Способ получения 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)-9н-пурина (его варианты)

 

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)- -9Н-пурина (АП) - биологически активного вещества, которое может быть использовано в ветеринарии и медицине . Цель - создание более активных и малотоксичных веществ. Синтез АП ведут: а) из 2-амино-6-хлор-9- - 2-бензоилоксиэтоксинетш1 пурина, который гидрируют в среде абсолютного этанола в присутствии 5% Pd/C с последукщим удалением бензоильной группы обработкой ацетиламином; б) из 2-ацетамидо-9-(2-ацетоксиэтоксиметил)-6-меркапто-9Н-пурина, который гидрируют на никеле Ренея при кипячении. АП имеет т. пл. 186- 187,5°С. Испытания АП показывают его противовирусное действие и низкую токсичность - LDjo 3100 мг/кг. 2 с.п. ф-лы, 3 табл. СО

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

COI

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н ПАТЕНТУ

Б1, 1 i

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3760751/23-04 (62) 3657077/23-04 (22) 16.07.84 (23) 13.10 ° 83 (31) 434393 (32) 14.10.82 (33) US (46) 07.02.88. Бюл. Ф 5 (71) Дзе Веллкам Фаундейшн Лимитед (vs) (72) Ховард Джон Шаффер, Томас Энтони Кренитски и Лилиа Мария Бьюгемп (US) (53) 547. 857. 04. 07 (088. 8 ) (56) Патент Великобритании

Ф 1523865, кл. С 07 D 473/00, опублик. 1978. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 2-АМИНО-9-(2-ОКСИЭТОКСИМЕТИЛ)-9Н-ПУРИНА (ЕГО

ВАРИАНTbI) „SU „„1373323 А 3

1511 4 С 07 Р 473/32, А 61 К 31/52 (57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения 2-амико-9-(2-оксиэтоксиметил)"9Н-пурина (АП) — биологически активного вещества, которое может быть использовано в ветеринарии и медицине. Цель - создание более активных и малотоксичных веществ, Синтез

АП ведут: а) из 2-амино-6-хлор-9-(2-бензоилоксиэтоксиметил) пурина, который гидрируют в среде абсолютного этанола в присутствии 5Х Рй/С с последуюшим удалением бензоильной группы обработкой ацетиламином; б) иэ 2-ацетамидо-9-(2-ацетоксиэток" симетил)-б-меркапто-9Н-пурина, который гидрируют на никеле Ренея при кипячении. АП имеет т. пл. 186187,5 С. Испытания АП показывают

его противовирусное действие и низкую токсичность - LD > 3100 мг/кг.

2 с.п. ф-лы, 3 табл.

) 373323

Изобретение относится к способу получения 2"амино"9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурина — нового биологически активного соединения, которое может найти применение в медицине и ветеринарии.

Цель изобретения — поиск новых производных в ряду пурина, малотоксичных и обладающих более высокой антивирусной активностью.

Пример 1. 2-Амино-9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурин.

Смесь 2,48 г (7,13 мМ) 2-амино-6-хлор-9-(2-бензоилоксиэтоксиметил) 15 пурина, 250 мл абсолютного этанола, 1,9 мл триэтиламина и 0,6 г 57. палладия на активированном угле встряхивают в среде водорода при начальном давлении 3,52 кг/см при комнат- 20

2 ной температуре в течение 20 ч, фильтруют, к фильтрату добавляют

0,265 г свежего палладиевого катализатора и 1,9 мл триэтиламина и смесь встряхивают в среде водорода еще в 25 течение 16 ч °

Этанольный раствор после фильтрования через фильтр из целита упаривают под вакуумом и полученный белый остаток экстрагируют кипящим бензо- 30 лом несколько раз. Объединенные бензольные экстракты, содержащие 2-амико-9-(2-бензоилоксиэтоксиметил)-9Нпурин, концентрируют, добавляют

20 мл 403-ного водного метиламина н

20 мл метанола и упаривают в открытой колбе на паровой бане досуха.

Полученную смесь растирают с диэтиловым эфиром для удаления N-метилбензамида, а затем перекристаллизовыва- 40 ют из )007 этанола, получают 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурин в виде аналитически чистых гранул, т. пл. ) 86-187, 5 С.

Пример 2. 2-Ацетамидо-9-ацетил-б-меркапто-9Н-пурин.

Смесь тиогуанидина (54,0 г), уксусного ангидрида (250 мл) и и-толуиленсульфоновой кислоты (2,0 r) ки" пятят в течение ночи, Реакционную смесь охлаждают, образовавшееся твердое вещество отфильтровывают, тщательно промывают ацетоном> получают

2-ацетамидо-9-ацетил-6-меркапто-9Нпурин (62,3 г) в виде коричневого твердого вещества, спектр ЯМР соответствует описанной структуре.

2-Ацетамидо-9-(2-ацетоксиэтоксиметил)-6-меркапто-9Н-пурин.

К смеси 2-ацетамидо-9-ацетил-6-меркапто"9Н-пурина (30,0 r) и и-толуиленсульфоновой кислоты (2,0 г) в толуоле (150 мл) по каплям добавляют в течение 4 ч при 90-95 С 2-окси-1,4-бутандиол диацетат (40,0 r).

Через 10 ч реакционную смесь охлаждают и образовавшееся твердое вещеcòBî отфильтровывают и промывают ацетоном. Перекристаллизовывают из диметилформамида/ацетонитрила (1/1) с обесцвечиванием при использовании активированного угля. Получают 2-ацетамидо-9-(2-ацетоксиэтоксиметил)-6-меркапто-9Н-пурин (25,6 г) в виде желтого вещества, т. пл. 205206 С.

2-Амино»9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурин.

2-Ацетамидо-9-(2-ацетоксиэтоксиметил)-6-меркапто-9Н-пурин (0,50 г, 1 53 ммоль), свежеприготовленный никель Ренея W-2 (2 г) и 58Х-ный гидроксид аммония (25 мл) кипятят

2 ч. Катализатор отфильтровывают и фильтрат упаривают до 5 мл, добавляют ацетон (20 мл) и выпавший осадок отфильтровывают и сушат. Получают 0,21 г (652) белого кристаллического вещества, по данным ТСХ и

ЯМР соответствующего аутентичному образцу, т ° пл. 188-189 С.

Проведены биологические испытания 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурина (6-деоксиацикловира).

Следующие опыты были проведены с целью определенчя уровней содержания в моче и плазме ацикловира (известного соединения) после орального дозированного введения его крысам и 6-деоксиацикловира (предлагаемого соединения).

Методика проведения экспериментов, Крысам (мужские особи длинных крыс Эванса) дозированно вводят с помощью внутрикишечной иглы препарат и помещают их в метаболические клетки, где происходит разделение мочи и фекалиев. Образцы собранной мочи и плазмы анализируют на содержание ацикловира методом радиоиммунопробы.

Показано, что 6-деоксиацикловир не взаимодействует с антисывороткой, используемой при проведении этой пробы.

В табл. 1 дано содержание ацикловира в моче после орального дози1373323 рованного введения крысам ацикловира, аминоацикловира и 6-деоксиацикловира.

В табл. 2 дано сравнительное со- 5 держание в плазме ацикловира после орального дозированного введения крысам 6-деоксиацикловира и аминоацикловира.

Изучение токсичности. Четырем собакам Бигля (две женские особи и две мужские) давали 6-деоксиацикловир per. os. (один раэ в день в течение пяти дней) в количестве

40 мг/кг в день. Отрицательного воз15 действия на одну мужскую и одну женскую особи не обнаружено после их умерщвления в конце периода введения препарата и на одну мужскую и одну женскую особи после их умерщвле20 ния через две недели после окончания введения препарата. LD, 6-деоксиацикловира ) 3100 мг/кг.

Противовирусное действие. 70 мышей СДТ инфицируют вирусом герпес типа I штамма ICI 300 LD, введя внутрицеребрально 0,025 мл. Мышей разделяют на группы по десять в каждой, одну группу оставляют в качестве контрольной, не зараженной вирусом, а остальным группам вводят соответственно ацикловир в дозировке

100 мг/кг (I) подкожно (s.ñ.), (II) орально, (III) внутрибрюшинно (i.р.) и соединение примера 1 (6"деоксиацик- 35 ловир) в дозировке 100 мг/кг (?) подкожно (s.с.), (II) орально, (III) внутрибрюшинно (i,р.). Опытные группы получают дозы препарата через

2-3 ч после инфицирования и дважды 40 в день в течение четырех дней. Оценку производят через 14 дней и фиксируют время выживания.

Полученные результаты представлены в табл. 3. 45

Таким образом, йолученные резуль( таты показывают, что 6-деоксиацикловир, полученный предлагаемым способом и его вариантом, при сохранении низкой токсичности обладает более 50 высокой антивирусной активностью, чем известное соединение (ацикловир) при оральном введении.

Формула изобретения55

1. Способ получения 2-амино-9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурина формулы!

СН20СН2СН20Н отличающийся тем, что производные пурина общей формулы (где М вЂ” Cl;

G - NH

R — - бензоил, подвергают каталитическому гидрированию в среде абсолютного этанола в присутствии 5Х Рй на активированном угле с последующим удалением бенэоильной группы взаимодейстг ем с ацетиламином, 2. Способ получения 2-амико-9-(2-оксиэтоксиметил)-9Н-пурина формулы отлич ающийся тем, что производное пурина формулы

СН20СН 2СН2 ОР где G — группа СН CONH;

М-SH

R — СОСН,, подвергают гидрированию над Ni-Pe« нея, Таблица 1 е, 7, в е азцы, ч

6-деоксиацикло вира

67,0

69, 1(1)

0,3(1) 0-24

24-48

0-24

24-48

0-48

25

19, 2(4) Примечание. Вскобках даны номера животных.

1373323

Т а б л и ц а 2

Концентрация ацикловира в плаэме

Время после

Крыса 3

Крыса 1

0,5

2,75

3,03

18,6

2,48

I7,5

6,7

0,93

0,34

4,06

0,1

0,25

Та блица 3

Группа

Время выживания ния

Контрольная 4+2 1+2+5+3

0,407

3+3 4+4 2+4 1+6

0,261

6-деоксиацикловира (s.c.) I+2 3+3 !+4 2+4 2+5

0,289 ацикловира (орально) 2+2 3+3 5+4

6-деоксиацикловира (орально) 0,325

0,186 а ци кло вир а (i.р.) 0,242

6-деоксиацикловира (i,р.) 1+2+ 2+3 1+4 4+6 1+8

0,233 введения

20 мг/кг ч

Опытная при введении: ацикловира (s,с ° ) 6-Деоксиацикловир

1+2+ 1+4 2+5 3+6 1+8 (I выживание) 2+2 2+4 2+5 2+7 (1 выживание) Средняя об.ратная величина времени выжива