Способ получения производных изохинолиния
Изобретение касается прокэвод-. ных изохинолина, в частности изомеров и/или диастериоизомеров дихлорида (или др. аниона) 2,2-(Е)-4-октендиоил-бис (окси гриметилен) -бис . (транс)-,2,354-тетрагидро-6,7-диметокси-2-метил-1-(3,4,5-триметоксибензил)изохинолиння , которые могут быть использованы в качестве нервномышечноблокирующих средств короткого действия .Цель изобретения - созда; ие новых более активных веществ указанного icnacca Синт-ез ведут реакцией соответствующего замещенного ОН-группой изохинолиния с необходимым анионом и соединения ф-лы (0) (CHj)- (СН)С(0) С1 с последующим выделением целевого продукта. Выход дихлорида указанного изохинолиния Брутто-ф-ла Cj-g 2 ° вые вещества проявляют быстрое нервно-мьшечное блокирующее действие при длительности около 10 мин и концентрации 0,1-5 мг/мл (доза 0,04- 0,05 мг/кг), что в более чем десять .раз меньше, чем с использованием известного аналога о 2 табЛо (О
СОЮЗ СОВЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
А3
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ
flQ ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21 ) 3926 201 / 23-04 (22) 17.07.85 (31) 84! 8303 (32) 18„07.84 (33) GB (46) 23. 03. 89. Бюп. И- 11 (71) Дзе Веллкам Фаундейшн Лимитед (СВ) и Дзе Дженерал Хоспитал Корпор ейшн (U S) (72) Рой Арчибапьд Сваринген,младший, Хассан Али Зль-Сайяд, Дэвид
Артур Йевелл и Джон Джозеф Саварез (us) (53) 547. 781. 785. 07(088. 8) (56) Вейганд-Хиль гетаг, Методы эксперимента в органической химии.M. Химия, 1968, с. 314. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ
ИЗОХИНОЛИНИЯ (57) Изобретение касается производных изохинолина, в частности изомеров и/или диастериоизомеров дихлорида (или др. аниона) 2,2- ((Е)-4-октенИзобретение относится к способу получения новых соединений, а именно производных изохинолиния, которые могут найти применение в медицине и ветеринарии в качестве нервно — мышечноблокирующих средств короткого действия, l
Цель изобретения — получение новых прбизводных изохннолиния, обладающих более высокой биологической активностью по сравнению со структурным аналогом, обладающим тем же видом активности.
151) 4 С 07 В 217/10//A 61 К 3) /47 диоил-бис (окси гриметилен)) -бис . ((транс)-1, 2, 3, 4-тетрагидро-6, 7-диме токси-2-метил — 1 (3, 4, 5-триметоксибензил) изохинолиния), которые могут быть использовань| в качестве нервномышечноблокирующих средств короткого действия, Цель изобретения — создание новых более активных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соответствующего замещенного ОН-группой изохинолиния с необходимым анионом и соединения ф-лы С1-Ñ(0) (СН )
CH=CH-(СН ) С(0) Cl с последующим выделением целевого продукта. Выход дихлорида указанного изохинслиния
41Х. Брутто-ф-ла С д Н „Nz0<4 С1 . Но— вые вещества проявляют быстрое нервно-мышечное блокирующее дей ствие при длительности около 10 мин и концентрации 0,1-5 мг/мп (доза 0,040,05 мг/кг), что в более чем десять раз меньше, чем с использованием известного аналога. 2 табл.
Все используемые растворители и химические вещества являются химически чистыми реактивами и применяются без дальнейшей очистки. Аналити— ческая ЖХВД, если нет иных указаний, осуществляется на колонке Whatтпап Partisil 1ОИ (25 см 4,6 мм), использующей пробоотборный контур на 20 мкл. Используют подвижную фазу метанол: этилацетат: трифторуксусная кислота: серная кислота (61, 1: 38,5:
0,3:О,1) при расходе 2 мл/мин. Детектирование ведут ва длине волны
14684!4
250
280 нм. Хотя время удерживания (RT) меняется в зависимости от ряда факторов, порядок элюирования является следующим„ с: (E)-(1R, 2R)-2- (3- ((7-Карбоксигептаноил) окси)-пропил) — 2метил-1 — 13, 4, 5- тримето ксибензил)изохинолиний-хлорид 150 (E)-(1-R, 2S)-2- (3- ((7-Карбоксигептаноил) окси)-пропил)2-метил-1-(3,4,5-триметоксибензил)изохинолиний-хлорид 203 цис- l, 2,3,4-Тетрагидро-2(3-гидр оксипропил) -6, 7-диметокси-2-метил-1- (3,4, 5триметоксибензил) -из охинолиний — хлорид тр а нс- 1, 2, 3, 4- Те тр агидр о2- (З-гидроксипропил)-6, 7диме то кси- 2- метил- 1- (.3, 4, 5триметоксибензил) изохинолиний-хлорид 315
2, 2 - ((Е)-4-Октендиоил-бис (о кситриметилен)) бис-11 R, 2R25
1, 2, 3, 4-тетрагидро-б, 7-диметокси-2-метил-l-(3,4,5-триметоксибензил)изохинолиний) хлорид 357 (Е)-(1R, P,2R,2 S)- 2,2— ! 4-Октендиоил-бис (окситриметилен)) бис- l, 2, 3,4-тетрагидро-б, 7-диме токси-2-метил1- (3, 4, 5- триме то к сиб енз ил) из охинолиний-дихлорид 519
2, 2 — ((E) -4-Октендиоил-бис (окситриметилен)) -бис- (1R, 2S)-триметоксибензил)изохинолиний) дихлорид 751
Все сложные диэфиры сушат до пос4О тоянной массы при давлении 0,1 MM рт. ст. и температуре окружающей среды. Вращение рассчитывают на базе вещества, не содержащего летучих.
Пример 1. 2, 2 — (Е)-4-Октендиоил — бис (окситриметилен)) -бис (транс1, 2, 3, 4 — тетр агидро-6, 7-димето кси-2метил-1 — (3,4,5 — триметоксибензил) изохинолинии1 дихлорид, Соединение A. транс-1,2, 3,4-Тетрагидро-2- (3-гидроксипропил) -6,7-ди— метокси-2 — метил-1-(3,4,5-триметоксибензил) из охинолиний-хлорид (трансчетвертичный)хлорид.
5 -Метоксилауанвзин (4,6 г), 3хлорпропанол (2,2 r), иодид натрия
55 (3,5 г) и карбонат натрия (0,3 г) кипятят с. обратным холодильником H
2-бутаноне (45 мл) в течение 24 ч.
Белую суспензию фильтруют в горячем состоянии и растворитель отгоняют в вакууме. Результирующую смолу растирают с диэтиловым эфиром для удаления избыточного 3-иодопропанола. Остаточный растворитель отгоняют в вакууме с получением аморфного твердого вещества, которое по данным ЖХВДанапиза определяют как 6,3/1-трансцис-четвертичную иодидную смолу. Материал растворяют в Н О (45 мл), охо лаждают до О С и фильтруют для удаления осажденного цис-изомера. Преобразование в хлоридную соль осуществляют пропусканием обогащенных трансизомеров жидкостей через колонку, набитую ионообменной смолой (35 г).
Элюант концентрируют под вакуумом.
Растирание остаточного масла с ацетоном дает хлоридную соль в виде бепого твердого вещества. Суспендированием твердого вещества в сухом N;М-диметилформамиде (20 мл) при 80 С в течение 10 мин удаляют последние следы цис-изомера. Материал суспендируют в горячем ацетоне дпя удаления остаточного N, N-диметилформамида и фильтруют с получением 4,8 г (847) четвертичного хлорида, который по данным
ЖХВД-анализа определяется как !00% †н транс-изомер; т.пл. 212-213 С.
Подтверждение транс-ориентации дает рентгеновский кристаллографический анализ перхлоратной соли соединения А.
Вычислено, 7: С 62,30; Н 7,53;
N 2,9Р; Сl 7,36
С Н бИ06С1
Найдено, X: С 62,35; Н 7,52;
N 2,91; Cl 7,32, Соединение В. цис-1,2,3,4-Тетрагидро-.2-(3-гидроксипропил)-6,7-диметокси-2-метил-1-(3,4,5-триметоксибензил)изохинолиний-иодид(цис-четвертичный иодид).
5 -Метоксилауданозин (47 r) и 3иодопропанол (45 r) кипятят 18 ч с обратным холодильником в ацетонитриле (500 мл). Растворитель отгоняют в вакууме. Результирующую смолу растирают с диэтиловым эфиром для удаления излип него З-иодопропанола, Остаточный растворитель отгоняют в вакууме с получением оранжевого масла, которое по данным ЖХВД вЂ” анализа определено к
3/1- тр анс-цис-четвертичная иодидная соль. Масло растворяют в ацетоне (200 мп) и охлаждают при -5 С в те1468414
6 чение 18 ч. Твердое вещество отфильт- Пример 2. (4} транс, тра <сровывают и сушат в течение 2 ч при 2, 2 — (Z) -4- ок тендиоил- бис (окси триО
50 С с получением 37,1 г четвертично- метилен)-бис-(1,2,3,4-Тетрагидроиодидной смеаи (3: Iтранс::цис по дан- 6 7-диметокси-2-метил-1-(3 4 5 — три5 э ным ЖХВД-анализа). Твердое вещество мето ксиб енз ил ) из о хинолиний-ли хл арид растирают с водой (200 мп) и от- (соединение Р) . фильтровывают с получением 10,5 г транс-N-3-Гидроксипропил — 5 -меточищенного цис-четвертичного иодида. оксилауданозиний-хлорид (соединение
Перекристаллизация из ацетонитрила Ip А, l007 транс по данным ЖХВД, 5,88 г) д,7 г (1!Ж} белого, кристалли- суспендируют в 80 мл 1,2-дихпорэтана ает 7 7 г (117} б ческого твердого вещества, т.пл . 142- при ?О С и добавляют хлорангидрид
144 С. (2)-4 — октен-1,8 — дикарбоновай кислоПодтверждение цис-ориентации полу- ты (1,2 г). Хпорангидрид цикарбоночено по данным. рентгеновского крис- t5 вой кислоты получают аналогично притаплографического анализа соедине- меру 1. Смесь перемешивают при темния В. пературе окружающей среды в течение
Вычислено, %: С 50,80; Н 6,42; 16 ч и фильтруют. Фильтрат концентN 2,36 рируют до пены и делят между водой
М 36 Ъ 2. 20 (65 мп) и нитрометаном (15 мп). Водную порцию промывают диэтиловым эфиИ 2,34.
2 2ром и обрабатывают хлористым натрием
Соединение С, 2, 2 — ((Е) -4-Октен- (1,6 г} ° Раствор в рассоле экстрагируют хлороформом (40 мл). Хпорофор((транс)-1, 2,3,4-тетрагидро-б, 7-ди- 25 мовый экстракт концентрируют до смо-. мет кси-2-метил-1-(3,4,5-триметоксибензил)изохинолиний)дихлорид. 2,57-ном водном растворе хлористого тр нс-N-3-Гидроксипропил-5 -мет- натрия (65 мп). Добавлением О,I N оксилауданозиний — хлорид (100 транс гидроокиси натрия рН доводят до 9,0 по данным ЖХВД, 5,9 г)суспендируют 30 и водный раствор экстрагируют хпороо в 80 мл 1,2-дихлорэтана при 70 С. формом (40 мл}. Хлороформовый растДобавляют 1,2 г хлорангидрида (Е)- вор промывают 57.-ным водным хлоридом
4-октен-1,8-дикарбоновой кислоты (из- натрия {200 мл), осушают над безводвестное соединение)-и смесь переме- ным хлоридом кальция, фильтруют.и .шивают 72 ч при температуре окружаю- 35 упаривают до сухого остатка при пощей среды. Реакционную смесь фильт- ниженном давлени . Твердое вещество руют и растворитель отгоняют в ва- растворяют в этаноле (957) и упакууме с получением аморфного твердо- ривают до пены при пониженном давлего вещества, которое суспендируют чии. Пену доводят до постоянной масв l -ном водном растворе хлористого 4р сы в условиях вакуума 0,5 мм рт.ст. натрия. Суспензию доводят до рН 8,0 с получением 4,0 г 577 соединения
17.-ной гидроокисью натрия и экстра- (92,27 по данным ЖХВД). гируют хлороформом (3 200 мп). Ском- Вычислено, 7: С 57,78; Н 7,69; бинированные хлороформовые порции N 2,33; Cl 5,89 осушают над безводным хлористым каль- 45 С Н И О С1 5 8 Н О
%5 80 2 14 2 2 цием и фильтруют. Фильтрат упаривают Найдено, 7: С 5 7, 83; Н 7,66 9 до сухого остатка. Остаток растворя- N 2,33; Cl 5,89 ют в 100 мл этанола и упаривают до Пример 3. (Е)-((В.,1 R}2,2образования пены, которую затем упа- |4-Октендиоил-бис(окситриметиленЦ— ривают до постоянной массы в усло- 5р бис-(1,2,3,4-Тетрагидро-б,7-диметвиях высокого вакуума (0,5 мм рт.ст.), окси-2-метил-l-{3,4,5-триметоксибенВыявлено, что белое твердое вещест- зил)изохинолиний)дихлорид (соединево (2,8 г, 417) имеет чистоту 957 по ние G).
t данным ЖХВД. Соединение Е: (R)-(-)-5 -МетоксиВычислено, 7.: С 58,44; Н 7,63; 55 лауданозин.
N 2,21; Cl 5,95. К (2) — 5 -метоксилауданозину
С На 11 0 4 С1 (46,4 г) в метаноле (240 мл} добавНайдено, 7.: С 58,17; Н 734; ляют (+)-дибензоилвинной кислоты
N 2,35; Cl 6,07. моногидрат (45,2 r) . Смесь нагревают
1468414 до кипения, охлаждают при 5 С в течение 16 ч и дибензоилтартрат (S)-(-)5 -метоксилауданозиний (35, б r, 80%) отфильтровывают и отбрасывают, Маточ5 ные растворы подщелачивают концентрированной водой NaOH и упаривают в вакууме. Твердый остаток делят между
Н О (200 мл ) и диэ тило вым эфиром (2 {50 мл). Эфирную фазу осушают и упаривают с получением масла (24, 9 r)
К маслу в метаноле 128 мп добавляют (+)-дибензоилвинной кислоты моногидрат I26 6 г) .;Смесь нагревают до .о кипения и охлаждают при 5 С в тече- 15 ние { 6 ч, Кристаллы собирают и перекристаллизовывают из метанола, пока не достигнуто удельное вращение
/k, =+17,7 (14 Et0H). Выход дибенз оилтартрата (R)- (+)-5-метоксилау- 20 данозиния в виде белых кристаллов составляет 29,4 г (667). Порцию соли (15,0 г) в метаноле (200 мл) подщелачивают концен трир ованной водной
Na0H. Смесь упаривают в вакууме и остаток делят между Н О { 200 мл) и диэтиловым эфиром (2 200 мл). Скомбинированные эфирные слои осушают и упаривают в вакууме с получением
7,2 г (92%) (R)-(-) 5 -метоксилауданозина в виде масла.
Соединение F . (К)-" (-)-5 -Мето ксилауданозин (7, 2 г), 3-хлорпропанол (3,5 г), иодид натрия (5,6 г) и карбонат натрия (0,5 г) кипятят с обрат- 35 ным холодильником в 2-бутаноне (125 ил) в течение 16 ч. Белую суспензию фильтруют в горячем состоянии и растворитель удаляют из фильтрата в вакууме. Остаточную смолу растира- 40 ют с горячим этилацетатом для удаления из быточного З-иодопропанола, растворяют в 200 мп метанола и пропускают через колонку, набитую ионообменной смолой (60 г хлоридной фор- 45 мы) . Элюант подвергают отгонке растворителя в вакууме е получением четвертично-хлоридной соли (8,4 г) в виде аморфного твердого вещества. По данным ЖХВД вЂ” анализа определяют как сме сь 2, 3 (1- тр анс) цис-ди астер еоизомеров.
Соединение G. N-3-Гидроксипропил— 1-(R)-5 -метоксилауданозиний-хлорид (2,3/1-транс-цис по данным ЖХВД, Z,5 r) растворяют в 60 мл 1,2-дихлорэтана при температуре около 70 С.
Добавляют хлорангидрид (Е)-4-октен1,8-дикарбоновой кислоты (0,5 г) и смесь перемешивают 19 ч при температуре окружающей среды. Растворитель удаляют в вакууме с получением аморфного твердого вещества, которое растворяют в хлороформе (25 мл) и промывают 5%-ным водным раствором хлорида натрия (3) 35 мл) для удаления непрореагировавших четвертичных солей, Хлороформовый слой осушают и упаривают в вакууме с получением аморфного твердого вещества. Примеси-сложные эфиры кислоты удаляют промыванием горячим 2-бутаноном. Остаточный растворитель упаривают в вакууме и результирующее аморфное твердое вещество растворяют в метаноле, фильтруют и лиофилизуют с получением 1,9 г (E)-(lR,! R)-2,2 -{4-октендиоилбис(окситриметиленД бис!1, 2,4,3-тетр агидр о-б, 7-диме то кси- 2-метил-1(3,4,5-триметоксиненеил)инокинолиний) дихлорида — соединение С, которое по данным ЖХВД-анализа считается смесью
44,67 RS-RS (транс-транс)диэфира, 42,47. RR-RS (цис-транс) диэфира, 7,5%
Q;RR (цис-цис) диэфира, 4,07 RS (транс) сложного эфира кислоты и
1,5% RR (цис) сложного эфира кислоты. $<) .= — 62,7 (1,9% в Н 0).
Вычислено, 7.: С 5944; И 7 57;
М 2,39; Сl 6,05
C Найдено, 7.: С 59,36; Н 7,60; N 2,36; Сl 5,99. ! Пример 4. Хроматографическое разделение отдельных компонентов со единения, Для проведения этого разделения используют ЖХВД-систему Haters HPLC/system 500А, снабженную двумя силикагельными кассетами сдвоенного типа. Колонки, предварительно уравновешивают в подвижной фазе (этанол: метанол: тетраметиламмонийхлорид= 600:400: 1) и в колонку загружают смесь диэфиров, соединение G (5 r) в этаноле (25 мп). Систему . элюируют с использованием 13, 2 л подвижной фазы, которую собирают в виде бб фракций (по 200 мл). Фракции анализируют с помощью аналитической ЖХВД и на основании этих данных определяют в комбинированном виде как следующие соединения Соединение Н. (Е)-(1Р,1 R, 2К, 2 К)-2,2 -14-Октендиоил-бис(окситриметилен1{бис(1,2,3,4-тетрагидро9 14684 6, 7-диметокси-2-метил- l — (3,4,5-триметоксибензил) изохинолиний)дихлорид. Фракции 26-30 комбинируют и упари— вают при пониженном давлении. Резуль5 тирующии остаток растирают с хлороформом (200 мл) и фильтруют. Фильтрат промывают 5%-ным водным хлоридом натрия и концентрируют при пониженном давлении с получением масла. Мас- !0 ло растворяют в этаноле (50 мл) и упаривают до пены (0,4 r) .j<) -33,6 (lь5% в Н О). Н ЯМР (CDC1 ) из TMC, !!: 6,64 (с, Н5, 2Н), 6,27 (с, Н2 и 6, 4Н), 5,75 (с, Н8, 2Н) . Вычислено, %: С 59 02; Н 7,88; N 2,62; Cl 6,61 С,. Н 11 0,!С1 3,7 Н О. 0,9 С Н ОН ., 0,3 (СП ) H+Cl 20 Найдено, %: С 59,03; Н 7,83; N 2,60; Cl .6,57. Соединение H (10 мг) в 1%-ной вод.ной фосфорной кислоте (10 мл) нагревают 18 ч при 60-70 С и анализируют с помощью ЖХВД. Наблюдается цисчетвертичная соль до исключения транс — четвер тичнай соли. Зто подтверждается совместными инъекциями с соединениями А и В. 30 Соединение I. (Е)-(1P„1 R, 2R, 2 S)-2, 2 — (4 — Октендиоил-бис (окситри-! метилену бис (1, 2, 3, 4- тетрагидра-б, 7диметокси-2-метил-1 — (3, 4, 5-триметоксибензил) изохинолиний) дихлорид. Фракции 34-36 комбинируют и продукт выделяют аналогично соединению H. Из них получают 2,0 r белой пены, Pc+ р = — 54,0 (1,5/ Н О). Н ЯМР (СЭС1з) или TMC,I! : 6,64 40 (c, H5, 2H); 6,42 и 6,25 (2с, Н2 и 6, 4Н); 5,75 (с, Н8, 2Н). Вычислено, %: С 61, 28; Н 7,76; N 2 36; Сl б 01 Сз Н (1! )О!+С1 l,э Н О 1,3 С Н ОН 45 Найдено, %: С 61,32; Н 7,71; N 2,36; Cl 5,97. Соединение I (10 мг) в 1%-ной водной фосфорной кислоте (10 мл) нао гревают при 60-70 С в течение 18 ч 50 и анализируют с помощью ЖХВД. Наблюдают равные количества цис- и трансчетвертичных солей, Зто подтверждается совместными инъекциями с соединениями А и В. 55 Соединение J. (Е)- (1 R, 1 R, 2S, 2 S)-2,2 — (4-Октендиоил-бис(окситриметилен)!бис (1,2,3,4-тетрагидро-6,7! l0 диметокси-2-метил- — { 3, 4,5 т»«t=.òoкс sбенз ил) из охинолиний) дихло риц, Комбинируют фракции 56-6 б и продукт выделяют по методике выделения соединения H Из них выделяют 0,9 г .г -= -,о не совсем белой пены: с ) =-76,7 (1,5% в Н 0) . H ЯМР (CDC1„) из ТМС, в: 6,64 (с, Н5, 2Н), 6,42 (с, Н2 и 6, 4H), 5, 76 (с, Н8, 2Н) . Вычислена, %: С 59,03; Н !,99; N 2,63; Cl 6,63 СрНь,А О,!!С1 . 3 Н О - ., 7, li ОН О, 4 (С1! 1) < i!C l Найд но, %: С 59 02, Н 7 99; 2,62; С! 6„64 ° Соединение 1,1О мг) в 1% — най водной фосфорной кисл! оте (1 О пл) нагр е о„ вают при 60-70 С в течение 18 ч и анализируют с помощью МЖВД. Наблюдается транс-четвертичная соль до ис— ключения цис-четвертичной соли. Зто подтверждается совместными инъекциями с соединениями А и В. Соединения предлагаемой формулы являются мощными нервно-мш!ечноблокирующими средствами, проявляющими относительно короткую продолжительность действия„ составляющую например около 10 мин при испытании на обезьянах. Зти соединения характеризуются недеполяризующим механизмам действия, являются фарм!экологически обратимыми, обеспечивают а тносительно быстрое наступление действия, что является положительным эффе .том, имеющим исключительно большое значение в хирургии неотложных состояний. Соединения гредлагаемой формулы используются в качестве нер внс-мышечно блокирующих средств при проведении хирургических операций или ин— тубации тр ахеи, для чего их вводят традиционным парэнтеральным путем, например впутримышечным или внутривенным вливанием. Предлагают также способ расслабления мускулатуры у млекопитающих, заключающийся в том, что млекопитающим вводят эффективно действующее нервно †мышеч блокирующее количество соединение предлагаемой формулы. Соединение предлагаемой формулы может применяться в медицине или ветеринарии, особенно для расслабления мускулатуры у млекопитающих. Соединения вводят субъектам, таким как обезьяны или людям, и дру1468414 12 гим млекопнтающим с целью достижения нервно-мьппечной блокады. Дозировка для каждого типа субъектов варьируется в связи с характерными особеннос тями каждого вида. Однако подходящее количество при внутривенном введении или дозировка соединений предлагаемой формулы для достижения паралича у млекопитающих составляет 0,01-0,50 мг/кг массы тела, а наиболее предпочтительно 0,025-0,3 мг/кг массы тела, причем укаэанный показатель рассчитан по массе ди-катиона, являющегося активным ингредиентом. Дозировка для внутримьппечного введения в два-четыре раза выше внутривенной дозы. Соединения, являются обратимыми по своему действию при употреблении традиционных антихолинэстеразных средств,. таких как неостигмин и эдрофоний, и тем самым устраняются побочные эффекты„ сопряженные с применением традиционных кедеполяризующих средств. Поэтому предлагаемые соединения полезны дпя обеспечения короткой по продолжительности действия нервномышечной блокады у человека, а также у других млекопитающих, и согласно изобретению предлагается способ создания такой блокады у млекопитающих с помощью внутривенной инъекции млекопитающему дозы, составляющей 0,010,50 мг/кг массы тела. Профиль нервно-мышечной блокады у таких млекопитающих, как обезьяны, ана- логичен наблюдающемуся у людей, и предлагаемые соединения рассматриваются в качестве препарата коротко го действия для применения на обезьянах. Возможно употребление предлагаемых соединений в качестве химических средств, действующих в массе, более предпочтительно использование их в виде фармацевтической композиции, в частности фармацевтической композиции для парэнтерального приема. Предлагается фармацевтическая композиция, которая содержит соединение предлагаемой формулы, определенное вьпие, и фармацевтически допустимый носитель. Когда фармацевтическая композиция предназначена для парэнтерального приема, композиция может быть водным или неводным раствором или эмульсией в фармацентически допустимой жидкос5 55 ти или смеси жидкостей, которая может содержать бактерио статические средства, антиоксиданты, буферы, загустители, суспендирующие вещества или другие фармацевтически допустимые добавки. Соединения могут быть представлены в виде лиофилизованных твердых веществ для восстановления их лекарственной формы водой (для инъекций) или растворами декстрозы или соли. Такие композиции обычно выпускаются в виде единичных дозировочных форм, таких как ампулы или выбрасываемые инъекционные приспособления одноразового употребления, или множественно-дозировочных форм, таких как пузырьки, из которых может быть извлечена необходимая доза, все такие композиции должны быть стерильными. Подходящая единичная доза для достижения нервно-мышечной блокады у взрослых людей (массой около 150 фунтов или 70 кг) составляет 0,530 мг, наиболее предпочтительно 3,5)5 мг. Соединения при необходимости могут употребляться в сочетании с описанными депапяризующими средствами . Таким образом, подходящий фармацевтический препарат для парэнтералького введения людям содержит 0,15 мг/мл соединения предлагаемой формулы в растворе или кратные количе-. ства в случае многодозировочных пузырьков. Простой и предпочтительной композицией является раствор предлагаемого соединения в воде или декстрозном растворе, который может быть приготовлен простым растворением соединения в свободной от пирогенных веществ воде ипи воде, содержащей декстрозу, при наличии или отсутствии консерванта, и стерилизацией раствора, или же растворением стерильного соединения в свободной от пирогенных веществ стерильной воде или стерильном растворе декстрозы в асептических условиях. Эти соединения могут быть также введены вливанием в декстрозном или солевом растворе, например в растворе Рингера, с применением капельницы, кроме того, могут быть также введены в других растворителях (обычно в смесевом растворителе с водой), таких как спирт, полиэтиленгликоль и диме"! 4684!4 Габ.пнца Со единеКошки Макаки-резус ние Блокада, Длител,— Доз а, мг/кг (внутривенно) Бло када, Дли тельДоэ я, мг/кг 7. ность, ность» мин 56+)2 78+10 79+4 96+ 3 0,04 0,05 0,04 0,05 I 0+ 2 13+ 1 12 2 1 2+3 3 э » 11 0,02 27 0,04 99 0„02 83 0,03 10о "Время от внутривенной инъекции до 957 восстановления. +% Внутривепная доза, обеспечивающая 9 r. нервно-мышечный 5-. парапич подергивания передней большеберцовой мышцы, полученная экстраполяцией кривых зависимости между дозой и ответной реакцией . ! 1ервно-мьш ечно бло кируюцая доз а ED< определяется по той причине, что она соотнесена со степенью паралича мышцы, необходимой для безопас— ного облегчения выполнения быстрой и неосложненной интубации в случае теЕР ., кг/кг ных (внутривенно) 0,093+0,005 0,086 0 010 0,05720,005 >(1, 40 0,054+0,004 0,054+0,005 12 12 С G Н J тилсул ьфо ксил, а та кж» пну тримыш ечно (при необходимости с помощью капельницы) в виде суспепэии или раствора. Биологическая активность. Кошек анестеэируют альфа-хлор ал оз ой (80 мг/кг) и пентобарбиталом (10 мг/кг) вну трибрюшинно. Обезьян получают тиопентал (35-40 мг/кг) внутримышечно, а затем галотан (0,5107) инг аля ционно, з акись аз ота (60%) и кислород (407) в системе без последующей подачи кислорода. У всех животных интубируют трахею и вентиляцию контролируют на уровне 1215 мл/кг, 18 — 24 вдохов в минуту, Животных, не получающих ингаляционные р апе втиче ского и спольз о вания нервномышечно блокирующих средств. Величины ЕР для кошек приведены в табл ° 2. Время от внутривенной инъекции до 95% восстановления. средства для нарко з а, вентнлируют комка тным во эдухом ..!1е вую бедр с н ук вену и ар терию канюлируют для введс5 ния лекарства и записи Bpòåðèæò!.-.ного давления соответственно. На брюшпнньй нерв с частотой О, 15 Гц подают импульсы квадратной формы супрамаксимального напряжен;»я и регистрируют )Q вызванные этим подергиванием передней большеберцовой мьпццы . Все записи делак1т на самон..сце. Непосредственное сравнение соединения G (ди астер ео из омер ная смесь) 15 и соединения 1 (RS RS диастереоиэомер соединения О) на коц к х (п=3) макаках-резус (v..=1} приведено в табл. 1. Табл. 1 показывает, что на кошках и макаках — резус ссединения С и J характеризуются идентичными профилями нер вно — мышечной бл о кадь;, но с и сключением того факта, что для обоих BE . дов соединение I оказывае-.ñÿ,как минимум на 20-25% бсгпее сильнодсй стВ юцим чем со единение С, В табл . 2 указана доза, несбходимая для обеспечения 95%-ной нервномышечной блокады (Е!», ) у животных в подопытной группе для приведенных соединений предлагаемой формулы. Токсичность. Три группы по четыре собаки породы бигль обрабатывают дважды в неделю в течение трех недель средой-носителем, пять раз вводят соединение G (доза ED „ д ) или соединение G пятнадпать раз (доза ЕЗ„,»,» ) . Каждый циюп обработки состоит из начальной инъекции болюса с 0 с н,-с нд-c oQq,) Дсн9 a cp> се>о ер>о СН 0HS ан1 2 С ° 2 Н<0 Ос Н OCH) сн о оси оси 20 3 © 3 Формула изобретения ИЗС N (CH2j3,К Способ получения производных изохинолиния общей формулы сн30 41 сн Й снЖ Т (сн 1 0ссн сн снснсн сн с01ю ) T сснь а сн, сн, сн,с осн, сн,о ссн Осн, н, где Х вЂ” анион, отличающийся тем,что соединение формулы Со стави тел ь Г. Жуко ва Редактор M. Бланар Техред Jl. Сердюкова Корректор В. Романенко Заказ 1218/58 Тираж 352 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 l5 14684 посс едующей непрерывной инфуэией течение двух часов. Всех собак анестезируют пентобар5 биталом и в ходе цикла обработки обеспечивают искусственную вентиляцию легких. Все собаки выжили и не 14 16 наблюдалось никаких пагубных эффектов. В табл. 1 отмечена активность на обезьянах 99% блокирующих доз, равных 0,04 и 0,03 мг/кг, что в более чем десять раэ меньше, чем величины для структурного аналога формулы сн,о осн О 3 где Х имеет указанное значение; У вЂ” оксигруппа, подвергают взаимодействию с соединением формулы 0CCH CH CH CHCH CH COZ где Z — хлор, с выделением целевого продукта.
