидроксид аммония в соотношении 7:3; Rf=0,33.
Вычислено, 7: С 56,26; Н 5,86;
N 7,88.
Найдено, 7: С 55,49; Н 5,69;
N 7,96.
Пример 4. 3,6-Ди-(2,3,4.
6 -тетра-О-ацетил-g-D-галактопиранозил-амино)-акридин (дополнительное ацетилирование).
60,0 r полученного согласно примеру 3 3,6-ди-(a,p-D-галактопиранозиламино)-акридина суспендируют в смеси
600 мл пиридина и 600 мл уксусного ангидрида. Реакционную смесь перемешивают в течение 18 ч при комнатной температуре и затем выпаривают в вакууме (12 торр) до объема 150 мл. Остаточный объем выливают в 600 r ледяной воды. С осаждаюцегося плохо отфильтровываемого порошкообразного осадка сливают жидкую фазу. Осадок растворяют в 1 л дихлорметана. Раствор встряхивают (3«150 мл Н О), сушат над сульфатом натрия и затем выпаривают в вакууме. Остаток после выпаривания растворяют при кипячении с обратным холодильником в 200 мл этанола. При охлаждении до комнатной температуры выпадает в осадок 8,0 г (8,2X) вещества в форме длинных иглообразных кристаллов. Осадок дважды перекристаллизуют из этанола..
Вычислено, 7.: С 56,65; Н 5,45;
Ы 4,83.
С„, Н „О,ь N (мол. вес 869,51)
Найдено,X: С 55,92; Н 5,36; N
4,96.
Пример 5. 3,6-Ди-(2,3,4, 6 -тетра-О-ацетил-P-D-галактопираноf зил-амико) -акридин.
Маточный раствор, из которого выкристаллизован один раз продукт согласно примеру 4, выпаривают до 75мл.
Раствор выдерживают в холодильнике.
После выдержки в течение 8 ч выпа)p дают мелкие иглообразные кристаллы, их отфильтровывают и высушивают.
Получают 35,0 r (35,87) продукта; т.пл. 195 С;(о ) =-20,3 (с=1,48, и хлороформ); TCX: силикагель, 60 Р 254, элюент — дихлорметан и ацетон в соотношении 7:3; Rf=0,56.
Вычислено, X.: С 56,66; Н 5,45;
N 4,83.
Со Н О в Иэ (мол.вес 869 51)
20 Найдено, 7: С 56,08; Н 5,29;
N 4,68.
Пример 6. 3,6-Ди-(oc-Ь-рамнопиранозил-амино) -акридин.
2, 46 r (10 моль) 3,6-диамино-ак25 ридин-гидрохлорида и 4,0 г (2,2 «
«10 моль) L-рамнозо-моногидрата суспендируют в смеси 10 мл воды с 90 мл этанола. Реакционную смесь интенсиво но перемешивают и нагревают до 70 С.
3р После добавления 0,5 мл концентрированной соляной кислоты смесь перемешивают еще 90 мин при указанной температуре, при этом выделяются блестящие хлопьевидные кристаллы. Смесь выстаивают 12 ч при комнатной температуре и затем отфильтровывают. Полу-.. чают 3,6 г (71,87) продукта. Его растворяют в растворе 0,5 мл концентрированной соляной кислоты в 120 мл рр воды и раствор прикапывают к 240 мл этанола. Выпавший осадок отфильтровывают и высушивают.
Т.пл. 185 C;(oL3z=+145 (c=l,25, диметилформамид); ТСХ: силикагель
4б 60 F 254, элюент — ацетон и гидроксид аммония в соотношении 85:15; Rf=0,21.
Вычислено, 7: С 59,93; Н 6,23;
N 8,39.
С Н, O N (мол.вес 501,27)
Найдено, X: С 60,19; Н 6,35; N
8,26.
Пример 7. 3,6-Ди-(g-D-рибопиранозил-амино)-акридин.
2,46 r (10 моль) 3,6-диамино-ак ридин — гидрохлорида и 3,3 r (2,2«
«1О моль) D-рибозы при перемешива,нии суспендируют в смеси 90 мл ацетоо на с 10 мл воды. К нагретой до 45 С суспензии добавляют 0,5 мл концентри1346045 рованной соляной кислоты. Через 23 мин образуется прозрачный раствор, спустя еще 4-5 мин начинает выпадать осадок. Через 25 мин после добавления кислоты отделяют жидкую фазу, осадок растворяют в 20 мл ноды и раствор выливают в 200 мл ацетона.
Переосаждение повторяют еще 2 раза.
Продукт отфильтровывают и высушивают.
Выход 2,5 r (52,8X); т.пл. 180190 С;(о в+141 (с=1,20, диметилформамид); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — ацетон и гидроксид аммония в соотношении 75:25; Rf=0,43.
Вычислено, X: С 58,32; Н 5,75;
N 8,88. Сг Нг1 08N (мол. вес 473, 24)
Найдено, X: С 57,90; 5,89; 8„56.
Пример 8. 3,6-Ди-(p-лактопиранозил-амино) -акридин.
-2,46 г (10 моль) З,б-диамино-акридина и 7,92 г (2,2 10 моль) моногидрида лактозы при постоянном пере мешинании суспендируют в смеси 80мл этанола с 20 мп воды. Нагретую до о
70 С реакционную смесь смешивают с
1 мл концентрированной соляной кисо лоты и перемешивают при 70 С в течение 3 ч. Затем добавляют 3,96 г
-г (1, 1 10 моль) лактозы и смесь перемешивают 4 ч при указанной температуре. Затем смесь выдерживают в течение 10 ч при комнатной температуре, декантируют жидкую фазу и осадок растворяют в 115 мл воды. Раствор прикапывают к 1150 мл этанола. Переосаждение повторяют еще три раза. Продукт отфильтровывают и высушивают.
Выход 6,1 г (70 8X); т.пл. 210 С; о (0 )„ =-112,7 (c=0,52; диметилформамид); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — ацетон и гидроксид аммония в соотношении 1:1; Rf=0,35.
Вычислено, X: С 51,81; Н 5,99;
N 4,90.
Сз7 Н, О zoN (мол. нес. 857,82)
Найдено, X: С 50,61 Н 6,32;
N 4,61.
Пример 9. 3-(15D-Глюкопирано— зил-амино)-6-(х-L-рамнопиранозил-амино)-акридин.
14,76 г (0,06 моль) 3,6-диаминоакридин-гидрохлорида, 12,00 г (0,06 моль) моногидрата D-глюкозы и 10,92 г (0,06 моль) моногидрата
L-рамнозы при перемешивании суспенI дируют в смеси 552 мл ацетона с 48мл воды. Реакционную смесь нагревают до
45 С и смешивают с 4,0 мл концентрированной соляной кислоты. Через 5б мин раствор становится прозрачным, 5 а спустя еще 4-5 мин начинается выделение маслянистого продукта. Через
45 мин после добавления кислоты смесь охлаждают до комнатной температуры и затем фазы разделяют. Маслянистую содержащую также твердое вещество часть промывают ацетоном (дважды по
50 мл) затем растворяют в 170 мл воды и раствор прикалывают к приготовленной н соотношении 1:1 смеси ацетона с этанолом (1700 мл). Окрашенный в оранжевый цнет осадок отфильтровывают, промывают сначала этилацетатом, а затем эфиром и высушивают н вакууме. Выход 18 r.
Для дальнейшей очистки вещество растворяют в 120 мл дистиллированной воды и раствор выливают в 1200 мл приготовленной в соотношении 2:1 смеси ацетона с этанолом. Получают
25 14,5 r осадка, который промывают описанным образом и высушивают. Переосаждение повторяют еще трижды.
300 r силикагеля 40 (70-230 меш, 0,063 мм) суспендируют в 600 мл приЗ0 готовленной в соотношении 70:15:15 смеси ацетона с аммиаком и водой.
Суспензию вносят в колонку, силикагель осаждается в колонке. 1,5 г сырого продукта вносят в 60 мл указанной смеси растворителей, смесь интен35 сивно перемешивают в течение ночи, при этом растворяется 1 г вещества.
Раствор отфильтровывают и затем вносят в колонку. Колонку элюируют с
4 помощью указанной смеси растворителей.
Чистые фракции выпаривают, получают содержащую осадок суспензию. Продукт осаждают ацетоном, отфильтровы45 вают, промывают и высушивают. Чистоту продукта исследуют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления. Т. разл. 210-214 С;(ь =-7,15 (с=0,42, вода); TCX: силикагель
60 Р 254, элюент — ацетон и аммиак
50 в соотношении 75:25; Rf=0,5.
Rf=9 8! мин (н-бутанол:уксусная кислота:вода 4:1:1).
Вычислено, X: С 58,02; Н 6,04;
N 8,12.
С Н, O N (мол.вес 517,54)
Найдено, 7: С 58,30; Н 6,09;
N 8,03.
1346045
15
Пример 10. 3,6-Ди-(8-Р-глюкопиранозил-амико)-.!О-N-метилакридинийхлорид.
20,8 r (0,08 моль) распыленного
3,6-диамино — 10-метилакридинийхлорида и 35,2 г (0,16 моль) моногидрата глюкозы суспендируют в смеси 695 мл ацетона со 105 мл дистиллированной воды. Суспензию при перемешивании о нагревают до 50 С и затем смешивают с 5 6 мл концентрированной соляной кислоты. Реакционную смесь перемешивают еще в течение получаса и затем охлаждают до комнатной температуры.
Фазы путем декантации отделяют друг от друга и твердое вещество промывают ацетоном (дважды по 650 мл). После этого продукт растворяют в 250 мл дистиллированной воды и растор при постоянном перемешивании прикапывают в 2500 мл абсолютного этанола. К опалесцирующему раствору добавляют
12,5 мл 10%-ного раствора хлорида натрия. Через несколько минут начинает выделяться осадок. Через 2 ч осадок отсасывают, суспендируют дважды по 50 мл в безводном этаноле, отфильтровывают и промывают с помощью
150 мл эфира.
Осадок растворяют в 260 мл дистиллированной воды, раствор прикапывают в 2700 мл безводного этанола и для ускорения образования осадка добавляют немного раствора поваренной соли.
Описанное переосаждение повторяют дважды.
Получают 24,2 r (51,35X) продукта; т.разл. 250 С;Я =504 (c=0,80, вода); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — н-бутанол, уксусная кислота и вода в соотношении 2:1:1; Rf=0,20.
Вычислено, %: С 53,49; Н 5,87;
N 7,20.
С H O„ N C1 (мол.вес 583,76)
Найдено, %: С 53,12; Н 6,01;
N 7,32.
Пример 11. 3,6-Ди-(P-D-галактопнранозил-амино) -10-N-метилакридинийхлорид.
5,2 r 3,6-диамино-10-метилакридина и 10,8 r D-галактозы в 200 мл приготовленной в соотношении 88:12 смеси этанола с водой при перемешивании нагревают до кипения. К смеси добавляют 1 мл концентрированной соляной кислоты, затем кипятят в течение I ч с обратным холодильником и после этого в течение дня перемешивают при комнатной температуре. Затем снова добавляют 3,6 г D-галактозы и смесь снова в течение 1 ч кипятят с обратным холодильником. Затем осадок отделяют и промывают небольшим количеством этанола. После этого осадок не содержит D-галактозы, однако содержит 5-10Х непрореагировавшего исходного продукта. В остальном осадок состоит из моно- и дигалактозида в соотношении 1:4. Осадок растворяют в 60 мл воды при слабом нагревании и раствор при перемешивании прикапывают в 700 мл этанола. Смесь смешивают с 2 мл 10%-ного раствора хлорида натрия и затем оставляют стоять.
Твердое вещество отфильтровывают, промывают сначала небольшим количеством спирта, этилацетатом и затем эфиром, сушат в вакуумном эксикаторе.
Получают 7,4 г продукта, который практически не содержит непрореагировавшего исходного соединения, а моногалактозида содержит 10-15Х. Получен- ные после трехкратного переосаждения
4,9 r вещества содержат, как показывает ЯМР-С -спектр, еще 5-10% моно!
3 галактозида.
После пятикратного переосаждения (выход 4,1 г, 35X) продукт не содержит моногалактозида.
T.ðàçë. 200-210 С; =+522,7 (с=0,90; вода); ТСХ: силикагель
60 F 254, элюент — бутанол, уксусная кислота и вода в соотношении 2:1:1;
Rf=0,14.
Вычислено, %: С 53,49; Н 5,87;
N 7,20.
С Н 0, И С 1 (мол. вес 583, 76)
Найдено, %: С 53,05; Н 5,69;
N 7,29.
Пример 12. 3,6-Ди-(о -Ь-рамнопиранозил-амино)-10-N-метилакридинийхлорид.
3,62 г (1,4 10 моль) 3,6-диамино— 10-N-метилакридина при перемешивании суспендируют в смеси )26 мл ацетона с 14 мл воды. Суспензию смешивают с 0,7 мл концентрированной соляной кислоты и затем кипятят 2 ч. Затем добавляют 5,6 г (3,07 10 моль) моногидрата L-рамнозы. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч и потом в течение ночи перемешивают при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают, промывают на фильтре сначала 10 мл этилацетата, потом 10 мл эфира и затем раст10 воды. Раствор при перемешивании прикалывают к 300 мл этанола. Переосаждение повторяют. Затем осадок промывают 20 мл этилацетата, после этого
20 мл эфира и сушат на воздухе.
Получают ?,03 г (34,87) желтого порошкообразного вещества,( =+226,1 (c=1,20, вода); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — н-бутанол, уксусная кислота и вода в соотношении 2:I:1; Rf 0,32. Вычислено„ 7: С 53,47; Н 5,87; N 7,19. С Н О„И С1 (мол. вес 584, 02) Найдено, 7: С 54,10; Н 5,91; N 7,03. Пример 15. 3,6-Ди-(P-лактоэил-амина)-IО-N-метилакридинийхлорид. 2,60 г З,б-диамино-10-метилакридина (10 моль) растворяют в 50 мл воды. К раствору добавляют 10,8 r (3 ° 10 моль) моногидрата лактозы и 0,2 мл концентрированной соляной кислоты. Реакционную смесь перемешио вают 24 ч при 50 С. На 12-м часу добавляют 4 г (1,11 10 моль) моногидрата лактоэы и 0,2 мл концентрированной соляной кислоты. После охлаждения смесь смешивают с 200 мл этанола. Выделяющийся маслянистый продукт отделяют и растворяют в 100 мл воды. Раствор прикапывают к 600 мл этанола. Добавляют 200 мл ацетона, чем ускоряют выделение осадка. Осадок промывают 20 мл этилацетата, затем 20 мл эфира и сушат на воздухе. Получают 3,38 г желтого порошка, который представляет собой смесь моно- и дилактозида 1:1. Содержащий дилактозид 107-ный раствор этой смеси прикапывают в 10-кратное количество этанола. Добавляют 2-3 капли насыщенного раствора хлорида натрия, чем улучшают отфильтровываемость осадка. Переосаждение повторяют пять раз. Полученный дилактозид хроматографически однороден. (с ) =+253,9 (с=0,92, вода); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — иэобутанол, уксусная кислота и вода в соотношении 2:1:1; Rf=0,12. Найдено, 7: С 50,46; Н 6,8; N 4,56. 9 1346045 воряют в 20 мл воды. К раствору добавляют 140 мл ацетона. Осадок отделяют и описанным образом еще дважды переосаждают. Полученный осадок растворя5 ют в 40 мл теплого и затем прикапывают ацетон (примерно 60 мл) вплоть до начала образования осадка. Переосаждение повторяют трижды. После этого продукт состоит из чистого дирамнозида. Аморфное твердое вещество растворяют в 100 мл воды и раствор лиофилиэуют. Т. разл. 250-254 С;Я. =+486,5 (М7 „=-52,2 «5<3 4 =-281,9 (вода); ТСХ. силикагель 60 F 254, элюент н-бутанол, уксусная кислота и вода в соотношении 3:1:I; Rf=0,16. Вьгчислено, %: С 56,70; Н 6,21; N 7,65. 2О C«H„0 N С1 (мол.вес 551,76) Найдено, 7: С 56,65; Н 6,18; N 7,49. Пример 13. 3-Амино-б-(g-Lрамнопиранозил-амино)-10-метилакриди- 25 нийхлорид. Фильтраты описанных в примере 12 переосаждений объединяют и при перемешивании приливают в 200 мл ацетона, причем осаждается монорамноэид. Веще- ЗО ство отфильтровывают„ растворяют в воде и лиофилизуют. Т.разл. 216-222 С;(ьЛ =-350 б ( ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент н-бутанол, уксусная кислота и вода в соотношении 3:1 .1; Rf=-0,42. Вычислено, 7: С 59,19; Н 5,95; N 10,35. С „Н 4 04 И., C l (мол. вес 405, 86) Найдено, 7: С 59,85; H 6,03; N 10,41. Пример 14. 3-Амино-б-,P-лактозил-амино) — 10-М-метилакридинийхлоРид ° Суспензию 2,60 r (10 моль) 3,6диамино-10-N-метилакридина в 100 мл приготовленной в соотношении 7:3 смеси этанола и воды смешивают с 0,2 мл концентрированной соляной кислоты 50 и затем кипятят до тех пор, пока раствор не станет прозрачным. После добавления 5 40 г (1,5 10 моль) моногидрата лактозы реакционную смесь в течение 1 ч перемешивают при температуре кипения и затем в течение ночи при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают и затем при легком подогреве растворяют в 30 мл Вычислено, 7: С 50,27; Н 6,0; N 4,62. С Н, О N Cl (мол.вес 907,92) 1346045 Пример 16. 3,6-Ди-(О, — D-рибопиранозил-амино)-10-метилакридинийхлорид. 2,60 r 3,6-диамино-10-метилакридина и 4,50 r D-рибозы в смеси 90 мл ацетона и 10 мл воды после добавления 0,2 мл концентрированной соляной кислоты перемешивают в течение 1 ч при о 40 С. При реакции вещества растворя- Ip ются неполностью, характер осадка через некоторое время изменяется. Осадок комкуется (слипается) на дне колбы. Раствор сливают, осадок промывают небольшим количеством ацетона и снова 15 екантируют. Затем осадок растворяют 50 мл воды и при перемешивании раствор прикапывают к 200 мл этанола. После добавления 600 мл ацетона дают немного отстояться, затем осадок от- 2р фильтровывают, промывают его на фильтре небольшим количеством этилацетата, затем небольшим количеством эфира и высушивают в вакууме. Получают 3,9 г продукта, который, как показывает 25 тонкослойная хроматограмма, состоит примерно на 30% из непрореагировавшего исходного соединения, а также из смеси моно- и дирибозида (2:1-3:1). Путем семикратного переосаждения 30 получают 1,4 г (137) чистого дирибозида. Т.разл. 186-200 C; (cL) =+188,9 (с=0,24, вода); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — метилэтилкетон, пиридин, вода и уксусная кислота в соотношении 70:15:15:15; Rf=0,14. Вычислено, X: С 55,04; Н 5,77; N 8,02. С Н, О N,С1 (мол.вес 523,73) Найдено, Ж: С 55,21; Н 5,81; И 40 7,91. Пример 17. 9-Амино-2-этокси-6-(P-D-глюкопиранозил-амино) -акридин. В круглодонной колбе объемом 45 500 мл, снабженной обратным холодильником и мешалкой, в смеси 140 мл ацетона и 15 мл воды суспендируют при интенсивном перемешивании 6,15 r D ãëþêîçû и 4,0 г 6,9-диамино-2-эток- 5р си-акридина. Суспензию нагревают при о перемешивании до 50 С и смешивают с 1,6 мл концентрированной соляной кислоты. Вещества растворяются в течение нескольких минут, затем продукт начи- 55 нает медленно осаждаться. Через 1 ч осадок фильтруют из охлажденной смеси и промывают 50 мл этилацетата и ,небольшим количеством простого эфира. 4,0 г полученного сырого продукта растворяют в 40 мл воды. Раствор вливают при постоянном перемешивании в 400 мл ацетона. Хлопьевидный осадок отфильтровывают и промывают 50 мл этилацетата и 50 мл простого эфира. Переосаждение повторяют еще два раза. Выход 3,2 r (48X); т.пл. 300210 С (разл.);(к) -67,5 (с=0,86, диметилформамид); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — ацетон:аммиак 80:20; Rf=0,35. Вычислено, Е: С 60,71; H 6,06; N 10,11. Сг, H250eN (MM 415,44) Найдено, 7: С 60,50; Н 6,12; N 10,21. / у g t Пример 18. 9-(2,3,4,6 Тетра-О-ацетил-к,p-D-глюкопиранозиламино)-2-метилакридин.. К 833 мг (4 10 моль) 9-амино-2метилакридина добавляют 100 мл бензола и 100 мл нитрометана. Затем при атмосферном давлении отгоняют половину растворителя. К охлажденной до 60 С смеси добавляют 14,4 мг (4 " 10 моль) HgBr, 12! 2 мг (4,8 «10 моль) Hg(CN) и 1947 мг (4,8 «10 моль) ацетобромглюкозы. Реако ционную смесь перемешивают при 60 С в течение 36 ч. Через 24 ч добавляют 505 мг (2" х 10 моль) Hg(CN) и 822 мг (2» "10 моль) ацетобромглюкозы. После охлаждения производят фильтрование и остаток промывают дихлорметаном (4 20 мл). Соединенные фильтраты выпаривают. Остаток растворяют в 200 мп дихлорметана, промывают сначала 5Х-ным раствором KI, (2 30 мл), затем водой (2 30 мл) и сушат на сульфате натрия. Полученный после выпаривания продукт очищают на 120 г силикагеля С при помощи смеси дихлорметан — этилацетат 6:4 методом хроматографии на колонке. Получают 453 мг (21,0X) аморфного о стекловидного вещества; (сс) =-8,8 (c=0,45, хлороформ); ТСХ: силикагель 60 F 254, дихлорметан:этилацетат 6:4; Rf=0,19. Вычислено, 7.: С 62,45; Н 5,61; N 5,20. С28Ньо Oq Nz Найдено, 7: С 62,68; Н 5,80; N 5,11. 14 ! 25 Пример ) 9. 9-(a-D-Глюкопираноз ил-амино) -а кридин и 9- (p — D-глюк о,пиранозил-амин). 660 мг 9-(2,3,4,б-тетра-О-ацетил-x,P-D-глюкопиранозил-амино)-акридина растворяют в 66 мл абсолютного метанола. В раствор добавляют 5 мг метилата натрия. Раствор оставляют на ночь и затем нейтрализуют ионообменной смолой — амберлитом IR )20 (Н ). Фильтрованный раствор выпаривают до объема 10 мп. Добавлением 5 мл этилацетата и 30 мл просного эфира продукт осаждают, промывают сначала 10 мл этилацетата и затем простым эфиром (2 10 мл). .Получают 164 мг (36,67) желтого порошкообразного вещества, которое о оказалось о -аномером. Т.пл. 154-156 С; 5е43 =+12,9 (0,75; диметилформамид); 20 ТСХ . силикагель 60 F 254„элюент н-бутанол:метанол:вода 4."2:1; Rf 0,64. Вычислено, 7: С 64,04; Н 5,669 N 7,86. С „Н„О, 1, Найдено, 7: С 64,30; Н 5,50; N 7,75. Из маточного раствора переосаждения кристаллизуется через несколько дней самопроизвольно -аномер (24 мг, 5,3X) . Т.пл. !40 †144 С;(о), =-67,6 (c=0,36; диметилформамид); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент -- н-бутанол: метанол:вода 4:2:2; Rf=0,70. Вычислено, 7: С 64,04; Н 5,66; N 7,86. С „Н„О,! 1, Найдено, 7: С 63,91; Н 5,70; N 7,83. Пример 20. 9-(g,13-D-Глюкопиранозил-амино)-2-метилакридин. 400 мг 9-(2,3,4,б-тетра-0-ацетил-,P-D-глюкопиранозил-амино)-2метилакридина растворяют в 40 мл абсолютного метанола. В раствор добав45 ляют 4 мг метилата натрия. Раствор оставляют на ночь и затем нейтрализуют ионообменной смолой-амберлитом IR 120 (Н ).После фильтрования выпаривают до 8 мл. Добавлением 4 мл этилацетата и 40 мл простого эфира продукт осаждают, отфильтровывают и очищают растиранием сначала с 10 мл этилацетата и затем 2 !О мл простого эфира. Получают 212 мг (77,1X) продукта о в виде желтого порошка.(с4)р =+21,4 (с=0,75, диметилформамид); ТСХ: силикагель 60 Р 254, элюент — и-бутаиол: метанол: вода 4:2:1; Rf 0,72. Вычислено, 7: С 64,85; Н 5,99; N 7,56. Сж Н О У Найдено, 7: С 64,68; Н 5,83; N 7,62. ! / Пример 21. 2-Бром-9-(2,3 4,6 -тетра-О-ацетил- -D-глюкопирано! I зил-амино)-акридин и 2-бром-9-(2,3, 4,6-тетра-О-ацетил-P-D-глюкопиранозил-амино)-акридин. К 546 мг (1 10 моль) 2-бром-9амино-акридина добавляют 70 мл бензола и 70 мл нитрометана ° Затем при атмосферном давлении отгоняют половину ра..творителя. Остаток охлаждают до 60оС и смешивают с 7,2 мг (2 10 моль) HgBrz, 606 мг (2,4-10 моль) Нд(СИ) и 987 мг (2,4 !О моль) ацетобромглюкозы. Реакционную смесь перемешивают о при 60 С в течение 36 ч. После 24-го часа добавляют 253 мг (10 моль) Hg(CN) и 411 мг (10 моль) ацетобромглюкозы. После охлаждения смесь фильтруют и остаток промывают дихлорметаном (4.15 мл). Соединенные фильтраты выпаривают. Остаток от выпаривания растворяют в 150 мл дихлорметана, раствор промывают 57.-иым раствором KI (2 20 мл), затем водой (2х <20 мл), сушат на сульфате натрия и выпаривают. Продукт очищают хроматографией на колонне, сначала на 120 г силикагеля смесью дихлорметан — этилацетат в отношении 6:4, затем на 45 r силикателя 6 смесью дихлорметан — ацетон в отношении 8:2. Получают 31 мг (2,6X) а -аномера (твердое стекловидное вещество); =+28,1 (с=23, хлороформ); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — дихлорметан — ацетон 8:2, Rf=0,64. Вычислено, X: С 53,73; Н 4,51; N 4,64; Br 13,23. С Н Oq _#_z Вг Нейдено, 7: С 53,90: Н 4,60; N 4,59; Br 13,00. Получают также 161 мг (15,07) 8-аномера (стекловидное твердое вещество),(оа1 =-6,8 (с=0,47, хлороформ); ТСХ: как k -аномер, Rf=0,52. Вычислено, 7: С 53,73; Н 4,51; N 4,64; Br 13,24. С Н 09 М Вг 1 6 Найдено, X: С 53,73; Н 4,47; N 4,70; Br 13,36. Пример 22. 9(2,3,4,6-Тетра-Оацетил-,P-D-глюкопиранозил-амино)— акридин. К 971 мг (5.10 моль) 9-амино-акридина добавляют 100 мл бензола и 100 мл нитрометана. Затем при атмосферном давлении выпаривают половину растворителя. Остаток охлаждают до 60 С и смешивают с 18 мг (5 10 моль) НяВг,, 1516 мг (6 .10 моль) Hg(CN) - з Я. и 2467 мг (6 10 моль) ацетобромглюкозы. Реакционную смесь .перемешивают о при 60 С 36 ч. После 24-го часа добавляют 632 мг (2,5 10 моль) Нд(СИ) и 1028 мг (2,5 10 моль) ацетобромглюкозы. После охлаждения производят фильтрование и остаток промывают дихлорметаном (4 20 мл). Соединенные фильтраты выпаривают. Остаток растворяют в 200 мл дихлорметана, раствор промывают сначала 57-ным раствором KI, (2i30 мл), затем вода (2 30 мл) и после сушки на сульфате натрия выпаривают. Продукт очищают на 150 г силикагеля смесью дихлорметана и этилацетата в отношении 6:4 хроматографией на колонне. Получают 660 мг (25,27) твердой пены; (eLJ =+16,6 (c=0,79, хлороформ); ТСХ: силикагель 60 F 254, элюент — дихлорметан: этийацетат 6:4; Rf=0,22 ° Вычислено, 7: С 61,83; Н 5,38; N 5,34. Сл Н ОзНг Найдено, 7.: С 61,70; Н 5,44; N 5,35. П р.и м е р 23. 2-Бром-9-(-0-глюкопиранозил-амино)-акридин. 100 мг 2-бром-9-(2,3,4,6-тетра-Оацетил-P-D-глюкопиранозил-амино)-акридина растворяют в 20 мл абсолютного метанола. Раствор смешивают с 2 мг метилата натрия. Смесь оставляют на ночь, затем нейтрализуют ионообменной смолой — амберлитом 1 P 120 (Н-форма), фильтруют и выпаривают приблизительно до 3 мл. Добавляют 3 мл этилацетата и 18 мл простого эфира, выпадает осадок. Последний фильтруют и основательно растирают сначала с 5 мл этилацетата, затем с 2 10 мл простого эфира. Продукт представляет желтый порошок. 15 готовленной из ацетона и воды в от20 .ношении 9:1, при постоянном переме25 Выход 56 мг (77,6X); т. разл. 170 C;(0L) =+41,9 (с=0,41, диметилформамиц); ТСХ: DC-Alurolle, силикагель 60 F 254, изделие 5562, Мерк, элюент — н-бутанол, метанол и вода в отношении 4:2:1; Rf=O,?9. Вычислено, 7: С 52,43; Н 4,40; N 6 44; Br 18,36. С„Н„О,1 1,Вг Найдено, 7.: С 52,81; Н 4,31; N 6,29; Br 18,11. Пример 24. 9-Амино-2,7-ди, $ -D-глюкопиранозил-амино)-акридингидрохлорид., 50 мг 2,7,9-триамино-акридина и 200 мг D-глюкозы-моногидрата кипятят в смеси растворителей (30 мл), пришивании в течение 10 мин. Затем добавляют 3 капли 2 н. соляной кислоты и кипятят IO мин. Осажденный продукт отделяют декантированием, затем растворяют в 2 мл воды и снова осаждают ацетоном. Переосаждение повторяется еще 2 раза. Получают 45 мг желтовато-коричневого аморфного вещества; т.пл. 210 С (разл.); (К) =-59,3 (c=0,35, вода); ТСХ: силикагель 60 F 254, растворитель ацетон и 257-ный раствор NH в отношении 7:3, Rf 0,08..Вычислено, 7.: С 51,33; Н 5,58; N 9,58. С Н О„И„С1 (MM 585, 01) Найдено, Х: С 51,88; Н 5,62; N 9,45. Пример 25. 9-Амино-2-(a,P-Dглюкопираноз ил-амино) — 7-нитроакридингидрохлорид. 700 мг 2,9-диамино-7-нитро-акридина и 700 мг D-глюкозы-моногидрата кипятят в 30 мл смеси ацетона и воды (9:1) при перемешивании в течение 10 мин. После добавления 3 капель 2 н. соляной кислоты кипятят смесь ,еще 10 мин и затем отделяют осадок. Остаток растворяют в 15 мл кипящей воды и продукт снова осаждают при помощи 100 мл ацетона. Сырой продукт содержит еще немного глюкозы и исходного вещества и поэтому ею еще два раза переосаждают. Получают 152 мг хроматографически однородного аморфного красно-бурого о конечного продукта; т.пл. выше 220 С; (разл.); jeJ =-229,3 (с=О,IO; диме1346045 Таблица 1 Концентрация, мг/мл Соединение предельная тормозящая токсическая 0,781 1,563 6,25 1,563 6,25 0,781 акридинхлорид 0,195 0,390 1,563 0,390 0,781 3,125 О,!95 0,390 1,563 3-Амино†.(g,L-рамнопиранозил-амино) -акридин 0,195 OÄ390 1,563 тилформамид); ТСХ: силикагель 60 Р 254, ацетон и 25Х-ный раствор NH в отношении 7:3; Rf0,52. Вычислено, 7: С 50,39; H 4,57, N 12,37. С Н, 0 N4Cl (MM 452,85) Найдено, 7: С 50,50; Н 4,551 И 12,20. Фармакологические исследования. Противоопухолевые свойства аминоакридин-N-глюкозидов. Для опытов в пробирке применяли выделенную из мышей вызванную метилхлорантреном клеточную линию фибросаркомы-А (Ph. Мс, SI-, недифференцированная полиморфная сильно злока.чественная опухоль). Исследуемые соединения растворяли в питательной среде PM 1 1640 (10X телячьей сыворотки, 0,63 мг/мл глутамина, 0,1 мг/мл гентамицина и 5 « «1О моль 2-меркаптоэтанола). Ра.створы, содержащие 1 мг/мл активного вещества, фильтровали до стерильного состояния. Из этих штаммовых растворов готовили серии разведения от 50,00 до 0,024 мг/мл. Опыты производили при условиях стерильной тканевой культуры в сосудах,которые имеют 96 углублений, в первый ряд последних вводили растворы с концентрацией 0,05 мг/мл. В каж3,6-Ди-(13-D-глюкопира— нозил-амино)-10-N-метилакридинхлорид 3-Амино-(P-D-ãëþêîïèðàнозил-амино)-10-N — метил— 3,6-Ди-(P-D-глюкопиранозил-амино)-акридин 3,6 — Ди-(P †лактопиранозил-амино)-акридин 3,6-Ди-()-D-галактопиранозил-амино)-акридин дое углубление вносили 3 10 клетки (жизнеспособное количество клеток).. На 3-й день, т.е, к концу периода экспоненциального увеличения числа клеток, клетки подсчитывали в камере Бюркера (в контрольных сосудах к этому моменту количество клеток увель чилось приблизительно в десять раз). Тормозящими рост считали такие разведения, при которых по прошествии 3 дней выживало менее BOX содержащихся в контрольных сосудах клеток. В каждой серии разведения можно было наблюдать токсическую концентрацию (ни одной живой клетки), затем концентрацию, при которой появлялось торможение роста (менее 80Х контрольных — торможение), и при самых сильных разведениях — нейтральную концентрацию, при которой нельзя было установить никакой разницы с контрольными. Зти концентрации являются различными для каждого из исследованных соединений, но все соединения показывают хорошее тормозящее опухоль действие. Результаты эксперимента приведены в табл. I. Введение одного или нескольких саЗ0 харных остатков благоприятно влияет на токсичность соединений. Результаты измерений токсичности осуществленные на CPLP-мышах (самках) представлены в табл. 2. 1346045 20 Продолжение табл.1 Концентрация, мг/мл Соединение предельная тормозящая токси ческая 6,25 l2,50 25,00 1,563 3,125 25,00 0,195 0,390 1,563 6,25 12,50 25,00 Т а блица 2 Соединение мг/Kr 3,6-Диаминоакридин 65 280 60 3,6-Диамино-lO-метилакридин-диглюкозид 210 Составитель Ю. Белоусов Редактор Л. Веселовская Техред Л.Сердюкова Корректор Н. Король Заказ 4935/57 Тираж 347 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4, 3- (P -D-Глюк оп ирано з иламино) -6- (Ы -L-рамнопиранозил-амино) -10-метилакридин-HC 1 3,6-Ди-(g L-рамнопиранозил-амино)-10-N-метилакридинхлорид 3,6-Ди-(I-L-галактопиранозил-амино)-!О-N-метилакридинхлорнд 3,6-Ди-(ф-лактозил-амино)-10-метилакридинхлорид 3,6-Диаминоакридин-диглюкозид 3,6-Диамино-10-метилакридин интрапе- внутриритонеаль- венно но