Способ получения макролидных соединений

 

Изобретение касается замещенных лактонов, в частности получения соединений общей формулы , где R - октагндроазоцин-1-ил; 4 -фенилпиперидин-1-ил; гексагидрразепин-1-ил; 1 -азаспиро (4,5) дец-1 1,2,3,4-тетрагйдрохинолин-1-ил; 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2-ил; 1 ,2,3,4-тетрагидропиридин-1-ил; пирролидин-1-ил; азациклотридецин-1-ил; 3-азабицикло .

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К IlATEHTV формулы

СН3 — 0- 0Н

СН3

R - группа формулы

СН3 0

Н0 0 —

Н3С0 ОСН или (4 () HOH 0@ 0СН3 и.д с

Н,СН,С

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3641764/23-04 (22) 08.09.83 (31) 417247 (32) 13.09,82 (33) US (46) 15.02.88. Бюл. У 6 (71) Эли Липли энд Компани (US) (72) Мануэль Дебоно,и Герберт Эндрю

Кирст (US) (53) 547.368.07(088,8) (56) Патент США 11 3178341, кл. 424 — 120, опублик. 1965.

Патент США и 3326750, кл. 424 — 120, опублик. 1967. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ МАКРОЛИДНЫХ

СОЕДИНЕНИЙ (57) Изобретение касается запрещенных лактонов, в частности получения соединений общей формулы -CH

R — октагидроазоцин-1-ил; 4-фенилпинеридин-1-ил; гексагидроазепин-1-ил;

l-азаспиро(4,5)дец-l-ил 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-1-ил; Т,2,3,4-тетра- гидроизохинолин-2-ил; 1,2,3,4-тетра- гидропиридин-1-ил; пирролидин-I--ил; азациклотридецин- 1-ил; 3-азабицикло (2,3,2)нон-3-ил; 1,3,3-трнметил-базабицикло (3, 2, 1) окт-6-ил; цис" и транс- 3 5-диметилпиперидин-1-ил;

„,SU „„1.375135 A 3 (58 4 С 07 D 313/00, 309/36 315/00

Р.1 — Н, ОН или микрозилоксигруппа которые обладают антимикробной активностью. Цель изобретения — создание более активных веществ указанного класса. Их синтез ведут восстацовлением альдегида АСН СН = О боргидридом или цианборгидридом натрия в присутствии амина RH (в которых А и R указаны выше) в среде С, — алканола при комнатной температуре. Новые макролидные вещества в сравнении с десмикозином имеют токсичность в 2 раза выше (200 и 94,5 мг/кг), но это компенсируется лучшей антимикробной активностью в отношении Stuphococcos

pyogihes u Pasteurella у цыплят: эффективная доза до 6,3 мг/кг (орально ) против 84,1 мг/кг для десмикозина.

3 табл.

1375135

АСН,СН Rt где А1О

Он

R;(:H снэсн

%Сийг

0Н

СН3 1

15

20:25:0,5 М (2 л). Фракции, содержащие требуемый продукт, идентифицируют ме25

СНэ

-О ОИ о сн

30 та натрия и очищают, как ранее с применением силикагельной колонки с наR2 сН3 О СН3 О

НΠΠ— ИЛИ НΠΠ— 35

СН30 ОСНз НО, ОСНэ обладающих антимикробной активностью.

Целью изобретения является разра- 40 ботка способа получения новых макролидных соединений с повышенной антимикробной активностью.

Пример 1. 20-ДН-ДО-20-(Гексагидроазепин-1-ил)десмикозин 2045

ДН-ДО-20 — здесь и далее обозначает

20 — дигидро-20-деэокси-; десмикоэинАСНАР СНО, где R, — микарозилокси

R — Ь, Десмикозин (10 r, 13 ммоль), растворенный в безводном метаноле 100 ìë быстро добавляют к раствору цианбор- гидрида натрия (3,3 r 52 ммоль) и гексаметиленимина (6,5 г, 7,5 мл, 65 Ммоль) в безводном метаноле (50мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь

55 перемешивают в атмосфере азота при комнатной температуре в течение приблизительно 3 ч, а затем выпаривают

Изобретение относится к способу получения макролидных соединений общей формулы

Rp- октагидроазоцин-l-ил, 4-фенилпиперидин-l-ил, гексагидроаэепин-!-ил, l-аэаспиро(4,5)дец-l-ил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолин-l-ил, 1,2,3,4-тетра-.. гидроизохинолин-2-ил, 1,2,3,6-.тетрагидропиридин-1-ил, пирролидин-l-ил, азациклотридецин-l-ил, 3-азабицикло(3,2,2)-ион-3-ил, 1,3,3-триметил-6азабицикло(3,2,1)окт-б-ил, цис, — и транс-3,5-диметилпиперидин-1-ил, R — водород, гидроксил или микароэилокси при пониженном давлении, Полученный остаток растворяют в метиленхлориде ровно с таким количеством этилацетата, чтобы растворить остаток и этот раствор экстрагируют насьпценным раствором бикарбоната натрия. Органический слой отделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают при пониженном давлении и получают светло-желтую пену, Эту пену очищают методом хроматографии на силикагеле, элюируют сначала метиленхлоридом (1 л), затем ступенчато 500-мл порциями смеси метиленхлорид/метанол в соотношениях: 98:2; 96:4; 94:6; 92:8 и 9:1 ив завершение, смесями метиленхлорид (метанол) гидроксид аммония в соотношениях: 90:10:0,5(500 мл) и 75: тодом ТСХ, соединяют и выпаривают досуха. Получают 6,035 г (7,07 ммоль)

20-ДН-ДО-20 (гексагидроаэепин-1-ил) десмикозина в виде белой пены. Другие фракции, которые содержат нечистый продукт соединяют, повторно растворяют в метиленхлориде, снова экстрагируют насьпценным раствором бикарбонасадкой метиленхлорид/метанол (9:1) и элюированием метиленхлорид/метанол/ гидроксид аммония в следующих соотношениях: 90:10:0,5 (500 мл) и 80:20:

:0,5 (1 л), Получают дополнительно

l,372 г (1,61 ммоль) продукта. Общий выход 20-ДН-ДО-20 — (гексагидроаэепин-1-ил) десмикозина 7,407 r (8,68 ммоль, 677).

Пример 2 ° 20 — ДН-ДО-4-(4-Фенилпиперидин-1-ил) десмикозин.

Десмикозин (1,5 г, 2 ммоль) растворяют в абсолютном метаноле (60 мл) и обрабатывают 4-фенилпиперидином (640 мг, 4 ммоль) в присутствии молярного сита Linde 4А. Через 30 мин добавляют NaBH>CN (500 мл, 8 ммоль) и смесь перемешивают в течение 2,5 .ч при комнатной температуре. Смесь выливают в насьпценный раствор бикарбоната натрия (200 мл) и эктрагируют метиленхлоридом (Зх200 мл). Соединенные экстракты сушат над сульфатом натрия, фильтруют и вьп аривают при пониженном давлении. Остаток (3,6 г) очищают методом экспрессхроматографии на силикагеле, элюируя градиентом от 1 л метиленхлорида до 1 л ме1375135 танола/метиленхлорид (5:95), затем

1 л метанол/метиленхлорид (5:95).

Фракции, содержащие требуемый про-, дукт, идентифицируют при помощи ТСХ, соединяют и выпаривают досуха, получают 680 мг 20-ДН-ДО-20- 4-фенилпиперидин — 1 — èë десмикозина.

Пример 3. 20-ДН-ДО-20-(Гек( сагидроазепин -1-ил)-4 -дезоксидесми козин, Раствор 4-дезоксидесмикозина (565 мг, 0,75 ммоль) в метаноле (15 мл) в атмосфере аргона перемеши- . вают с активированным молекулярным ситом Linde 3A 2,2 г в течение

30 мин, затем добавляют гексаметиленимин (0,25 мл, 2,25 ммоль). Через

1 ч к реакционной смеси добавляют: цианборгидрид натрия (141 мг, 2,25 ммоль). Через 45 мин реакционную смесь выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом. Соединенные органичес-ю кие экстракты встряхивают с насыщен- 25 ным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, выпаривают и получают 600 мл сырого продукта, Этот продукт очищают методом препаративной тонкослойной хроматографии на силикагеле, элюируют смесью дихлорметан (метанол) концентрированный гидроксид аммония (90:15:, :2) и получают 150 мл (выход 24X )

20-ДН-ДО-20 — (гексагидроазепин-135 ил) -4, -дезоксидесмикозина, Пример 4. 20-ДН-ДО-20 — (Октагидроазоцин-1-ил)десмикозин.

Десмикозин (4,0 г, 5,2 ммоль) растворяют в абсолютном метаноле (30 мл) и обрабатывают гептаметиленимином (1,2 r, 1,3 мл, 10,4 ммоль) в присутствии молекулярного сита ЗА.

После окончания реакции смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной 45 температуре, затем быстро пипеткой, приливают раствор боргидрида натрия (60 мг, 1,6 ммоль) в абсолютном ме-таноле (10 мл ). Реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 ч при комнатной температуре, затем добавляют еще 30 мг боргидрида натрия (одну порцию в виде твердого вещества).

Реакционную смесь перемешивают еще в течение 75 мин и затем фильтруют.

Фильтрат выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в этилацетате (150 мл) и этот раствор экстрагируют водой (150 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (100 мл), Потом этилацетатный раст-. вор экстрагируют 0,5 M буферным раствором (150 мл). NaH

Буферный экстракт выпаривают в вакууме для удаления оставшегося этилацетата и затем быстро перемешивают при медленном добавлении 5 н.едкого натра получают густой белый осадок °

Белое твердое вещество удаляют фильтрованием, сушат и получают 3,55 r

20-ДН-ДО-20 — (октагидроазопин-1-ил) десмикозина.

Пример 5, 20-ДН-ДО-20 — (1Азаспиро)4,5-(декан-l-ил)десмикоэин.

Десмикозин (5,0 г, 6 5 ммоль) растворяют в абсолютном метаноле (50мл и обрабатывают 1-азаспиро(4;5)дека-. ном 31,36 r 9,8 ммоль в присутствии молекулярного сита 3А. Через 15 мин добавляют NaBH,CN (620 мл,9,8ммоль) и смесь перемешивают в течение 17 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в этилацетате (300 мл) и экстрагируют водой(300 мл и 100 мл). Затем продукт экстрагируют из этилацетатного раствора с буфером 0,5 М МаН РО4 с рН 6,5 (300 и 100 мл). Фосфатные буферные экстракты соединяют и выпаривают в вакууме для удаления оставшегося этилацетата, Затем фосфатнын буферный раствор быстро перемешивают при медленном добавлении 5 н, едкого натра и получают густой белый осадок. Белое твердое вещество отделяют фильтрованием, промывают водой, сушат и получают 20-ДН-ДО-20 — (1-азаспиро)

4,5-(декан-1-ил)десмикозин (3,52 r).

Пример 6. 20 — ДН-ДО-20-(1,2, 3,4-Тетрагидрохинолин-1-ил)десмико- . зин.

Десмикозин (11,6 r, 15 ммоль) растворяют в сухом метаноле (100 мл) и добавляют 1,2,3,4-тетрагидрохинолин (3,8 мл, 30 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в тече-.. ние .30 мин, а затем добавляют цианборгидрид натрия (1,25 r, 20 ммоль) °

Смесь перемешивают в течение ночи, после чего выпаривают при пониженном давлении. Остаток распределяют между этилацетатом и водой (по 100 мл каждого). Органический слой экстрагируют последовательно водным фосфатным буфером с рН 6,5- (100 мл) и водным фос1375135 фатным буфером с рН 4,5 (100 мл), Этилацетатный слой сушат над сульфатом натрия, фильтруют и.выпаривают, остаток (4,6 г) отделяют методом хромато- 5 графин на силикагеле. Колонку элюи- руют при линейном градиенте дихлорметана (4 л) и 5Х метанола плюс 0,5Х концентрированного гидроксида аммония в дихлорметане (4 л). Фракции, содер-10 жащие требуемый продукт, идентифицируют методом ТСХ, собирают, выпаривают досуха и получают 3,4 г укаэанного в заглавии соединения.

Пример 7. 20-ДН-ДО-20 — (1, 2,3,4 - Тетрагидроизохинолин-2-ил) десмикоэин..

Десмикозин (11,6 г, 15 ммоль) растворяют,в сухом метаноле (100 мл) и добавляют 1,2,3,4 — тетрагидроизохи- 20 колин (3,8 мл, 30 ммоль), После пере-. мешивания смеси в течение 30 мин при комнатной температуре добавляют цианоборгидрид натрия (1,25 г, 20.ммоль)

Смесь перемешивают в течение ночи, а 25 затем выпаривают при пониженном давлении. Остаток распределяют между этилацетатом и водой (по 150 мл каждого). Потом органический слой экстрагируют последовательно фосфатным буфером. с рН 6,5 (100 ) и фосфатным буфером с pH 4,5 (100 мл). Экстракт фосфатного буфера с рН 4,5 выпаривают при пониженном давлении для удаления этилацетата, после чего рН доводят до 10 путем добавления 5 н. гидроксида натрия. Выпавший осадок собирают, сушат На воздухе и получают

5,6 г укаэанного в заглавии соединения.

Пример 8. 20-ДН-ДО-20 - (1, 2,3,6 — Тетрагидропиридин-1-ил)десмикоэин, Десмикозин (11,6 г, 15 ммоль) .растворяют s безводном метаноле (100 мл) и добавляют ),2,3,6 — тетрагидропиридин (2,8 мл, 30 ммоль), После перемешивания в смеси в течение

30 мин при. комнатной температуре добавляют цианборгидрид натрия (1,25 1, 20 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, затем выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют . в этилацетате (150 мл) . Этот раствор экстрагируют водой (150 мл), потом водным фосфатным буфером с рН 6,5 (2х100 мл). Буферные растворы выпаривают отдельно при пониженном давлении для удаления этилацетата, saтем доводят . рН до 10 путем добавления 5 н.гидроксида натрия, Образовавшиеся осадки собирают фильтрованием, сушат на воздухе и получают 5,4 r (первый экстракт) и 3,2 г (второй экстракт) указанного в заглавии соединения.

Другие соединения получены аналогичным образом. Значения заместителей

К - R и физико-химические свойства полученных соединений представлены в табл.1.

N 00

° » A

О1 «У» м 1О а

° » ° » в . »»

1 Оi a 1 «3 O

1

I и

СЬ

Ю л

С31 031 Ch

° » Ю ° » A л 3 1 . л 0О ь ь

«Г3

3». 1

3.

М

Ф 1

М 1

D ь

»О ь

Ю ь

««3 ь ь ь ь ь. ь ь ь ь ь

ao n I л ««

Ц!»»О

I N N 1 сЧ» «Ч ь ь

«Г«

N ь ь ь

С4

« 3 «» 3 СЧ с» \ «Ч 1

СО оо 00 " = = л 00 0О

Ч .. 1 Ч СЧ I I I N СЧ N I

Р Ct

3. О к х л о в в оо

С 3 — ««3 «3 сО «3 СО 00 031 ао в 00 00 00. оi 00 I 00 00

Э. 03

13I и о, о ч

K .М о о

Е«H

Э Э Э

И и Ф о о о ф 1-» -»

Ф Э и Ф о о (-»

В о

Р» о

Cf, о

33«3 о э

Р» М

Й о

4 Е-» о э

Р М

Йо

4 Н

I ОО

1

I о

g у о ц

I 1 ! ф

Р

Е»

«33 (3

0 а

6 3.

1 13«I

I

1 ф D о ь

Р, О

g о о ь ь N

«« О 3 00 СП

СЧ

1

1 »

1 1.

1 1

1 1

1 н

1 Н I

1 1

1 I

Г 1

1 1

1 1 о ф о

Р»

Ц

34 ь

«Ч

«»Ъ

II о о

2 о

Р ц ф

Р»

a !

« 3 I0

° »

«Ч 3

-о

° 3О ж

»»

»

«Ч ФХ

Ф

«ч

° »

С 3 » ° Ь о -а .Ф х о

10.1375135! . !

1 ! j

Э

gl ,х л, ° Ь O

Ch Ch

С>

Ю сп 1 ь

00 I

С0

Ю л

1

1

1 о о а

CV

С)

D ь

СЧ ь ь о о

С4 о

СЧ

I !

<Ч

ОО

00

1 С4

1

1 а Оо

ai D

00 01

Ch О1 сО

00 00

Э Э и й о о

Е» Н

Ol Э и И о о!

» и о !

»!

I !

Ы о

Э Э

И !! о о !

-< Е»

Э Э Э и !! K о о о (-1: !- 1;- 1 й!

И1

Ю

С" ) С" ) сО . л co Cn

1 I à о 2 о а

t о и у

iI

C4 "

Н 1 а 5

Э с ) с6

g g у о ж

Ж Х <Ю

ЙП о

1

1375

Таблица 2

Соеди- Доза, мг/кг некие

Подкожно

ЭД „ 15

Таблица 3

Орально

Количество смертей . количег ство обработанных цыплят) Соединение

10

Подкожное введение препарата

Введение орально

30!

50

25 3

О/10

9/10

6,0

6/10

9/10

1,3

О/10

2/10

1,5

О/10

2/10. 2/10

О, 7

О/10

10

О/10

12

3/IO

7,5

О/10 10

6,3

2,0

1,0

7/10

3/10

40

О/110

5/10

2,9

8/10

2,5/IO

1,7

13

5/ 1.0

1,0

45

Десмикозин

0,8

7,98

0,625

Токсичность соединений 1 — 19 на0,88 10,93 ходится на сравнимом уровне или несколько более высоком, чем у известных препаратов того же действия. Так

84,1 ЛД-, для десмикозина 200 мг/кг (пе-.а рентально для мьппей) у соединения

17 — 94,5 мг/кг. Как видно из данных

Проверку антимикробной активности табл. 2 и 3, эффективность соединепо отношению к отрицательным бакте- ний 1-19 в оптимальных условиях знариям провели in vivo по отношению к чительне выше, чем у известного пре18

Десмикозин 1,03

Испытания антимикробной активности. Антимикробную активность исследовали in vivo no отношению к экспериментально вызванным инфекциям уподопытных животных. Значения ЭД, 5 (доза в мг/кг, обеспечивающая защиту

503;животных) для мьппей, зараженных

Stuptococcus Pyogenes С203 приведены в табл.2. Для сравнения даны данные для известного препарата — деамикозина.

135 !г инфекции Pasteurella у цыплят, зараженных подкожным введением 0,1 мл !

Π— разбавленной триптоз-бульонной культуры бактерии. В этом случае без введения препарата количество смертей составило IOOX (10 смертей на

10 обработанных цыплят) в течение

24 ч. В опытах препараты вводили подкожно в дозе 30 мг/кг через 1 и 4 ч после заражения, либо в виде водного раствора (2 г/галлон ) за 4-20 ч до разражения и в течение 3 дней после.

Результаты испытаний приведены в табл.3.

13 1375135 14 парата (соединения 15, 17 и 18 в тил-б-аэабицикло(3,2,1)окт-б-ил, цистабл.2 при подкожном введении, все и транс-3,5-диметилпиперидин-l-ил, соединения в табл.2 при оральном вве- R „ - водород, гидроксил или микадении, соединения 5, 7, Il 12, 13, роэнлокси

14, 16 в табл,3). Таким образом, предлагаемые соединения обеспечивают повышение антимикробной активности. ОИ 4

ОИ

Нз

Способ получения макролидных соединений общей формулы

ACH ÑÍõR где АВ -СИ2 сн сн где А имеет укаэанные значения, боргидридом натрия или цианборгндридом натрия в присутствии амина общей формулы

RH где R имеет укаэанные значения, в среде C„-Ñ4. — алканоила при комнатной температуре.

Составитель О. Смирнова

Редактор Ю. Середа Техред Л.Сердюкова Корректор А. Тяско

Заказ 623/58 Тираж 370 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий.

113035,,Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул, Проектная, 4

Формула изобретения lp

СК

О

ОН

® М

2 0 8

СН3 Re

: 25

R - октагидроаэоцнн-l-ил, 4-фенилпиперидин-l-ил, гексагидроаэепин-1ил, l-аэаспиро(4,5)дец-l-нл, 1,2,3,4тетрагидрохинолин-l-ил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-2"ил, 1,2,3,6-тетрагидропиридин-l-нл, пирролидин-1ил, азациклотридецин-l-ил, 3-азабицикло(3,2,2)-нон-3-ил, I 3,3-трнме 3 0 СН3 О

HO О- ИЛИ gp (-" 0 О(:Н П0 OCR отличающийся тем, что осуществляют восстановление альдегида формулы

Ъ

АСН СН ** О,