Колориметрический способ определения количества фосфолипидов в хроматографических фракциях в тонком слое силикагеля

Авторы патента:

G01N30/90 - плоскостная хроматография, например хроматография в тонком слое или бумажная хроматография

Изобретение относится к колориметрическим методам определения фосфолипидов в хроматографических фракциях в слое силикагеля и может быть использовано в клинической, экспериментальной и технической биохимии. Целью изобретения является упрощение и ускорение способа определения фосфолипидов в хроматографических фракциях в тонком слое силикагеля, что достигается непосредственным окрашиванием фосфолйшадов в присутствии силикагеля. Способ включает обработку анализируемой фракции фосфолипидов вместе с силикагелем в центрифужной цробиркё 0,03-0,1 мл 0,5-2%- ного водного раствора дезоксихолата, смесью хлороформа и метанола (1:0,8):

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК (19) (И) (5g 4 С 01 N 30/90

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н A ВТОРСНОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЬПЪЙ (21) 4048004/31-25 (22) 25.04.86 (46) 23.01.88. Бюл. М 3 (71) Харьковский государственный университет им. А. М. Горького (72) В.В. Лемешко и A.Ï. Листопад (53) 543.544(088.8) (56) Кирхнер В. Тонкослойная хроматография. вЂ” N.: Мир, 1981, т. 2, с.99.

Journal of ЬдиЫ Research, 14, 1973, р, 695-697. (54) КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИИ СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ФОСФОЛИПИДОВ В ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИХ ФРАКЦИЯХ В ТОНКОМ

СЛОЕ СИЛИКАГЕЛЯ (57) Изобретение относится к колориметрическим методам определения фосфолипидов в хроматографических фракциях в слое силикагеля и может быть использовано в клинической, экспери.ментальной и технической биохимии.

Целью изобретения является упрощение и ускорение способа определения фосфолипидов в хроматографических фракциях в тонком слое силикагеля, что достигается непосредственным окрашиванием фосфолипидов в присутствии силикагеля. Способ включает обработку анализируемой фракции фосфолипидов вместе с силикагелем в центрифужной цробирке 0,03-0,1 мл 0,5-2Хного водного раствора деэоксихолата, смесью хлороформа и метанола (1:0,8): (1: 1,5) в количестве О, 3-0,5 мл и после перемешивания еще одну обработку 0,2-0,27 мл 0,5-2Х-ного водного Е раствора дезоксихолата с последующими окрашиванием фосфолипидов молибденовым реагентом и фотометрированием С, хлороформной фазы.

Формула изобретения

Султанович

Корректор В. Гирняк

Заказ 285/46 Тираж 847

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

13687

Изобретение относится к аналитической химии и к определению фосфолипидов в хроматографических фракциях в слое силикагеля. 5

Целью изобретения является упрощение и ускорение способа опреде-. ления.

Способ осуществляется следующим образом. 10

Обнаруженные на хроматографических пластинах пятна фосфолипидов вырезают ножницами .(в случае силуфоловых пластинок с алюминиевой подложкой) или соскабливают (в случае подложки из стекла).и помещают анализируемую пробу в центрифужную пробирку. Силикагель смачивают 0,03-0,1 мл

0,5-2 -ного водного раствора дезоксихолата, отслаивают стеклянной палоч- 20 кой силикагель (в случае силуфоловых пластинок), добавляют 0,3-0,5 мл смеси хлороформ:метанол (1:0,8):(1:

1,5), встряхивают, добавляют 0,20,27 мл 0,5-2 -ного водного раствора дезоксихолата, встряхивают, вынимают фольгу (в случае силуфоловых пластинок), добавляют 0,6 мл концентрированного молибденового реагента, встряхивают, добавляют 1 мл З0 хлороформа (или другой объем в зависимости от требуемой чувствительности), встряхивают и определяют оптическую плотность нижней хлороформной фазы при длине волны 700-715 нм. Оп- 35 ределение концентрации фосфолипида проводят по калибровочному графику.

Пример. Количественное определение различных фосфолипидов. 40

Участок силуфоловой пластины, содержащий фракцию фосфолипида, вырезают ножницами и переносят в центриСоставитель Ю.

Редактор О. Юрковецкая Техред М.Дидык

79 2 фужную пробирку. Силикагель смачивают 0,05 мл 1 -ного водного раствора дезоксихолата, отслаивают силикагель от пластины, добавляют 0,4 мл смеси хлороформ: метанол (1: 1), встряхивают, вынимают фольгу, добавляют

0,6 мл молибденового реагента, встряхивают, добавляют 1 мл хлороформа, встряхивают, центрифугируют при

3000 об/мин в течение 5 мин и определяют оптическую плотность нижней хлороформной фазы при длине волны

710 нм.

Процент обнаружения индивидуальных фосфолипидов и смесей значимо неотличен от 100% что позволяет применять предлагаемый способ для количественного определения разнообразных фосфолипидов.

Колориметрический способ определения количества фосфолипидов в хроматографических фракциях в тонком слое силикагеля, включающий зкстракцию анализируемого материала, окрашивание молибденовым реагентом и фотометрирование, отличающийся тем, что, с целью упрощения и ускорения способа определения, силикагель, содержащий анализируемую фракцию фосфолипидов, обрабатывают 0,030,1 мл 0,5-2 -ного водного раствора дезоксихолата, затем добавляют 0,30,5 мл смеси хлороформ:метанол (1:

0,8):(1:1,5), полученную смесь перемешивают, добавляют 0,2-0,27 мл 0,52%-ного водного раствора дезоксихолата, после перемешивания смеси вводят молибденовый реагент и фотометрируют нижнюю хлороформную фазу.

Изобретение относится к пищевой промышленности и может быть использовано для определения в злаках и продуктах их переработки токсичных з агрязнений, в частности деЭоксиниваленола

Способ анализа примесей в препаратах арсеназо ш // 1363063

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения примесей в препаратах арсеназо Ш методом тонкослойной хроматографии

Способ определения удельной поверхности платины,иридия, рутения или родия,нанесенных на оксид алюминия // 1334076

Изобретение относится к анали-v тической химии, а именно к способам определения удельной поверхности металла хроматографическими методами , и может быть использовано для повышения точности определения характеристик катализаторов

Способ определения суммарного содержания нефтепродуктов в воде // 1330555

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к определению суммарного содержания нефтепродуктов в природной воде и сточных водах

Способ приготовления пластин для тонкослойной хроматографии сахаров и компонентов нуклеиновых кислот // 1318906

Изобретение относится к аналитической химии и может быть исполь зовано для анализа смесей органических соединений, преимущественно сахаров и компонентов нуклеиновых кислот

Испаритель для хроматографа // 1318905

Изобретение относится к парафазной хроматографии и может быть использовано в аналитическом контроле технологических процессов, для анализа загрязнения воздуха в химической , нефтехимической, полиграфической , деревообрабатываюшей и других отраслях промьшшенности, а также в медицине, биологии и др

Способ определения о-нитробензойной кислоты // 1314259

Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к хроматографическому определению о-нитробензойной кислоты (о-НБК)

Способ определения молекулярных масс олигоизобутиленов // 1312481

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано при хроматографическом анализе полимеров для определения молекулярных масс олигоизобутиленов

Способ определения свинца,цинка,алюминия и меди методом пиковой бумажной хроматографии // 1308894

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения свинца

Способ определения диизоцианатов // 1293646

Изобретение относится к области аналитической химии, в частности к определению диизоцианатов (ДЦ) и может использоваться для контроля за содержанием 2,4-, 2,6-толуилени 4,4 -дифенилметандиизоцианатов в воздухе или воде

Способ определения раундапа в биологических объектах // 2105973

Изобретение относится к определению остаточных количеств гербицида в продуктах животного происхождения

Способ раздельного определения о-хлорфенола и 2,6- дихлорфенола // 2151391

Изобретение относится к области химического анализа и может быть использовано для определения концентраций о-хлорфенола и 2,6-дихлорфенола в воздухе при санитарно-гигиенических исследованиях на содержание хлорфенолов

Способ совместного определения ионов металлов в объектах окружающей среды // 2173455

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано в металлургии, химической индустрии, экологии, медицине, пищевой промышленности

Способ проведения проточной тонкослойной хроматографии и устройство для его реализации // 2216018

Изобретение относится к аналитической химии и может найти применение в аналитических лабораториях

Способ диагностики нейросифилиса // 2230323

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии и дерматологии

Способ определения окисленных метаболитов триптофана при эндогенной интоксикации // 2249219

Изобретение относится к области медицины, а именно к биохимии

Способ идентификации ароматических гидроксисульфокислот // 2258925

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений и может быть рекомендовано для идентификации гидроксисульфокислот (2-нафтол-6-сульфокислоты, 1-нафтол-3,8-дисульфокислоты, 2-нафтол-6,8-дисульфокислоты, 1-амино-2-нафтол-4-сульфокислоты, 1-амино-8-нафтол-3,6-дисульфокислоты, 5-аминосульфосалициловой) при анализе сточных вод производства азокрасителей

Способ определения качественного состава органических веществ в объектах окружающей среды // 2299432

Изобретение относится к области химического анализа и может быть использовано для определения качественного состава органических веществ в объектах на основе органической матрицы: в осадках избыточного активного ила промышленных и коммунальных биологических очистных сооружений, в донных отложениях водных объектов, в органоминеральных удобрениях и почвах при экологических и санитарно-химических исследованиях

Способ определения n-(бензимидазолил-2)-о-метилкарбамата в биологическом материале // 2300765

Изобретение относится к биологии, токсикологической и ветеринарной химии, а именно к способам определения N-(бензимидазолил-2)-O-метилкарбамата в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций, химико-токсикологических и ветеринарных лабораторий

Способ оценки качества антоцианового красителя, полученного бескислотным способом // 2306557

Изобретение относится к области исследования материалов химическими способами, а именно путем хроматографии, и может найти применение при оценке качества антоциановых красителей, полученных безкислотным способом из растительного сырья, в фармацевтической, ликероводочной и других отраслях пищевой промышленности