Известные способы получения гиббереллина предусматриваюг в качестве источника азота для его биосинтеза виннокислый аммоний, а в качестве элуирующих растворителей при выделении гиббереллина метанол + аммиак, ацетон, ацетон + аммиак.

Существенным недостатком этих способов является дороговизна и дефицитность азота, а также токсичность и взрывоопасность применяемых растворителей.

Предлагаемый способ позволяет заменить дорогое, дефицитное, токсичное и взрывоопасное сырье и заключается в том, что в отличие от известных способов, глубинное культивирование штампов гриба

Fusarium moni1iforme производят на ферментационной среде, состоящей из сахара, ацетата аммония, кислого фосфата калия, сульфатов калия и магния и кашалотового жира при температуре 27 вЂ” 28 и значении рН = 6,8 вЂ” 7,2. Последующее выделение гиббереллина осуществляют адсорбцией на активированном угле и затем десорбцией смесью бутанолвЂ” вода и экстракцией слабым раствором бикарбоната натрия и этила цета том.

Пример 1. Подготовка посевного материала.

Небольшое количество исходной культуры (штаммы С вЂ” !4, 8 вЂ” 8 или 8 вЂ” 10 из коллекции ВИУА ВАСХНИЛ) с агаризованной синтетической среды засевают в колбы, содержащие 100 мл стерильной культу.ральной среды следующего состава (г/,г): сахар пищевой 25,0; аммоний виннокислый 7,0; калий фосфорнокислый однозамещенный 2,0; магний сернокислый 0,2; калий сернокислый 0,2; смесь микроэлементов

1 0 мл, Культура выращивается в колбах на ротационной качалке при

28, после чего 3 мл жидкой культуры стерильно переносят в стеклянный флакон, содержащий полуразваренное стерильное пшено. Проращивание производят в термостате при 27 на протяжении 5 суток, после чего флаконы с содер.кимым подвергают вакуумной сушке при остаточном давлении 10 вЂ” 15 .чм рт. ст. и 25 до оста гочнoи вместимости, не превышающей 7%.

Пример 2. Ферментация.

Небольшое количество пшена с конидиями продуцента вносят в колбу, содержащую 100 ял стерильной среды вышеуказанного состава и продуцент выращивают 48 час на ротационной качалке при 28 . Содержимое колбы передается на инокулятор вЂ” ферментер, содержащий

26 л стерильной питательной среды того же состава. Инокулирование производят при перемешивании со скоростью 300 об/мин и продувании

26 л воздуха в минуту, температура регулируется по уровню 27+ 1 .

После 48 час роста инокулит в количестве 10% передают в ферментер для получения гиббереллина. Питательная среда содержит (г/л): сахара пищевого 40,0, аммония уксуснокислого 5,8, калия фосфорнокислого однозамещенного 2,0, калия сернокислого 0,2, магния сернокислого 0,2; раствора микроэлементов I мл, кашалотового жира 5,0; рН вЂ”вЂ”

==6,8 вЂ” 7,2. Выращивание производят при температуре 27+1, перемеIIIHBBHHH 400 об/лен. аэрации 1,5 ооъема воздуха на 1 объем среды в м инуту.

3. Выделение активного кристаллического препарата

36 л отфильтрованной культуральной жидкости подкисляют 2н. НС1 до рН=2,5 и адсорби руют активное начало при перемешивании в течение 2 час с активированным углем. Отфильтрованный уголь промывают 1 л дистиллированной воды при отсасывании и элуируют 2,5 л смеси, состоящей из 25 объемных ч. бутилового спирта, 73 ч. воды и

2 ч. 20%-ного водного аммиака. После 8 час перемешивания добавляют к суспензии 125 мл 1 н. раствора однозамещенного фосфорнокислоТо калия, 23 лсл 25%-ного раствора хлористого кальция и отфильтровывают на нутгфильтре. Для повторного элуирования обрабатывают отфильтрованный у оль 0,8 л щелочной смеси бутанола с водой вышеуказанного состава. Объединенные элуаты подкисляют 2 н. НС1 до рН=2, добавляют 2,5% хлористого натрия, после разделения фаз отделяют слой растворителя, а водную фазу повторно экстрагируют 0,5 л бутилового спирта. Ооъединенный бутанольный экстракт обрабатывают последовательно 0,4%, 0,3% и 0,2%-ными растворами оикарбоната .натрия, используя для каждой экстракции 0,2 объема. Объединенный водный экстракт подкисляют 2н. НС1 до рН=2,5 и трижды экстрагируют этилацетатом по 0,2 обьема (от органической части раствора).

Зтилацетатный раствор обезвоживают гранулированным хлористым кальцием, отфильтровывают и отгоняют растворитель при остаточном давлении 10 мм рт. ст. до начала кристаллизации. В результате выделяют 3,5 г бесцветных кристаллов с т. пл. 223 вЂ” 224 и удельным вращением (а) = + 76 . Концентрированием маточника получено сще в

0,34 г вещества с т. пл. 220 вЂ” 222, вращением ((- „" =+ 76 . Концентрированием маточника получено еще ОЛ4 г вещества с т, пл, 220 вЂ” 222, вращением (n("- -70 .

Пред.!ет изобp тения

Способ получения гиобереллина путем глубинного культивирования штаммов Fusarium moniliforme на аитательной среде, содержащей источники азотного и углеродного питания, отличающийся тем, что, с целью расширения сырьевой базы, в качестве источников азотного и углеродного питания, используют сахар, кашалотовый жир и ацстат аммония при нейтральном значении рН, Ле 141352

Описание составил И. М. Петров

Редактор С. А. Барсуков Те. рсд А. A. Кагиыгнникова Коррекrop И. А. Шпынек

Формат бум. 70Х 108,,в

Тираж 500

11БТИ ири Комитете по делам изобретений и открытий при Совете Министров C(:ÑÐ

Москва, Центр, М. Черкасский иср., д. 2!6

Объем 0,26 изгь .в

Цена 5 кон

11одп. к ивti. 25.1Х-61 г ак. 9267

Типография ЦБТИ Комитета ио делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР. Москва, Петровка 1-1.

2. Спосоо по и. 1, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода, гиббереллин выделяют из культуральной среды путем сорбции на активированном угле с последующей десорбцией смесые бутанол вЂ” вода H экстрагируют этилацетатом.

Похожие патенты:

Патент 135187 // 135187

Способ производства сухого фосфоробактерина // 112231

Способ выращивания азотобактера // 106552

Способ производства жидкого фосфоробактерина // 104997

Способ получения фосфоробактерина // 97943

Способ промышленного изготовления бактериального препарата "дендробацеллина за" для борьбы с шелкопрядами // 134524

Способ получения инсектицида // 130756

Способ приготовления сухого бактериального препарата для борьбы с мышевидными грызунами и насекомыми // 113646

Припой для пайки алюминия и его сплавов // 112646

Способ яровизации (стимулирования роста) растений // 41766

Производные бензотиофен-2-карбоксамид-s,s-диоксида, способ их получения, фунгицидное и микробицидное средство // 2105763

Изобретение относится к новым бензотиофен-2-карбоксамид-S,S-диоксидам, обладающим ценными свойствами, в частности к производным бензотиофен-2-карбоксамид- S,S-диоксида общей формулы I где R1 неразветвленный или разветвленный алкил с 1 20 атомами углерода, неразветвленные или разветвленные галогеналкил, цианалкил, оксиалкил, алкоксиалкил или алкоксикарбонилалкил с 1 8 атомами углерода в каждой алкильной части, неразветвленный или разветвленный алкенил с 2 12 атомами углерода, неразветвленный или разветвленный алкинил с 2 12 атомами углерода или незамещенный или однократно до шестикратно замещенный алкилом циклогексил или циклогексилалкил, незамещенные или однократно до пятикратно замещенные в фенильной части одинаковыми или различными заместителями фенил, фенилалкил или фенилалкинил с 1 12 атомами углерода в каждой неразветвленной или разветвленной алкильной или алкинильной части, причем в качестве заместителей фенила можно называть атом галогена, гидроксил, цианогруппу, формиламидогруппу, неразветвленные или разветвленные алкил, алкоксигруппу с 1 4 атомами углерода, неразветвленные или разветвленные галогеналкил, галогеналкоксигруппу с 1 4 атомами углерода и с 1 9 одинаковыми или различными атомами галогена, неразветвленные или разветвленные диалкиламино, алкилкарбонил, алкилкарбониламино, алкоксикарбонил, аминокарбонил, N-алкиламинокарбонил, N,N-диалкиламинокарбонил, формиламино, алкилформиламино; R2 атом водорода или неразветвленный или разветвленный алкил с 1 18 атомами углерода, незамещенный или однократно или многократно замещенный одинаковыми или различными заместителями из группы, включающей гидроксильную группу, атом галогена, цианогруппу; R1 и R2 вместе с атомом азота, с которым они связаны, означают незамещенный или однократно или многократно замещенный, насыщенный пяти- до семичленный гетероцикл, который может содержать помимо атома азота атом кислорода, причем заместителем может быть алкоксикарбонил с 1 4 атомами углерода; R3, R4, R5 и R6 независимо друг от друга означают атом водорода, атом галогена, алкоксигруппу с 1 6 атомами углерода

Гербицидная композиция // 2117426

Изобретение относится к химическим средствам для борьбы с нежелательной растительностью в посевах возделываемых культур

Гербицидная композиция // 2117429

Изобретение относится к новой гербицидной композиции, включающей по крайней мере один ингибитор транспортировки ауксина и по крайней мере один гербицид, и используемой для борьбы с нежелательным ростом растений

Способ борьбы с сорными растениями, гербицидная композиция и синергист, повышающий активность гербицидов // 2130260

Гербицидное средство с синергической активностью // 2170017

Изобретение относится к средствам для борьбы с сорной растительностью, в частности к гербицидному средству, содержащему в качестве активного компонента (А) нитрил 1-(3-хлор-4,5,6,7-тетрагидропиразоло-[1,5-а]-пиридин-2-ил)-5-(метилпропаргиламино)-4-пиразолилкарбоновой кислоты и дополнительно в качестве активного компонента (Б) вещество, выбранное из группы, включающей бентазон, молинат, даймурон, тиобенкарб, бутахлор, претилахлор, димепиперат, феноксапроп-этил, кломепроп, цинметилин, бромобутид, хинклорак, мефенацет, пиразосульфурон-этил, эспрокарб, циносульфурон, тенилхлор, кумилурон, МК 243, напроанилид, анилофос, бенфуресат, бифенокс, СН-900, МСРА, нитрофен, оксадиазон, пендиметалин, симетрин, сулкотрион (IСIА0051), трифлуралин, пиперофос, пирибутикарб, этоксисульфурон, бенсульфуронметил, пиразолат, пиразоксифен, бензофенап, циклосульфамурон, цихалофопбутил, NBA-061 и азимсульфурон

Новые производные простого пропаргилового эфира // 2237058

Изобретение относится к соединениям общей формулы I включая их оптические изомеры и смеси таких изомеров, где r1 обозначает водород, С1-С6алкил, С3-С6циклоалкил или арил, необязательно замещенный 1-3 атомами галогена, R2 и R3 каждый независимо друг от друга обозначают водород или С1-С6алкил, R4 обозначает С1-С6алкил или С3-С6алкинил, R5, R6, R7 и r8 каждый обозначает водород и , r10 обозначает арил, необязательно замещенный 1-3 заместителями, выбранными из группы, включающей галоген, С1-С6алкил, С1-С6алкокси, С1-С6галоалкил, С1-С4галоалкокси, С1-С4алкокси, С1-С4алкил, С1-С6алкилтио, С3-С6алкинилокси, нитро и С1-С6алкоксикарбонил или необязательно замещенный гетероарил, представляющий собой ароматическую кольцевую систему, содержащую в качестве гетероатома по крайней мере один атом кислорода или серы, r11 обозначает водород, С1-С6алкил или С3-С6алкинил, R12 обозначает водород или С1-С6алкил, Z обозначает водород -CO-R16 или -CO-COOR16 и R16 обозначает С1-С6алкил, -СН2-СО- С1-С6алкил или фенил

Гербицидные средства для толерантных или резистентных культур сахарной свеклы, способ борьбы с сорняками // 2241332

Изобретение относится к области средств защиты растений, которые можно использовать против сорняков в толерантных или резистентных культурах сахарной свеклы и которые в качестве гербицидных биологически активных веществ содержат комбинацию из двух или нескольких гербицидов

Гербицидная композиция // 2263449

Изобретение относится к химическим средствам борьбы с сорняками, а именно к гербицидным композициям на основе фенмедифама, десмедифама и этофумезата (Справочник пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории РФ, 2003 г.), применяемым для обработки посевов свеклы

C2-фенилзамещенные циклические кетоенолы // 2280643

2,4,6-фенилзамещенные циклические кетоенолы // 2353615

Биостимулятор роста растений симбионт-универсал и сообщество микроорганизмов // 2100932

Изобретение относится к сельскому хозяйству и касается продуктов микроорганизмов, стимулирующих развитие и повышающих урожайность сельскохозяйственных растений