Способ получения а'-дегидрокортизона (преднизона)
431
Союз Советских
Социелистическнх
Республик
Зависимое от авт. свидетельства
Заявлено 25.Х1.1961 (№ 753087/ с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 02.Н1.1967. Бюлле
Дата опубликования описания 1 о, 25/02 о, 25/07
h, 6
С 07с
С 07с
A 611<
Номитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
Авторы изобретения Н. H. Суворов, Л. В. Соколова, В. М. Рыжкова, Н. Н. Лестровая и 1. К. Скрябин
Заявитель
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Л -ДЕГИДРОКОРТИЗОНА (ПРЕДНИЗОНА) Известен способ получения Л -дегидрокортизона (преднизона) из кортизон-ацетата с помощью его микробиологического дегидрирования и омыления смесью культур Corynebacteг1шп simplex u Bacillus megatherium.
Известен также способ получения Л -дегидрокортизона (преднизона) путем микробиологического дегидрирования с одновременным дезацетилированием ацетата кортизона с помощью смешанной культуры Mycobacterium
ИНКИ и Bacillus megatherium (штамм
В НИХФИ-1) .
Предлагаемый способ получения Л -дегидрокортизона (преднизона) позволяет устранить использование спорообразующей культуры, стандартизировать и упростить процесс ферментации, а также облегчает извлечение и химическую очистку готового продукта.
Отличите,тьная особенность способа получения Л -дегпдрокортизопа (преднизопа) заключается в том, что получение преднизоиа ведется с помощью стерильного ферментиого препарата, полученного из Bacillus megatherium.
Согласно предложенному способу, ферментный препарат получают из Bacillus megatheг1шп путем обработки в асептических условиях бактериальной массы 10-кратным объемом охлажденного ацетона с последующей обработкой осадка охлажденной смесью ацетона и эфира (1:1), эфиром и высушиванием на
2 воздухе. Для получения Л -дегидрокортизона (преднизопа) из ацетата кортизона с помощью культуры Mycobacterium $р. N-193 и ферментного препарата из Вас. megatheriurr>
5 в ферментатор загружают раствор стерильного фосфатного буфера, стерильный ферментный препарат и растворенный в ацетоне ацетат кортизона. Процесс ведут при 28 С в течение 20 час, после чего добавляют суточную
lo культуру Mycobacterium Sp. N-193 и ведут процесс еще 2 час. По окончании процесса дегидрирования образовавшийся преднизон извлекают хлороформом и перекристаллизовывают из изопропилового спирта.
15 Пример 1. Приготовление ферментного препарата из Вас. megatherium.
Для получения исходной беспоровой культуры Вас. megatherium колбу с питательной средой следующего состава, Я,: пептон — 1, 20 глюкоза 3, КНзРΠ— 2 при рН 6 7, засеьшот одной 17 — 19-часовой колонией Вас.
mcgathcrium, выращенной на кукурузно-глюкозцом агаре при 28 С. Колбу встряхивают на качалке при 28 С в течение 17 — 20 час.
25 Для приготовления стерильного ферментного препарата бактериальную массу собирают центрифугированием и обрабатывают 10-кратным объемом охлажденного до 10 — 15 С ацетона. Осадок переносят на воронку Бюхнера
30 и промывают последовательно охлажденной
Предмет изобретения
Составитель С. Пыжев
Текред T. П. Курилко Корректоры: Н. В. Черетаева и Е, Н. Гудзова
Редактор Л, Ильина
Заказ 1942/1 Тираж 535 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2 месью ацетона и эфира (1: 1) и эфиром. Препарат подсушивают на воздухе 15 — 20 л цн и хранят в холодильнике. Весь процесс получения ацетонового препарата проводят в стерильных условиях (стерильная посуда и кварцевая лампа). Препарат сохраняет активность, по крайней мере, в течение 3 месяцев (оолее длительный срок хранения не проверялся).
П р и м ер 2. Проведение процесса дегидрировапия и дезацетилировапия ацетата кортизона.
В ферментер, снабженный мешалкой, барботером и обогревом и заполненный 5 л стерильного фосфатного буфера (рН 6,7), вносят 7 г стерильного ферментного препарата, после чего добавляют 0,5 г ацетата кортизона, предваригельно растворенного в 100 мл аце. тона. Процесс проводят при 28 С в течение
20 час, затем добавляют 1 л суточной культуры Mycobacterium $р. N-193 и продолжают ферментацию еще 2 час. Контроль за ходом процесса осуществляют путем хроматографии на бумаге в системе формамид-бензол и проявления пятен раствором Люголя. По окончании процесса дегидрирования образовавшийся преднизоп извлекают хлороформом и перекристаллизовывают из изопропилового спирта.
Получают 0,3 г преднизопа с т. пл. 230 С, полностью удовлетворяющего требованиям
Британской фар;1ако e1 1958 г.
Способ получения Л -дегидрокортизона (преднизона) путем одновременного микро15 биологического дегидрирования и дезацетилирования ацетата-кортизона с помощью культуры Nycobacierium Sp. N-193, отличаЮщийся тем, что, с целью устранения использования спорообразующей культуры, процесс ве20 дут с помощью ферментного препарата, полученного из Вас. megatherium.
