Способ получения производных 7-оксо-1-азабицикло(3,2,0) гепт-2-ен-2-карбоновой кислоты
Изобретение касается гетероциклических веществ в частности получения производных 7-оксо-1-азабицикло (3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоновой кислоты общей ф-лы 1 @ , где R<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил R<SB POS="POST">2</SB>-C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкил, бензил или алкилкарбоксиметил R<SB POS="POST">3</SB>-H, пара-нитробензильная защитная группа при наличии противоиона A--(CH<SB POS="POST">2</SB>)- или -(CH<SB POS="POST">2</SB>)<SB POS="POST">2</SB>- - @ N<SP POS="POST">+</SP>-моноили дизамещенные C<SB POS="POST">1</SB>-C<SB POS="POST">4</SB>-алкилом группы @ @ @ @ @ @ @ @ , причем указанное кольцо присоединено к A через углерод кольца и содержит азот, кватернизированный R<SB POS="POST">2</SB>, которые обладают антибактериальной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - создание новых активных и малотоксичных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соответствующего кетоэфира (вместо группы S-A- @ N<SP POS="POST">+</SP>-R<SB POS="POST">2</SB> в ф-ле 1 содержится "о")дифенилхлорфосфатом в присутствии диизопропиламина в среде инертного органического основания с последующей обработкой производным меркаптана формулы HS-A- @ N, где A и @ N- см.выше, в среде инертного органического растворителя в присутствии диизопропилэтиламина и дальнейшим алкилированием соединением ф-лы R<SB POS="POST">2</SB>-X, где X- галоген или группа сульфонатного сложного эфира R<SB POS="POST">2</SB>-см.выше. Выделение целевого продукта ведут в свободном виде или при необходимости, когда R<SB POS="POST">3</SB>-пара-нитробензильная группа, удалением карбоксизащитной группы. В другом случае исходят из соединения, содержащего группы -S-A- @ N, которое алкилируют соединением ф-лы R<SB POS="POST">2</SB>X с аналогичным выделением или удалением карбоксизащитной группы. Новые вещества имеют невысокую токсичность, например, ЛД<SB POS="POST">50</SB>= 14 мг/кг при активной дозе 5 мг/кг (без признаков токсичности) в отношении к различным грамотрицательным и грамположительным бактериям. 2 с.п. ф-лы, 7 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
Ш 4 С 07 D 451/06
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ПАТЕНТУ
Н С-СН(ОН1 — -Г--С("Hl-HCRg s — А- — Н1, о ч — — — — — с(о)-оа, I а
N-Х- S
3l: - l
N=N N
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГННТ СССР! ,(21) 3648007/23-04 (22) 27.09.83 (31) 425755, 530011 (32) 28.09.82, 09.09.83 (ЗЗ) US (46) 07.07.89. Бюл. N 25 (71) Бристоль-Мейерз Компани (Us) (72) Чунг Ун Ким (US) (53) 547.816.07(088 ° 8) (56) Патент Англии !! - 2112391, кл. С 07 D 205/04, 1983.
Патент С1дА !! 3950357, кл. 260-326.27, 1976. где R - С -C4-алкил; R g — С !-С,!-алкил, бензил или алкилкарбоксиметил;
R — Н пара-нитробензильная защитная
Я э группа при наличии противоиона; А—
-(CH <)- нлн -(СНн) о-, QI4 — моно- нлн дизамещенные С s С i-àëêèëoì группы.
N — Х
Х 1Ч !
N ! причем указанное кольцо присоединено к А через углерод кольца и содержит азот, кватернизированный R<, которые обладают антибактериальной активностью, что может быть использовано в медицине. Цель — создание новых активныМ и малотоксичных веществ указанного класса. Синтез ведут реакцией соответствующего кетоэфира (вмесго,.SU„„1493108 А 3
2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ 7ОКСО-1-АЗАБИЦИКЛО (3, 2, О) ГЕПТ-2-ЕН-2КАРБОНОВОЙ КИСЛОТЫ (57) Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности получения производных 7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоновой кислоты общей формулы
0+ группы S-А N- R g a ф-ле (I) соС: держится О) дифенилхлорфосфатом в присутствии диизопропиламина в среде инертного органического основания с последующей обработкой производным
IaasL меркаптана формулы HS-А- N,ãäå А и - Я см. выше, в среде инертного органического растворителя в присутствии диизопропилэтиламина и дальнейшим алкилированием соединением ф-лы
Rе - Х, где Х вЂ” галоген или группа сульфонатного сложного эфира; R — см. вьппе. Выделение целевого продукта ведут в свободном виде или при необходимости, когда R > — пара-нитробензильная группа, удалением карбоксизащитной группы. В другом случае исходят из соединения, содержащего группы -S-А — (-, которое алкилируют
1493108
ОН
Н (: — — и С
В1
$ — А Ы-Н1 где Н
R й
Э
С 40 соединением ф-ды R ".. с аналогичным выделением или удалением карбоксизащитной группы. Новые вещества имеют невысокую токсичность, например, ЛД, = 5
14 мг/кг при активной дозе 5 мг/кг
Изобретение относится к области получения новых карбапенемных производных, а именно производных 7-оксо1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоновой кислоты общей формулы
О COOR
20 водород или С -С -алкил, С1-С+-алкил, бензил или алкилкарбоксиметил; водород или пара-нитробен25 зильная защитная группа при наличии также и противоиона; группа (СН )„, где n = 1 или 2; моно- или дизамещенные
С „-C4-алкилом группы: причем указанное кольцо присоединено к А через атом углерода кольца и содержит 45 атом азота, который кватернизирован группой R, обладающих антибактериальной активностью по отношению к различным грамотрицательным и грамположительным бактериям.
Целью изобретения является разработка на основе известных методов способа получения новых соединений, обладающих ценным фармакологическим свойством при низкой токсичности.
Пример 1. Получение внутренней соли 1-метил-4-(2-карбокси)6 Ы- Я1- (R) -оксиэтил )-7-оксо-1-аза би(без признаков токсичности) в отношении к различным грамотрицательным и грамположительным бактериям. 2 с.п. ф-лы, 8 табл. цикло(3,2,0)гепт-2-ен-3 -тиометил пиридиний гидроксида.
А. Раствор 673 мг (1,86 ммоль) пара-нитробензил-6о/-(1-(R)-orccvax )3,7-диоксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт2-ен-2-карбоксилата (соединение I) в о
10 мл ацетонитрила охлаждают до -10 С в атмосфере азота. Прибавляют раствор
245 мг (1,90 ммоль) диизопропилэтиламина в 1 мл ацетонитрила, а затем по каплям в течение 2 мин прибавляют
510 мг (1,90 ммоль) дифенилхлорфосфата в 1 мл ацетонитрила. Результирующий раствор перемешивают при -10 С в течение 15 мин с получением пара-нитробензилового эфира 3-(дифенилфосфорилокси)-бо -1 1 — (Г) -оксиэтил 1-7-оксо1-азабицикло (3,2,0) гепт-2-ен-2-карбоновой кислоты. К этому раствору прибавляют раствор 245 мг (1,90 ммоль) диизопропилэтиламина в 0,5 мл ацетонитрила, а затем раствор 270 мг (2,16 ммоль) 4-меркаптометилпиридина в 0 5 мл ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают при -10 С в течео нне 60 мин, и образовавшийся белый осадок собирают фильтрованием, промывают 5 мл охлажденного льдом ацетонитрила и получают 660 мг (выход 76X) и-нитробенэил-3-(пиридин-4-ил-метантио)-6И-(1-(R)-оксиэтил 1-7-оксо-1азабицикло (3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата в виде белых кристаллов, т.пл.
145о С, Рассчитано: С 58,01; Н 4,56;
N 9,23; S 7,04.
С Нф,N P S
Найдено: С 57,74; Н 4,56;
М 9,58; S 7,21.
К раствору 660 мг (1,41 ммоль) промежуточного соединения 2 в 140 мп ацетона прибавляют 5 мл иодистого метила. Раствор реагентов перемешивают при 25 С в течение 8 ч. Растворитель выпаривают под вакуумом и получают бледно-желтое твердое соединение, которое растирают с диэтиловым эфиром и получают 779 мг (выход 90X) и-нитробенэил-3-(И-метилпиридин-4ил-метантио) - H- (1-(R) -оксиэтил 1-7оксо-1-а за бицикло (3, 2, 0) гент-2-ен-2карбоксилата в виде белого аморфного о твердого соединения, т.пл. 130 С (c
5 разложением).
Рассчитано: С 44,39; Н 4,22;
N 6,82; S 5,20 °
С, эН„М,О,Я, Н,О
Найдено: С 44 66; Н 4,0; Я 6,84;
S 5,64.
В. К раствору 779 мг (1,27 ммоль) соединения 3 в смеси тетрагидрофуран— вода — диэтиловый эфир (80 мл — 80 мл—
100 мл) прибавляют 140 мг (1,4 ммоль) бикарбоната калия и 125 мг (0,7 ммоль) дикалийфосфата. Затем прибавляют
700 мг 10Z-ного палладия на угле и смесь гидрируют при 2,8 атм в течение
45 мин в шейк ре Парра. Затем смесь фильтруют и катализатор промывают водой (2х10 мл). Объединенные фильтрат и промывные воды экстрагируют диэтиловым эфиром (150 мл), лиофилизуют и получают коричневьпй порошок. Это сы- 25 рое соединение очищают на обращеннофазовой колонке с 30 г С< ВОБЛ)АРАК (Water Associates) элюируя водой при давлении 0,56 атм. Каждую фракцию (20 мл) анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, фракции, поглощающие УФ при3 д„,=
300 нм, собирают, лиофилизуют и получают 135 мг (выход 32Å) указанного в заглавии соединения 4 в виде слабо-желтого твердого соединения.
Пример 2. Способ получения
3-(N-метилпиридин- 4-ил-этантио)-6с (1-(Р)-оксиэтил 3-7-оксо-1-азабицикло(3 2 0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
1 У
А. Суспензию 1,1 r (2,93 ммоль)
3d- (! — (R)-оксиэтил -4 Р- (3-диазо-3-инитробензилоксикарбонил-2-оксопропил)азетидин-2-она в 30 мл сухого бензола в течение 5 мин продувают азотом при комнатной температуре. Ее обрабатывают 25 мг димера ацетат родня и смесь кипятят с обратным холодильником в течение 45 мин. Теплый раствор разбавляют этилацетатом (25 мл) фильтроваЭ
50 нием удаляют катализатор, выпаривают до сухого остатка и получают и-нитро1 бензил-6-(1-(R)-оксиэтил »-3,7-диоксо1-азабицикло-(3,2,0) гепт-2-ен-карбоксилат.Это соединение растворяют в сухом ацетонитриле (20 мп) и охлаждают
55 до -1О С. К этому раствору при продувании азотом прибавляют 417 мг (3,2 ммоль) диизопропилэтиламина, а
5 1493108 затем 810 мг (3,0 ммоль) дифени:t. õ..... ðфосфата, и реакционную смесь lie(» мешн— вают при †10 в течение ?О титц. Затем реакци нную смесь обрабатывают диизопронилэтиламином (420 tн., 3,2 ммоль) и 2-(4-пиридил)этантнолом (560 мг, 4,03 ммоль) в 2 мл ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают при температуре от -5 до -10 С
О в течение 1 ч, затем разбавляют метиленхлоридом (100 мн) и тщательно промывают смесью рассол — Н О (1:1), 4Е-ной фосфорной кислогой, 57.-ным бикарбонатом натрия, водой и рассолом. Органическую фазу сушат (над сульфатом магния), выпаривают и получают белое твердое соединение. Это твердое соединение промывают смесью диэтиловый эфир — гексан (1:1), сушат над высоким вакуумом и получают 901 мг (63,9Е) и -нитробензил-3-(.i-метилпирндин-4-ил-этантио )-бсср-(! †(R)-оксиэтил»7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен2-карбоксилата.
В. Суспензию полученного «а стадии
А карбапенема (890 мг, 1,85 ммоль) и 7 мл иодометана в 200 мл сухого ацетона и 12 мл метиленхлорида пере
0 мешивают при 25 С в течение 24 ч. Реакционная смесь образует прозрачньп раствор за 18 ч. Растворитель удаляют при пониженном давлении, остаток промывают диэтиловым эфиром и получают 920 мг (1,48 ммоль; 79,87) 3-(Nметилпиридин- 4-ил-этантио)-6а(- 11-(R)— оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-с»-2-карбоксилата в виде твердой лены.
С. Карбапенем со стадии В (920 r, 1,47 ммоль) растворяют в 90 мл тетрагидрофурана, 90 мл диэтилового эфира и 90 мл воды и обрабатывают 265 г (1,51 ммоль) дикалийфосфата, 190 мг (1,9 ммоль) бикарбоната калия и 800 мг
107-ного палладия на угле. Проводят гидрирование при 3,15 атм в течение ! u. Фильтрат отфильтровывают на . CELITE и промывают диэтиловым эфиром (Зх25 мл). Водный слой лиофилизуют, получая коричневатое соединение, которое затем дважды хроматографически очищают на обращенно-фазовой колонке с 12 r С g/Ñ ВОЯ)АРАК (Waters
Associates) с использованием воды в качестве элюента, и получают 55 мг
3-(N-метилпиридин-4-ил -этантио- 6А
1-(К)-оксиэтил 1-7-оксо-1-азабицикло3,2,0)гепт-2-ен-карбоксилата
1493108 8
Пример 3. Получение 3-(Мметилпиридин — 3-илметантио)-6Ы- (1 †(R)оксиэтил3-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гент-2-ен-2-карбоксилата.
А. Пара-нитробензиловый эфир 3(пиридин-3-ил-MGTHJITHo) 6d-(1 (R) QK сиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоновой кислоты.
К охлажденному (О С) раствору
925 мг (2,66 ммоль) и -нитробензил3,7-диоксо-(1-(R)-оксиэтил )-1-азабицикло(3,2,0)-гептан-2-карбоксилата в
14 мп ацетонитрила прибавляют раствор 377 мг (2,9 ммоль) диизопропилэтиламина в 1 мл ацетонитрила, а затем раствор 786 мг (2,9 ммоль) дифенилхлорфосфоната в 1 мп ацетонитрила в атмосфере азота. Результирующий раствор перемешивают при О С в течение
15 мин, а затем прибавляют раствор
377 мг (2,9 ммоль) 3-меркаптометилпиридина в 2 мп ацетонитрила. Реакционный раствор перемешивают в течение
90 мин при О С. Осадок собирают фильтрованием, промывают 20 мл ацетилацетата и получают 950 мг (выход 607) указанного соединения в виде белых кристаллов.
Рассчитано: С 58,01; Н 4,65;
N 9,23; $ 7,04.
С,, Н,, 0,8, Найдено: С 57,19; Н 5,19; N 8,76;
S 7,08.
В. Получение 3-(N-метилпиридин-3ил-метантио)-бсср-(1-(R)-оксиэтил )-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-енкарбоксилата.
К раствору 730 мг (1,56.ммоль) полученного соединения в 120 мл ацетона прибавляют 5 мл метилиодида и ре» акционную смесь перемешивают в течение 18 ч при комнатной температуре..
Осадок собирают фильтрованием, промывают ацетоном (10 мл) и получают .
940 мг (выход 1007) кватернизованногд пиридина — натрий 3-(N-метилпиридин3-ил-метантио-6d-(1-(R)-оксиэтил)-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2карбоксилата — в виде бледно-желтогб порошка.
Рассчитано:С 46,24; Н 4,05;
N 7,03; $ 5, 37.
С Нi НэО Б,I
Найдено: С 45,82; Н 4,11; И 6,87;
S 6 10.
К раствору 933 мг (1,6 ммоль) полученного соединения в 90 мп тетрагидрофурана и 90 мп эфира прибавляют
200 мг КНСОЗ и 349 мг К НРО в 90 мп воды, а затем 1,0 r палладия на угле.
Смесь гидрируют при 3,15 атм в шейкере Парра в течение 45 мин. Смесь отфильтровывают на слое СЕЫТЕ и катализатор промывают водой (2х10 мл) . Объединенные фильтрат и промывные воды экстрагируют диэтиловым эфиром (2х100 мп), лиофилизуют и получают желтое твердое соединение, которое очищают на обращенно-фазовой колонке с 8 г С ВО1П)АРАК (Waters Associates) и элюируют 5Х-ным раствором ацетонитрила в воде при давлении 0,56 атм. Каждую фракцию по
15 мп анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, фракции, поглощающие УФ при
300 нм, собирают, лиофилизуют и получают 230 мг (выход 43X) указанного в заглавии соединения в виде бледножелтых кристаллов, т. пл. 130 С (c разложением).
Рассчитано: С 51,87; Н 5,44; .
25 N 7,56.
С Н < И О . „Н О
Найдено: С 51,95; Н 5,66; М 7,56.
Пример 4. Получение 3-(N-метилпиридин-2-ил-метантио)-64-(1-(R)оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
А. Пара-нитробензил-3-(пиридин- 2ил-метантио)-6 -(1-(R)-оксиэтил)-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2карбоксилат.
К охлажденному (О С) раствору
925 мг (2,65 ммоль) и-нитробензил3,7-диоксо-(1-(R)-оксиэтил)-1-азабицикло(3,2,0)гептан-2-карбоксилата в
40 15 мл ацетонитрила прибавляют раствор 377 мг (2,92 ммоль) диизопропилэтиламина в 1 мл ацетонитрила, а за тем 786 мг (2,90 ммоль) дифенилхлор. фосфата в 1 мл ацетонитрила в атмо4 сфере азота. Полученный раствор перемешивают при 0 C в течение 15 мин, прибавляют раствор
377 мг (2,92 ммоль) диизопропилэтиламина в 1 мл ацетонитрила, а затем раствор 350 мг (3,0 ммоль) 2-меркаптометилпиридина в 1 мл ацетонитрила.
Реакционный раствор перемешивают в о течение 2 ч при -10 С. Осадок собирают фильтрованием, промывают 20 мп
56 метиленхлорида и получают 650 мг (выход 543) указанного соединения в виде желтого порошка.
Рассчитано: С 58,01; Н 4,65;
N 9.23; $ 7,04.
1493108
С Н, N.О S
Найдено: С 57,56; Н 4,92; N 8,94; S 7,03.
В. Получение 3-(N-метилпиридин-2ил-метантио)-6<4-(1-(К)оксиэтил!-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2карбоксилата.
К раствору 650 мг (1,39 ммоль) и-нитробензил-3-(пиридин-3 -ил-метан тио)-бс(-(1-(R)-оксиэтил7-7-оксо-1азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата в 100 мл ацетона прибавляют
4 мл метилиодида. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 дней при комнатной температуре. Осадок собирают фильтрованием, промывают ацетоном (10 мл) и получают 500 мг (выход 60X) кватернизованного пиридинародиевая соль 3-(N-метилпиридин-2ил-метантио)-6al-(1-(R)-оксиэтил 1-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2карбоксилата — в виде бледно-желтого твердого соединения.
Рассчитано: С 46,24; Н 4,05;
N 7,03; $ 5,37.
23 14 3 6 1
Найдено: С 45,62; Н 4,27; N 6,80;
S 5,30.
К раствору 1,0 г (1,167 ммоль) полученного соединения в 90 мл тетрагидрофурана и 90 мл диэтилового эфира прибавляют 215 мг (2,15 ммоль)
КНСОЗ и 374 мг (2, 1 ммоль) К НРО в
90 мл воды, а затем 1 r !OX — íîãî палладия на угде. Смесь гидрируют при
3,15 атм в шейкере Парра в течение
45 мин ° Смесь отфильтровывают через слой СЕЫТЕ и катализатор промывают водой {2х10 мп). Объединенные фильтрат и промывные воды экстрагируют диэтиловым эфиром (2х200 мл), лиофилизуют и получают желтое твердое соединение, которое очищают на обращенно-фазовой колонке с 10 r С, BONDAPAK (Waters Associates) при давлении
0,56 атм с использованием в качестве элюента 5Х-ного раствора ацетонитрила в воде. Каждую фракцию по .15 мл анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, фракции, имеющие поглощение УФ при 7!
= 300 нм, собирают, лиофилизуют и получают 390 мг (выход 44X) указанного продукта. Перекристаллизацией этого соединения из смеси вода — ацетонэтанол получают тонкие игольчатые кристаллы, т пл. !94-196 С (с разложением). l0
Рассчитано: С 51,87; Н 5,44;
N 7,56.
С Н И О „Я „2Н О
Найдейо: С 51,37; Н 5,69; N 7,37.
Пример 5. Получение 3-(Nметилпиридин-2-ил-этантио)-6d-(1 †(R)оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
А. Пара-нитробензил-3-(пиридин-2ил-этантио)-64- (1 — (R) -оксиэтил J-7оксо-1-азабицикло (3,2, О) гепт-ен-2карбоксилат.
К охлажденному раствору 1,78 г (5,0 ммоль) п -нитробензил-6с(-(! †(К)— оксиэтил j-3,7-диоксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксиаата в
25 wr ацетонитрила прибавляют 710 мг (5,5 ммоль) диизопропилэтиламина в
1 мл ацетонитрила, а затем 1,4 r (5,0 ммоль) дифенилхлорфосфата в 1 мл ацетонитрила в атмосфере азота.
Полученный раствор перемешивают в течение 20 мин при 0 С, прибавляют о раствор 710 мг (5,5 ммоль) диизопропилэтиламина в l мл ацетонитрила, а затем раствор 850 мг (6,1 ммоль) 2меркаптоэтилпиридина в 2 мл ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают
60 мин при 0 С. Осадок собирант фильто рованием, промывают метиленхлоридом (20 мл) и получают 1,3 г (577.) указанного соединения в виде твердого желтого продукта.
В. Получение 3-(N-метилпиридин-2ил-этантио)-64-(1-.(R)-оксиэтил)-7-оксо-1-аэабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата, К суспендированному раствору 800 мг (1,7 ммоль) полученного соединения в
50 мл ацетона прибавляют 5 мл метилиодида. Реакционную смесь перемешивают в течение 48 ч при комнатной температуре. Осадок собирают фильтрованием, промывают ацетонитрилом (15 мл) и получают 810 мг (выход 767) кватернизованного пиридина — иодистая соль
3-.(N-метилпиридин-2-ил-этантио)-6Q11-(R)-оксиэтил j-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата — в виде бледно-желтого порошка.
К раствору 790 мг (1,27 ммоль) полученного соединения в 100 мл тетра. гидрофурана и 100 мл эфира прибавляют
100 мп буферного раствора рН 7,0, а затем 1,0 г 1ОХ-ного палладия на угле.
Смесь гидрируют при 2,8 атм в шейкере
Парра в течение 40 мин.Смесь с тфильт1493108
l2 ровывзют на слое CFI.ITE и катализатор промывают водой (2x10 мл) °
Объединенные фильтрат и промывные воды экстрагируют эфиром (3x100 мл, лиофилизуют-и получают желтый порошок, 5 который очищают на колонке с 30 г
С BOIJDAPAK (Waters Associates) при давлении 0,56 атм, используя в качестве элюента 10 -ный раствор ацетонитрила в воде.
Каждую фракцию по 15 мл анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, фракции, имеющие поглощение УФ приЯ „ = 300 нм, соби- 15 рают, лиофилизуют и получают 65 мг (выход 15 ) указанного соединения в виде желтого порошка.
Пример 6. Получение 3-(IJ-. пропилпиридин-4-ил-метантио)-ба(-(1 в 20 (R)-оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
А. Получение пара-нитробензил-3(пиридин-4-ил — метантио)-64- 1-(R)-оксиэтил1-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0) — . 5 гепт-2-ен-2-карбоксилата.
Раствор 673 мг (1,86 ммоль) паранитробензил-6 4-(1 †(R)-оксиэтил1-3,7диоксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен2-карбоксилата в 10 мл ацетонитрила 30 охлаждают до -10 С в атмосфере азота. о
Прибавляют раствор 245 мг (1,90 ммоль) диизопропилэтиламина в 1 мл ацетонитрила, а затем в течение 2 мин по каплям прибавляют раствор 510 мг . (1,90 ммоль) дифенилхлорфосфата в
1 мл ацетонитрила. Результирующий раствор перемешивают при -10 С в течео ние 15 мин и получают пара-нитробензил-3- (дифенилфосфорилокси) -6 -(1 — (Р)—
40 оксиэтил 1-7-оксо-1-азабицикло (3, 2, 0)гепт-2-ен-2-карбоксилат. К этому раствору прибавляют раствор 245 мг (1,90 ммоль) диизопропилэтиламина в
0,5 мл ацетонитрила, а затем раствор
270 мг (2,16 ммоль) 4-меркаптометил45 пиридина в 0,5 мл ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают при -10 С о в течение 60 мин, образовавшийся белый осадок собирают фильтрованием, промывают 5 мл охлажденного льдом ацетонитрила и получают 660 мг (выход 76%) продукта в виде белых кристаллов, т. пл. 145О С.
Рассчитано: С 58,01; Н 4,56; N 9,23;
С ьН „N O S
Найдено: С 57, 74; Н 4,56; N 9,58;
S 7,21.
В. Получение иодистой соли и-нитробензил-3-(1-аллилпиридин-4-ил-метантио)-6c(-(1-(R)-оксиэтил)-7-оксо1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-3-2карбоксилата.
К раствору 900 мг (2,13 ммоль) нитробензил-3-(пиридин-4-ил-метантио)-бс(-(1-(R) îêñèýòèë )-7-оксо-1— азабицикло(3,2,0)-гепт-2-ен-2-карбоксилата в 150 мл ацетона прибавляют
? мл аллилбромида и 380 мг иодистого натрия. Смесь перемешивают в течение
48 ч при комнатной температуре, растворитель выпаривают под вакуумом и получают желтое твердое соединение.
Это соединение суспендируют в 120 мл ацетонитрила, фильтруют, выпаривают под вакуумом и получают 1,0 г (выход
87 ) указанного продукта в виде желтого твердого соединения.
Рассчитано: С 48,16; Н 4,21;
N 6,74; S 5,15.
Су Н l
Найдено: С 48,55; Н 4,46; N 6,69;
S 5,15.
С. Получение 3-(1-пропилпиридин-4ил-метантио)-бс(-1 1-(Г)-оксиэтил)-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2карбоксилата.
К раствору 1,27 г (2, 15 ммоль) соединения стадии В в 100 мл тетрагидрофурана и 100 мл эфира прибавляют
100 мл буфера рН 7, а затем 1 0 r
10%-ного палладия на угле. Смесь гидрируют при 2,8 атм в аппарате Парра в течение 40 мин. Смесь фильтруют на слое цеолита и катализатор промывают водой (2х10 мл). Соединенные фильтрат и промывные воды экстрагируют эфиром (3xl00 мл), лиофилизуют и получают желтый порошок, который очищают на колонке с 40 r С s BONDAPAK (Waters
Associates) при 0,56 атм с использованием в качестве элюента 10 -ного раствора ацетонитрила в воде. Каждую фракцию по 15 мл анализируют с по" мощью жидкостной хроматографии высокого давления, фракции, имеющие по. глощение УФ при 71 „ 300 нм, собирают, лиофилизуют и получают 48 мг (выход б ) указанного соединения в виде желтого порошка.
Рассчитано: С 54,52; Н 6,10;
N 7,07.
C )(H22N204S - H O
Найдено; С 54,32; Н 6,03; N 6,99.
Пример 7. Получение 3-(Nметил-3-метилпиридин-2-ил-метантио)1493108
13!
60((1 (R) -оксиэтил 2 -7-оксо-1-азабицикло (3,2,0) гепт-2-ен-2-карбоксилата.
А. Получение 3-метил-2-меркаптометилпиридина.
Раствор 2,45 г (17,0 ммоль) 2-хлорметил-3-метилпиридина и 1,37 г (18,0 ммоль) тиомочевины в 60 мл абсолютированного этанола кипятят с обратт2ым холодильником в течение 5 ч. 10
Выпариванием этанола и последующим прибавлением эфира получают 3,08 г (выход 727) соли изотиомочевины, которую растворяют в 10 мл воды, содержащей 1,44 г (26 ммоль) гидроокиси 15 натрия. Затем раствор нагревают при
100 С в течение 5 мин в атмосфере аэоо та. Реакционную смесь охлаждают до
5 С, доводят до рН 6,4 уксусной кисо лотой и экстрагируют эфиром (4x50 мл) . 20
Объединенные эфирные экстракты промывают 57-ным водным бикарбонатом натрия и рассолом. Осушенный сульфатом магния растворлтель выпаривают и получают 1,4 r (выход 837) 3-метил-2- 25 меркаптометилпиридина в виде желтого масла, которое используют на ст едующей стадии без дальнейшей очистки.
В. Получение пара-нитробензил-3(3-метилпиридин-2-ил-метантио)-6*(1- 30 (R)-оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата °
К охлажденному (О С) раствору
1,74 г (5,0 ммоль) и -нитробенэил3 7-диоксо-(1-(R)-оксиэтил )-1-азаби1 35 цикло(3,2,0) гептан-2-карбоксилата в ,25 мл ацетонитрила прибавляют 960 мг (5,8 ммоль) диизопропилэтиламина в
2 мл ацетонитрила, и затем 1,4 r (5,8 ммоль) дифенилхлорфосфата в 2 мп 40 ацетонитрила в атмосфере азота. Результирующий раствор перемешивают в течение 20 мин при О С, прибавляют раствор 760 мг (5,8 ммоль) диизопропилэтиламина в 2 мл ацетонитрила, à 45 затем раствор 810 мг 3-метйл-2-меркаптометилпиридина в 3 мл ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение 2 ч. Осадок со-бирают фильтрованием, промывают ацетонитрилом и получают 1, 56 г (выход 66X)
50 указанного продукта в виде белого о твердого соединения, т.пл. 145 С.
Рассчитано: С 47,9 1; H 4,69;
N 6,98; S 10,66.
С„й,Р,О,S
Найдено: .С 47,72; Н 4,34; N 6,72;
S 11,22.
С. Получение 3 — (. 1-мети. I-Ç-мс тилпнридин-2-ил-метантпо)-ба(-Cl †(R)-îêñèэтил)-7-оксо-l-азабпцпктто(3,2,0)гепт—
2-ен-2-карбоксилата.
К раствору 680 мг (1,45 ммоль) соединения стадии В н 120 мл метпленхлорида прибавляют 270 мг (2,33мчоль) метилфторсульфоната. Реакционную смесь перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре, Осадок собирают фильтрованием, промывают метилсихлоридом (5 мл) и получают 840 мг (выход 997) кватернпзованного ппридп— на в виде белых кристаллов.
Рассчитано: Г 49,14; Н 4,47;
N 7,13; S 11,43.
С24Н2,2130952
Найдено: С 49,56; Н 4,16; N 7,26;
S 11,03.
К раствору 810 мг (1,39 ттмоль) полученного 3-(N-метил-3-метилпиридин2-ил-метантио)-6с -(1-(R)-оксиэтил)7-оксо-l-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен3-карбоксилат-фторсульфоната в 100 мл тетрагидрофурана и 100 лл эфира прибавляют раствор буфера рН 7,0 (100 мп), а затем 750 мг 107-ного палладия на угле. Смесь гидрируют при 3,15 атм в аппарате Парра в течение 60 мин в хоо лодной комнате (4-6 С). Смесь отфильтровывают на слое целита и катализатор ттромывают эфиром (2х10 мл). Объединенные фильтрат и промывочный растворитель экстрагируют эфиром (2х40мл), лиофилизуют и получают желтое твердое соединение, которое очищают на колонке с 20 r С р ВОИ?)АРАК (Waters
Associates) при 0,56 атм, элюируя
5Х-ным раствором ацетонитрила в воде.
Каждую фракцию по 15 мл анализируют жидкостной хроматографией высокого давления, фракции, имеющие УФ-поглощение приЛ,„ц„,= 400 нм, собирают, лиофилизуют и получают 141 мг (выход 307) укаэанного продукта в виде желтого твердого соединения.
Рассчитано: С 57,85; Н 5,85;
N7,,94 °
С ф 21 О+Б, 1/4 Н О
Найдено: С 58,60; Н 5,86; N 7,87.
Пример 8 ° Получение 3-(2метил-N-метилтиаэол-4-ил-метантио)6а(-(1-(R)-оксиэтил 2-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гептан-2-карбоксилата.
А. Получение пара-нитробензил-3(2-метилтиазол-4-ил-метантио)-ба(-(1(R)-оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло1 (3,2,0) гепт-2-ен-2-карбоксилата1493108
1б (2x10 мл) . Соединенные фильтрат и промывные воды экстрагируют эфиром (2x100 мл), лиофилизуют и получают желтый порошок, который очищают на обращенно-фазовой колонке с 8 г
С<„ BONDAPAK (Waters Associates),элюируя 57-ным раствором ацетонитрила в воде при давлении 0,56 атм. Каждую фракцию по 15 и анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, фракции, поглощающие
УФ при Д „,= 300 нм, собирают, лиоМа Кс филизуют и получают 145 мг (выход
487) указанного н заголовке стадии В соединения в виде бледн.i-желтого по-рошка.
Рассчитано: С 46, 5; Н 5,64:
N 7,17; S 16,41.
С Н И О, Ь < ?Н а
Найдено: С 46,50, Н 5,26; V 7,13;
S 16,20.
Пример 9. Получение 3-(N,N — диметилимидазол-2-ил-метантио)-бс (1 вЂ(R)-оксиэтил j — 7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2 — еп-2-карбоксилата.
А. Получение 2-меркаптометил-метилимидазола.
К раствору 10,4 r (58 ммоль) 2/ хлор-метил-N метилимидазола в 200 мл ацетонитри..» прибавляют 7,1 г (60 ммоль) N-ацетилиомочевины и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 90 мин. Осадок отфильтровывают, промывают ацетонитрилом (20 мл) и получают изотиурониевую соль, которую растворяют в
120 мл этанола и кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры,концентрируют под вакуумом до объема приблизительно 60 мл и осадок удаляют фильтрованием. Выпариванием фильтрата под вакуумом получают 2-меркаптометил-метилимидазола в виде желтого масла, которое используют на следующей стадии без дополнительной очистки, В. 11олучение пара-нитробенэил-3(N-метилимидазол-2-ил-метантио)-6с (1-(R)-оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
К охлажденному (ООC) раств 1ру
1,4 г (4,0 ммоль) промежуточногo и— нитробензил-3,7-диоксо-(1-(R)-оксиэтил j-1-азабицикло(3,2,0)гептан-2карбоксилата в 12 мл ацетонитрила прибавляют 0,83 мл (4,6 ммоль) дииэопропиламина, а затем 1,16 г (4,3 ммоль) дифенилхлорфосфата в 2 мл ацетонитрила в атмосфере азота. Результирую- 10 щий раст вор перемешивают при О С в течение 30 мин и получают пара-нитробензил-3-(дифенилфосфорилок.и)-6а -(1(R) -оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3, 2, 0) гепт-2-ен-2-карбоксилат. К это-15 му раствору прибавляют раствор 0,83 мл (4,6 ммоль) диизопропилэтиламина в
2 мл ацетонитрила, а затем раствор
0,62 г (4,2 ммоль) 2-метил-4-меркаптометилтиазола в 3 мл ацетонитрила, 20
Реакционный раствор перемешивают при
0 С в течение 40 мин. Осадок собирают, промывают эфиром 30 мл и получают
943 мг указанного в заголовке стадии
А соединения в виде белого твердого продукта.
В. Получение 3-(2-метил-N-метил тиазол-4-ил-метантио)-64-(1-(Р)-оксиэтил)-7-оксо-1 — азабицикло(3,2,0)гепт2-ен-2-карбоксилата. 30
К раствору 525 мг (1,1 ммоль) соединения стадии А в 20 мл метиленхлорида прибавляют 0,27 мл (3,3 ммоль) метилфторсульфоната. Реакционную смесь перемешивают в течение 90 мин при комнатной температуре. Осадок собирают фильтрованием, промывают метиленхлоридом (50 мл) и получают
650 мг (выход 1007) кватернизованного тиаэола, который используют в следую- щ щей стадии без дальнейшей очистки.
К раствору фторсульфоната 3-(2метил-Н-метил-тиазол-4-ил-метантио)6А-(1-(R)-оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гептан-2-карбоксилата в
100 мп тетрагидрофурана и 100 мл эфира прибавляют 100 мл буферного раствора рН 7,0, а затем 500 мг 107.-ного палладия на угле. Смесь гидрируют при
2,45 атм в аппарате Парра в течение
45 мин. Смесь фильтруют через слой
50 целита и катализатор промывают водой
Ь
Я > — — М С
1493108
l7
К охлажденному (О С) раствору
7,24 г (20,3 ммоль) промежуточного
1t--нитробензил-3,7-диоксо-f 1-(R)-оксиэтилj-.!-азабицикло(3,2,0)гептан-2карбоксилата в 35 мл ацетонитрила прибавляют раствор 2,8 г (21,3 ммоль) диизопропилэтиламина в 2 мл ацетонитрила, а затем 5,5 г (20,4 ммоль) дифенилхлорфосфата в 2 мл ацетонитрила 10 в атмосфере азота. Полученный раствор перемешивают при О С в течение
15 мин и затем прибавляют раствор
4,1 r (3,0 ммоль) диизопропилэтиламина в 2 мл ацетонитрила, после чего 15 прибавляют 4,6 г (31,0 ммоль) тиола
32. Реакционную смесь оставляют перемешиваться в течение 60 мин при 0 С, Белый осадок собирают фильтрованием, промывают метиленхлоридом (20 мл) и 20 получают 6,6 г (выход 717) укаэанного в заголовке продукта в виде белого твердого соединения, т.пл. 142 С. о
Рассчитано: С 52,18; Н 4,79;
N 11,59. 25
С,Н tîN906S 5Н20
Найдено: С 52,22; Н 4,91; N 12,16.
С. Получение 3-(N,N --диметилимидазол-2-ил-метантио)-бс(-(1-(R) îêñèэтил J-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт- 30
2-ен-2-карбоксилата.
К суспендированному раствору 1,34 г (3,0 ммоль) соединения, полученного на стадии В, в 210 мл ацетона прибавляют 20 мл метилиодида. Реакционную смесь перемешивают в течение 4 дней при комнатной температуре.
Осадок собирают фильтрованием,промывают ацетоном (20 мл) и получают
1,70 r (выход 967.) кватернизованного щ имидазола — натрий 3-(N,N -диметилимидазол-2-ил-метантио)-6d-(1 †(R)— оксиэтил3-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0) гепт-2-ен-карбоксилата — в виде желтых кристаллов, т.пл. 175-177 С. 45
Рассчитано: С 43,08; Н 9,60;
N 5,48.
C«H«N,О,S, Найдено: С 43,02; Н 9,02; N 5,44.
К раствору 1,30 r (1,86 ммоль) полученного соединения в 120 мл тетрагидрофурана и 120 мл эфира прибавляют
120 мл буфера рН 7,0, а затем 900 мг
307.-ного палладия на целите. Смесь гидрируют при 2,8 атм в аппарате Парра в течение 40 мин. Смесь фильтруют на слое целита и катализатор промывают водой (2x15 мл). Соединенные фильтрат и промывные воды экстрагируют эфиром (Зх100 мл), лиофилизуют и получают желтий аморфный порошок, который очищают на колонке с 30 г С 1Я
B0NDAPAK (Waters Аяsvciates) при
0,56 атм с использованием 10Е-ного раствора ацетонитрила в ваде в качестве элюента. Каждую фракцию по 20 мл анализируют с помощью жидкостной хроматографии высокого давления, фракции, имеющие поглощение УФ при Л мa ic
300 нм, собирают, лиофилизуют и получают 220 мг (выход 357) указанного в заголовке стадии С продукта в виде желтого порошка.
Рассчитано: С 51,68; Н 5,67;
N 12,06; S 9,50.
Ю 1 119 4 2
Найдено: С 49,93; Н 5,94; N 11,46;
S 9,03.
Пример 10. Получение 3-(2,3, 4-триметилти зол-5-ил-метантио)-6с (1- (R) -оксиэтил J-7 — оксо-1-а за бицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
А. Получение 2,4-диметил-5-меркаптометилтиазола.
К раствору 4,8 г (26,0 ммоль) 5хлорметил-2-метилтиазола в 50 мл абсолютированного зтанола прибавляют
2,4 .г (30 ммоль) тиомочевины. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 18 ч. Осадок собирают фильтрованием, промывают эфиром (20 мл) и получают изотиурониевую соль, которую растворяют в 22 мл 1н.
Na0H и нагревают при 100 С в течение
/ мин в атмосфере азота. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, доводят до рН 7,0 1н.
НС1 и экстрагируют эфиром (3x50 мл).
Соединенные эфирные фазы промывают водой, раствором соли и сушат над сульфатом магния.
Выпариванием сухого растворителя получают 780 мг (выход 49X) тиола в виде бесцветного масла, которое используют на следующей стадии без дальнейшей очистки.
В. Получение пара-нитробензил-3(2,4-диметилтиазол-5-ил-метантио),-6d(1-(R)-оксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
К охлажденному (О С) раствору
1,4 г (4,0 ммоль) промежуточного кетосоединения (пример 9, стадия В); в
25 мл ацетонитрила прибавляют 610 мг (4,7 ммоль) диизопропилэтиламина в
1 мл ацетонитрила, а затем 1, 15 r (4,3 ммоль) дифенилхлорфосфата в 1 мл
1493108 ацетонитрила в атмосфере азота, Результирующий раствор перемешивают в течение 20 мин при 0 С и прибавляют раствор 610 мг (4,7 ммолЬ) диизопро пилзтиламина н 1 мл ацетонитрила, 5 после чего прибавляют 750 мг (4,7 ммоль) полученного тиола в 2 мл ацетонитрила. Реакционную смесь переме шивают н течение 3 ч при 0 С. Осадок собирают фильтрованием, промывают
20 мп метиленхлорида и получают 1,14 г (выход 6!%) указанного соединения в виде белого твердого продук а.
Рассчитано: С 53,73; Н 4,71;
N 8,57; S 13,44.
С 7 >. Н 7 3 !! Д О Ь 8 2
Найдено: С 53,97; Н 4,74; N 8,58;
S 13,10.
С. Получение 3-(2,3,4-триметилтиаэол-5-ил-метантио)-61-!! †(R)-оксиэтил 7-7-оксо-1-аэабицикло (2, 2, 0) гепт2-ен-2-карбоксилата.
К раствору 1,97 г (4,0 ммоль) соединения стадии В в 180 мл метиленхло- 25 рида прибавляют раствор 0,98 мл (13 ммоль) метилфторсульфоната в 2 мл метиленхлорида. Реакционную cMecb перемешивают в течение 70 мин при комнатной температуре. Реакционную смесь выливают в раствор эфира (400 мл) и II-пентана (100 мл). Осадок собирают фильтрованием, промывают 20 мл эфира и получают 1,6 г (выход 65,5 ) фторсульфонат 3-(2,3,4)-триметил-тиазол5-ил-метантио)-6o(- (1-(R)-оксиэтил -7- 35 оксо-1-аэабицикло(3,2,0)гепт-2-енкарбоксилата (кватернизованного тиазола) в виде белого аморфного порошка.
Рассчитано: С 45,09; Н 4,44;
N 6,86.
С Н N OsS . 1/2 Н О
Найдено: С 44,50; Н 4,38; N 6,58.
К раствору 1,0 г (1,72 ммоль) полученного соединения в 100 мл тетра45 ! идрофурана и 100 мл эфира прибавляют 100 мл буферного раствора рН 7,0, а затем 1,О r 10 -ного палладия на угле. Смесь гидрируют в аппарате Парра при давлении 2,8 атм в течение 5Ц
40 мин. Смесь, фильтруют на слое целита и катализатЬр промывают водой (2х х!О мл). Соединенные фильтрат и промывные воды экс"рагируют эфиром (Зх х100 мл), лио .лизуют и получают жел- Ы тый порошок,,оторый очищают на колонке с 40 r С, BONDAPAK (Haters Associates) при давлении 0,56 атм, используя в качестве элюента 1О -ный раствор ацетопигрила н воде.
Каждую фракцию по 15 мл анализируют с помощью жицкостной хроматографии высокого давления и фракции, имеющие поглощение УФ приЛ „„ = 300 нм, собирают, лиофилизуют и получают 315 мг (выход 50 ) укаэанного н заглавии соединения в виде желтого твердого продукта.
Рассчитано: С 48,25; Н 6,09;
N 7,79.
С „.Н „ИЭО,. 2Н,О
Найдено: С 47,96; Н 5,83; N 7,89.
Пример 11. Получение 3-!2(N-метилтиазолийзметилтио)J-6J-(1(R)-гидрокспэтил )-7-оксо-!-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
А. Получение 2-меркаптометилтиазола.
К раствору -хлористого тионнла
3,81 мл (0,052 ммоль) н хлороформе (30 мл) добавляют при комнатной температуре 3,60 г (0,026 ммоль) гидроксиметилтиазола, после чего нагревают реакционную смесь в течение 2 ч при
50 С. Хлорофо»м отгоплнт s вакууме, получая в результате коричн«ное твердое нещество, которое растворяют в
30 мл абсолютированного этилового спирта. Затем к полученному раствору добавляют 2,04 r тиомочевины. Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником н течение
18 ч. Осадок собирают фпяьтронанием промывают э YGHo;IQM и эфиром и получают н реэульта ге 3,4 г (выход 55 ) соли изотиоурония. Соль изотиоурония гастворяют н 30 мл воды и продувают азотом полученный раствор в течение 20 мин. Затем к нему добанляют 1,10 r (0,027 ммоль) гидрата окиси натрия и нагревают полученную смесь при 100 С и течение 2 мин. рН о охлажденного до 0 С раствора доводят до 6,0 посредством уксусной кислоты, после чего осуществляют экстракцию двумя порциями по 35 мп этилацетата.
Органический слой сушат над сульфатом агния и разгоняют в вакууме, получая 0,75 г (выход 42 ) 2-меркаптометилтиазола в виде желтого масла, которое используют без специальной очистки, В. Получение и-нптробензил-3-(2тиаэолметилтио)-6> !1-(R)-гидроксиэтил)-7-оксо-1-аэабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карб>оксилата.
1493108
К охлажденному до 0 С раствору
1,4 r (4,0 ммоль) кетопроизводного
),пример 9, стадия А) в 8 мл ацетонитрила добавляют сначала 0,79 мл (4,4 ммо.)ь) диизопропилэтиламина, а затем 1,17 г (4,4 ммоль) дифенилхлорфосфата в атмосфере азота, Полуо ченньп) раствор перемешивают при 0 С в течение 30 мин, получая в результа- 10 те fl-нитробензил-3 †(дифенилфосфорил— окси)-6а(-11-(К)-гидрооксиэтил )-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2карбоксилат. К этому раствору добавляют раствор 0,79 мл (4,4 ммоль) диизопропилэтиламина в 2 мл ацетонитрила, после чего добавляют раствор
0,72 r тиола (полученного по стадии
А) в 2 мл ацетонитрила. Реакционную смесь перемешивают в течение 6 мин о при 0 С, после чего разбавляют ее
50 мл этилацетата и промывают 30 мл воды, 20 мл 10 -ного водного раствора фосфорной кислоты и 30 мл рассола.
После отгонки раствора, высушенного )5 над сульфатом магния, получают кристаллизующуся твердую фракцию, которую растирают с эфиром, получая 782 мг (выход 427) указанного в заголовке продукта в виде белого кристалличес- 0 кого продукта, т.пл. 158-160 С.
Рассчитано: С 52,05; Н 4,15;
N 9,10; S 13,89 °
С 2оН 1з И О Я
Найдено: С 52,35; Н 4,40; N 8,72;
S 13,90 ° 35
С. Получение 3-(2-(N-метилтиазолий)метилтио )-61-(1 †(R)-гидро),сиэтил)7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен2-карбоксилата.
К раствору 782 мл (1,36 ммоль) соединения 6 (стадия В) в 55 мл хлористого метилена добавляют 0,5 ил метилфторсульфоната и перемешивают полученную реакционную смесь в течение
90 мин при комнатной температуре.Осадок собирают фильтрованием и промывают хлористым метиленом (30 мл) и эфиром (20 мл), получая в результате
630 мг 3-(2-(N-метилтиаэолий)-метилтио|-6а1 -(1-(R)-оксиэтил7-7-оксо-1азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилат фторсульфоната (неочищенного кватернизованного тиазола), который используют на следующей стадии без дальнейшей очистки. 55
К раствору этого соединения в 140 ил тетрагидрофурана и 120 мп эфира добавляют 140 мп буферного раствора рН
7,0, а затем 650 )г 1!i"- ). г) .);I.;I"„ дия па активированн и угле. Полу )el»ную смесь гидрогенпз))руют и; и давлении водорода 30 фунт h;)3.;)h1!Ih) (2,11 кг/см ) н» аппарате Парра в течение 35 мин. Затем смесь фильтруют и промывают катализатор двумя порциями по 10 мл воды. Объединенны)1 фильтрат и промывные воды экстрагируют двумя порциями эфира по 150 мл и лиофилизируют с получением желтого порошка. Неочищеннь)й желтый порошок очищают на колонке, з))пол))сивой 7 г
C() B0NDAPAK (обратная фаза, ф))рма
"Уотерс Ассошиэйтс"), используя для элюирования 57--ный раствор апетонитрила в воле при дав låíèè
8 фунт/кв . дюйм (0,56 кг/см2 ) .
Каждую из фракций по 15 мл исследуют методом жидкостной хроматографии под высоким давлением. Фракции, обладающ))е поглощением в ультрафиолетовой области при
Я „ = 300 нм, собирают и лиофилизируют, получая 23 мг (выход 5К) ука-, занного в заголовке соединения в виде аморфного. твердого вещества желтого цвета.
Пример 12. Получение 3-(1— (RS)-метил-Иметилпиридин-3-ил-метантио1-6,1 -) 1 †(R)-гидроксиэтил 1-7оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен2-карбоксилата.
А. Получение и-нитробензил-3-(1— (RS)-метилпиридин-3-ил-метантио)-6d11-(R)-гидроксиэтил 1-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата. о
К охлажденному до 0 С раствору
1,85 г (5,3 ммоль) кетопроизводного (пример 9, стадия А) в 20 мл ацетонитрила добавляют 754 мг (5,8 ммоль) диизопропилэтиламина в 1 мл ацетонитрила, после чего вводят раствор 1,57 г (5,84 ммоль) дифенилхлорфосфата в
2 мл ацетонитрила в атмосфере азота.
Полученный раствор перемешивают при
0 С в течение 15 мин, после чего добавляют раствор 754 мг (5,8 ммоль) дииэопропилэтиламина в 1 мл ацетонитрила, а затем 814 мг (5,8 ммоль) 4(1 -меркаптоэтил)-пиридина в 2 мл ацетонитрила. Полученную реакционную смесь перемешивают при 0 С в течение
3 ч, после чего разбавляют реакционную смесь 200 )ц) этилацетата и гро)я.lвают последовательно 200 мл охлажденного льдом рассола, 200 мл водь), 100 мл водного раствора бикарбопата.
1493108
2/ и 100 мл рассола. После сушки над сульфатом магния и отгонки растворителя получают желтое масло, которое подвергают хроматографической очистке методом хроматографирования на колонке, заполненной силикагелем, используя для элюиронания смесь 507. ацетона и 507 хлористого метилена, получая н результате 1,65 r указан- 10 ного в заголовке продукта в виде твердого вещества желтого цвета.
Рассчитано: С 58,83; Н 4,94;
N 8,95; S 6,83.
С зН зИ ОзБ, 15
Найдено: С 57,15; N 5,04; N 8,26;
S 6,78.
В. Получение 4-(1 -меркаптоэтил)пиридина.
К раствору 25 г 1-(4-пиридил) — 2p этанола в 100 мл хлороформа добанляют 50 г хлористого тионила. Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 2 ч. После отгопки растворителей н вакууме по- 25 лучают 1 †(4-пиридил)-хлорэтан B виде полужидкой массы, которую используют на следующей стадии без дополнительной очистки. Затем к раствору этого соединения в 160 мл этанола цобавляют горячий раствор 14,4 r тиомоченины в 75 мл этанола. Реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 18 ч.
Этанол затем отгоняют и растворяют полученный остаток в 100 мл воды, до—
35 водя рН полученного раствора до значения, равного 10, посредством 2 и. гидрата окиси натрия. Полученную смесь перЕмешивают при комнатной тем40 пературе в течение 90 мин, доводят рН до 6,0 посредством введения 6 н. НС1 и экстрагируют эфиром (две порции по
200 мл). После сушки над сульфатом магния и отгонки растворителя получают желтое масло, которое разгоняют при давлении 5 мм рт.ст., и собирао ют фракцию, имеющую т.кип. 60-65 С, получая н результате 11,0 r (выход
387) чистого тиола — 4-(1 -меркаптоэтил)-пиридина в виде бесцветного масла.
С. Получение 3-(1-(RS)-метил-Nметилпиридин-3-ил — метантио 3-6Ы-(1-(R)— гидроксиэтил 1-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
К раствору 1,1 r (2,34 ммоль) соединения стадии А в 100 мл ацетона добавляют 10 мл иодистого метила. Реакцнонную смесь;IptiQIII IIIIIBBIoT н течение 18 ч при комнатной температуре °
Осадок собирают фильтрованием и промывают 10 мл хлористого метилена, получая 1,4 r (выход 1007) и -нитробензил-3-(1-(HS)-л|етил-N-метилпиридин3-ил-метантио)-нодид-бН-(1 †(R)-оксиэтил3-7-оксо-1-а абицнкло(3,2,0) гепт2-ен-2-карбоксилата (кнатсрнизированное производное «прилива) н ниде желтого порошка.
Рассчитано: С 47,14; П 4„?9;
N 6,87; S 5,24.
С Н И О Б,?, Найдено: С 47,19; Н 4,78; N 6,11;
S 5,41.
К раствору 1,45 г (2,37 л моль) полученного соединения « 120 мл тетрагидрофурана II 120 мл эфира добавляют
120 ил буферного раствора рН 7,0, после чего вводят 1,5 г 107.-«ого палладия на актиниронаннол угле. 11олученнуи смесь гидрогенизируют при давлении 45 фунт/кн.дюйм (3,17 кг/см ) в устройстве Парра и течение 60 мин.
Затем смесь фильтруют через слой делита и промывают ката. шзатор водой (дне порции по 15 мл). Объединенные фильтрат и промынные «оды экстрагируют двумя порциями по 200 мл эфира и лиофилизируют, получая желтое твердое вещество, которое по„нергают очистке на колонке с обратной фазой (С
ВОЯ)АРАК, фирм» "Уотерс Ассошиэй.гс", .
50 г), используя для злюиронания
57,-ный раствор ацетонитрила н нодс при давлении 8 фунт/кн.дюйм (0,56 кг/см ).
Каждую фракцию объемом 20 мл исследуют методом жидкостной хроматографии при высоком давлении, фракции, имеющие поглощение н области ультрафиолета с Л, „,= 300 нм, собирают и лиофилизируют, получая 200 мг (ныход
247.) указанного н заголовке продукта в виде аморфного твердого вещества желтого цвета.
Рассчитано: С 54,38; Н 5,77;
N 7,46.
С„Н„И,О S,1,5 Н О
Найдено. С 54,39; Н 5,98; N 7,68.
Пример 13. Получение 3-(Nметил-N -бен зил илиада з ол-2-ил-метан" тио)-бо/-(1-(R)-гидроксиэтил Я-7-оксо1-азабицикло(3,2,0)гент-2-ен-2-карбоксилата.
А. Получение N-бензил-2-меркаптометилимидазола.
1493!08
Найдено: С 49,39; Н 3,97; N 7,20;
S 10,98.
К раствору 1,10 1 (1,88 ммоль) получе»ного сс единения в 80 мл тетрагидрофурана и 80 мл эфира добавляют
80 мл буферного раствора рН 7,0, после чего вводят 800 мг 107-ного паллад»я на активированном угле. Реакционную смесь гидрогенизируют при давле- !О нии 30 фунт/кв.дюйм (2,11 кг/см ) в аппарате Парра в течение 40 мин.Смес1. фильтруют через слой целита и промывают катализатор водой (две порции по
10 мл). Объединенные фильтрат и про- 15 мывные воды экстрагируют эфиром (две порции по 100 м:1) и лиофилизируют, получая желтый порошок, который очищан>т методом хроматографии на колонке (НР-20), используя для элюирования 20 в»ачале воду, а затем 5Г. -ный раствор ацетонитрила в воде. Каждую из фракций по 15 мл исследуют методом жидкостной хроматографии пол высоким дав— пением, фракции, имеющие поглощение 25 в ультрафио>1ете с смаке 300 нм, собирают и лиофилизируют, получая 614 мг (выход 427) указанного в заголовке
»родукта в виде слабо-желтого порошка.
Рассчитано: С 55,73; Н 5,46;
N 7,65; S 8,74.
С1> И 3> ОУ Б Н20
Иайдено: С 55,50; И 6,05; N 7,74;
S 8,68.
Пример 15. Получение 3 t 4(N,Г1-димет»л-1,2,3-триазолил)метил35 тио J-6 & (! — (R) -гидроксиэтил )-7-оксо-! -аза бицикло (3, 2,0) гепт-2-ен-2-карбэксилата.
А. Получение изомера А.
0,58 мл (5, 16 ммоль) метилфторметансульфоната добавляют по каплям к охлажденному льдом раствору 590 мг (3,52 ммоль) 4-метантиолацетат-1-метил-1 2 3-триазола в 2 мл сухого хлоУ У
45 ристого метилена при перемешивании в атмосфере азота. После проведения реакции в течение 0,5 ч баню убирают и по истечении 1 ч растворитель убирают посредством вытяжного вентилятора.
Остающееся при этом масло растворяют в нескольких миллилитрах воды и охлаждают полученный раствор на бане со льдом. Затем к нему добавляют охлажденный раствор гидрата окиси натрия (305 мг, 7, 59 1ыоль) в нескольких 55 миллилитрах воды и оставляют реакцион-ную смесь на 0,75 ч при перемешивании. Раствор разбавляют 25 мл воды и доводят его РИ il(3 7,5 3 1 - у11т! T добан:1е11»я Ti« р:1 "о 1ч . ", I» .p,t i;1 и;:11— замещенного фосф;1та»атр11:1. 3;31 ем
14 мл этого рас. 1 1«>3>;1 (3т; с t 1« гствует пример»о 1,9 ммо" ь тр»:. 3, .1т»о>»1) вводят при первые;.11113,.»пи в t)>cllаждаемый льдом раствор Ilнс.t ;. c<, :, та (1,0 г, 1,72 ммоль) в 10 lt i тетрагидрофурана (ТГФ) . Реакцио»ную смесь оставляют при перемешивали» на О, 75 ч, »Пичем часть криста «111чеcfilt::. Itро tóttòt>13 (очевидно 11а НРО,,) випа:;ает в ходе реакции. Суспензию перев,.,131т в реактор
ДЛЯ IIOI>i lilieIIIIO» Ñ> i,;III:te!IIIЯ 13 РЕ 3У lb t ilте добавления к»е>tv II»бо:1ьших количеств тетрагидрофуp»»,1 (20 tt. I) и I:o ды (20 мл) . В т1 т ж» рсактор 13вс дя.
30 мл эфира и 1,0 I 107-»с го»а»лад ия на ак т»1311ро 13.3 31)1ом г. Iе l . T>c I tc ствлнют ги>1рогено>111.3 реак»11с»1»ой смеси при давлении 40 фунт/кв.дю»м (2,8 кг/см ) н течение 1 ;. Орга11»ческую фазу от;1спяют и»р1 пп1вают дву-мя порциям>1 воды»о 5 мл. Обью;:»пенные водные фази ф»:II тру>>т, а ф11>1ьT рат конце нтр11р уют IT 1311луум1 (»римерно при 0,5 мм рт.ст. н т<1че1»1е 1,5 ч).
Полученнь1й же>1ть331 раст»ор затсм хроматографируют (ксло»ка сре:I» го д вления с обрат»ой фазой, 35х90 .1м, злюент — вода), пслучая »ос Tc :øt>ôèлизации 395 мг карбас1енс>1а, tteltttni.c загрязненного»ебол1. tilt>1» коли 1ест>3ами неоргаш1ческ11х пр11месой. ПродуКт ПОдВЕр Гашт О;;11 тЛЕ МетС дОМ ж;1дкостной хроматог!>аф»11 псд высоким давлением, колонка запол»синая С
Г
Микробондапак, ф»рма "Уотерс", 10х х300 мм, многократное введе, элюент — вода), получая в результате 310 мг (57Г.) изомера Л в виде рыжевато-коричневого порошка.
В. Получение изо 1ера В и изомера С.
1,60 мл (14,0 ммоль) метилтрифторметансульфоната добавляют по каплям к охлажденному льдом раствору 1,20 г (7,02 ммоль) 4-метантиолацетат-2метил-1,2,3-триазола в 6 мл сухого хлористого метилена в атмосфере азота. Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры и оставляют при перемешивании на 16 ч. К ней добавляют дополнительное количество метилтрифторметансульфоната (0,40 мп, 3,56 ммоль) и после выдерживания ре- акционной смеси в течение 3 ч при комнатной температуре растворитель уда14 33108 ляют en< pef»c.f»I«1» вьггяжного вентилятора. Остающеес»1»»ри это.» Г»асло раст»»р;1»вт с эф»»ро» 1» получаемую цри этом см< лообразную I»:Iñ<:ó растворяют r3 5 мл
5 водьI, Эту смесь охл »ждают в бане со льдом и доба»»ляют раствор 844 мг (21, 1 мм ли) 13 5 мл воды. После переI eIIII»f»fI»»»»I те Ie»I»< О, 75 ч раствор разба »яют 60 мл воды и доводят p}1 до значеш»я, равного 8, IIQcp<. äñòâîì введения твердого монозамещенного фосфата калия. Затем 40 мл .того раствора (»то соответствует :ример»о
4 7 ммоль смеси изомеров триазолтиоЭ 15 лов) добавляют в охлаждаемый льдом раствор е»»олфосфа та (2,00 г, 3,45 »Г»с<<»ь) в 6О мл тет?агидрофурана при перс "I< !III»1<;«II»II. По<»ученную смесь перемешив;»ют »р!1 ьл<1ждении B бане л»цом в тече»»»е 0,5 ч, после чего переводят в p<.;I»i fnp для повышенного давления, coä<."pæïö»»é суспензию
107-ного палладия на активирова»ном
° угле (2,00 г) II:. ÔI»på (60 мл) . еакц»» О1»1» ч<» с Г»ос ь подпер г ают гидр о Гc IIÎëèзу l»p»»,I;III. I<.I»I»I» 40 фунт/кв.дюйм (2,8 к» /см ) в течение 1 ч. Органическую ф;»зу отделяют и промывают двумя пор»иями по 10 мп воды. Объединенные во;пп»е фазы фильтруют и фильfðàò кс нце»»трируют при высоком вакууме (примерно 0,5 мм рт.ст.) в течение
1,5 ч. Остающийся раствор хроматографируют (коли»»ка среднего давления с обратной фазой, 45х130 мм, вода в ка- 35 честве элюента), получая после лиофилизац»»и 595 »l смеси изомерных карбапенемов, которая загрязнена небольшими кол»»чества»»1» неорганических про40 дуктов. Продукт реакции отделяют и очищают методом жидкостной хроматографии по;» II:1<»оким давлением (колонка, наполненная С» И»»кробондапа»с, фирма "Уотерс", 10х300 мм, многократное »ведение, вода в качестве элюен45 та), получая в 1» рядке элюирования изомер В, 153 мг (137) .
Пример 16. (5R,6S)-6-(1Rгидроксиэт»»л) — 3-(2-метил-1,2,3 †тиадиазолий-ч-ил-1»e TI»JITI»o) 7-оксо-1-аза/ ) 50 бицикло (3, 2, О) гепт-2-ен-2-карбоксилат.
А, Этил- 1,2,3-тиадиазол-4-ил-карбОксилат.
Раствор зтил- r(-N-карбэтоксигидразонпропионата (31,2 r, 0,154 моль) в 55
80 мл хлористого тионила перемешивао ют в -å""÷å»»èå 3 ч при 23 С и нагревают пр»» 70 С « течение 20 мин. Хлористый тионил отгоняют 11 остаток растирают с гексаном (<е гире порции по 30 мл) .
Красное тверг»ое 1»e»II< са во растворяют в 150 мл дихлормета»»а и промывают раствор насыщен»н»м раствором бикарбоната натрия и водой. После сушки над сульфатом магния раствор концентрирук»т до кристаллизации соединения.
После выдерживания при 23"С в течение некоторого промежутка време»»и образующиеся кристаллы отфильтровывают, получая 16,8 r продукта (выход 697), о имеющего т.пл. 86 С. Ф»»льтрат концс»I.трируют и очишс»»от методом хроматографии на колонке, запо:1»о»ной силикагелем, используя в качестве растворителя-элюента дихпс рметан, получая
3,17 г (13i) продукта, имеющего т.цл.
86 С.
В. 1,2,3-Тиациаз<з.<1-4-<»л-метанол.
К суспензии !8,35 г (0,116 ммо.»ь) этил-1,2,3-тиадиа. ол-4-ил †карбоксилата в 400 мл эфира добавляют по частям
2,47 r (0,065 моль) IIII Tïéàëê минийгидрида (в течение 1 ч) . Реакцио»»ную о . смес». переме II»I«11 >т <»р»1 ? 3 С в тече»»ие
7 ч, после чего обраб;»тывают 2,47 г (0,065 моль): »; гийa Iv»II»I.»йгидрида.
Перемешивание »родс<лжают 24 ч, после чего вводя пос.п<д<1вс»тел».1»о воду (7 м<»), 15Z-ный вод»ый раствор г»»драта окиси натрия (7 и I) I» снова воду (21 мп). После персмешивания в течение 15 мин эфирный раствор декантируют и смолообразный остаток экстрагируют эфиром (5 раз по 100 мл). Эфирные экстракты о»>ъединяют, с.ушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 5,4 r продукта. Пеочищенный продукт подвергают очистке на колонке, заполненной силикагс.лем (120 г, 4х16 см), используя для элюирования эфир, получая 1,3 г (7Z) этил-1,2,3тиадиазол-4-ил-карбоксилата и 2,45 г (187) 1,2,3-т»»а»»иазо.»-4-1»з»-метанола.
С. 1,2,3-Т»ад,»II:Iñ»»-4-ил-мет.»но;;— метансульфонат.
Раствор 1,2,3-тиадиазол-4-ил-метанола (0,75 г, 6,5 ммоль) в дихлорметане (20 мл) охлаждают до 5 С в атмосфере азота и обрабатывают триэтиламином (1,018 мл, 7,3 ммоль) и метансульфонилхлоридом (0,565 мл, 7, 3 ммоль) . Спус гя 15 мин баню со льдом удаляют и перемешивают реакционную смесь в течение 2 ч. Раствор промы-! вают 1 н. раствором соляной кислоты (2 раза по 2 мл) и водой, сушат над
1493108
К раствору 3,? 3 г (13,0 »моль) хлоргидрата И-бензил-2-хлорметилимидазопа в 80 ил ацетонитрила добавляют
1,72 r (14,5 и»опь) N-ацетиптиомочевины. Реакционную смесь нагревают в течение 3 ч при кипении с обратным холодильником. Осадок собирают фильтрованием и промывают ацетонитрилом (10 мл), получая соль изотиоурония, которую затем растворяют в 80 мл абсолютированного этилового спирта и нагревают в течение 18 ч при кипении с обратным холодильником в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, упаривают в вакууме до объема, равного примерно 30 ип, и удаляют фильтрованием образующийся осадок. После разгонки фильтрата и вакууме получают 3,5 г (выход 97;7) тиопа, указанного в заголовке, в виде густого сиропа желтого цвета.
В. 11олучение й-нитробензнп-3-(Nбензипииидаэоп-2-ип-метантио)-6с/-(1 в 15 (R)-гидроксиэтип 1-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксипата. о
К охлажденно»у до О С раствору
3,03 г (8,5 ииопь) кетопроизводного (при»ер 9, стадия А) в 70 мл ацетонитрипа добавляют 1,17 г (9,0 ммоль) диизопропип этипамина в 2 мл ацетонитрипа, а затем вводят 2,4 г (9,0 ммопь) дифеничхлорфосфата в 2 мп ацетонитрипа в атмосфере азота. Полученный раствор перемешивают в течение -0, 35 мин прп 0 С, после чего к нему добавляют раствор 1,17 г (9,0 »моль) диизопропилэтиламина в 2 мл ацетонитрила и 4,8 r (15 ммоль) тиола (продукт стадии А). К реакционной смеси добавляют еще 1,93 г (15 лгиоль) диизопропипэтиламина и оставляют перемешивать ее в течение еще 2 ч при
0 С. Осадок собирают фильтрованием и промывают 20 мл охлажденного хлористого иетилена, получая 2,5 г (выход 557) указанного в заголовке проI дукта в виде белого твердого вещества.
С. Получение 3-(N-метил-Й -бензил- 50 имидазол-2-ил-метантио)-6 -(1-(R)гидроксиэтил j-7-оксо-1-азабицикло (3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
К раствору 1,76 г (3,3 ммоль) соединения, полученного на стадии В в
1,1 л хлористого метилена добавляют
1,15 мп (13,4 ммоль) метилфторсульфоната. Реакционную смесь перемешивают в те ение 2 ч при комнатной температуре, после чего концентрируют и вакууме до объема, равного примерно
15 мп. Осадок собирают фипьтроваипеи и промывают хлористы» иетипенои (10 мп), получая в результате 1,58 г (выход 747) и -нитробензил-3-(N-меI тил-N --f>eve>ssinrariiasoa-2-ил-метантио)фторсульфонат-64-Г1 †(R)-оксиэти.г1-7оксо-1-азабицикпо(3,2,0)гент-2-ен-2карбоксилата (кватернизованного цмидазола) в виде белого твердого вещества.
Рассчитано: С 51,48; H 4,47;
N 8,67; S 10,20.
С„Н„О,1,8,Г
Найдено: С 51,84; H 4,52; lJ 8,65;
S 9,87.
К раствору 1,11 г (1 71 »моль) полученного соединения в 100 мл тетрагидрофурана и 100 мп эфира добавляют 120 мл буферного раствора рН 7,0 после чего вводят 1,0 г 1ОТ-ного палладия на активированнои угле. Полученную смесь гидрогенизируют при давлении 45 фунт/кв.дюйм (3,17 кг/c» ) в аппарате Парра в течение 45 мин.
Реакционную си cb фильтруют через слой целита и промывают катализатор водой (2 порции по 10 мл). Объединенные фильтрат и проиывные воды экстрагируют 2 порциями эфира по 70 ил и лиофилизируют, получая желтый порошоК, который подвергают очистке на колонке (С ВОМЭАРАК, фирма "Уотерс
Ассошиэйтс", 40 г), используя дпя элюирования 107-ный раствор ацетонитрила в воде при давлении Я фунт/кв.дюйм (0,56 кг/см ).
Каждую нэ фракций объеиом по 15 ил подвергают исследованию методом жидкостной хроматографии под высоким давлением, фракции, имеющие поглощение в ультрафиолете с Я „ = 300 HM собирают и лиофилизируют, получая
305 мг (437) указанного в заголовке продукта в виде слабо-желтого аморфного твердого вещества.
Рассчитано: С 57,25; H 5,94;
N 9,54; S 7,28.
1 О 8,-1,5
Найдено: С 56,66; Н 5,70; N 9,49;
S 8,30.
Пример 14. Получение 3-(2метил-N-метилпиридин-3-ил-метантио)6о(- (1-(R)-гидроксиэтил)-7-оксо-1азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
1493108
А. Получение 2-метил-3-меркаптометилпиридина. о
К охлажденной до О С суспензии
2,86 r литййалюминий гидрида в 50 мл сухого тетрагидрофурана добавляют по каплям 6,23 г (0,038 моль) сложного эфира 2-метил-3-этилпиридинкарбоксилата в 15 мл тетрагидрофурана в течение 15 мин. Полученную смесь перео мешивают в течение 60 мин при 0 С, после чего добавляют к ней 50 мп этилацетата. Осадок отфильтровывают и промывают насыщенным водным раствором хлористого аммония. Органический слой сушат над сульфатом магния, фильтруют и отгоняют растворитель в вакуле, получая в результате 3,2 г (выход 70Z) 2-метил-3-гидроксиметилпиридина в виде желтого масла. о
К охлажденному до О С раствору
4 мл хлористого тионила в 10 мл хлористого метилена добавляют по каплям раствор 3,2 г (0,026 моль) полученного спирта в 1О мл хлористого метилена за 15 мин в атмосфере азота. Охлажденную баню убирают и перемешивают реакционную смесь в течение 3 ч при комнатной температуре. Все растворители отгоняют в вакууме, получая в остатке 2-метил-3-хлорметилпиридин в виде коричневого твердого вещества, которое используют на следующей стадии без очистки. Неочищенный продукт коричневого цвета растворяют в 30 мл абсолютированного этанола, добавляют 2,5 r (0,032 ммоль) тиомочевины и нагревают реакционную смесь при 65-70оС в течение 18 ч после чего указанную смесь охлаждают до комнатной температуры. Осадок собирают фильтрованием и промывают последовательно этанолом (20 мл) и эфиром (50 мл), получая 30 г соли изотиоурония. Эту соль растворяют в 10 мл воды и добавляют к полученному раствору раствор 640 мг (0,016 моль) гидрата окиси натрия в 10 мл воды в атмосфере азота. Реакционную смесь нагревают до 100 С в течение 2 мин, о после чего охлаждают до О С, доводят рН смеси, до значения, равного
6,0, посредством уксусной кислоты и экстрагируют двумя порциями хлороформа по 35 мл. После сушки над сульфатом магния и отгонки растворителя (хлороформа) получают 941 мг (выход
46X) тиола, указанного в заголовке в виде желтого масла, 5
Ъ
В. Получепие и -нитробензил-3-(2I метилпиридин-3-ил-метантио)-ба(-(!в (R)-гидроксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)reпт-2-ен-2-карбоксилата.
К охлажденному до 0 С раствору
1,52 г (4,37 ммоль) кетопроизводного (пример 9, стадия А) в 5 мл ацетонитрила добавляют 0,86 мп (4,80 ммоль) диизопропилэтиламина, после чего вводят раствор 1,17 г (4,37 ммоль) дифенилхлорфосфата в 3 мл ацетонитрила в атмосфере азота. Полученный при этом раствор перемешивают в течение 30 мин при 0 С, получая fl--нитробензил-3-дифенилфосI
@орилокси-ба(- 1-(R)-гидроксиэтил )-7оксо-1-азабицикло(3,2,0) гепт-2-ен-2 карбоксилат. К этому раствору добавляют раствор 0,86 мл (4,80 ммоль) диизопропилэтилампна в 2 мл ацетонитрила, после чего вводят раствор 940 мг (6, 76 ммоль) тиола (продукта стадии
А) в 2 мл ацетонитрила. Полученную реакционную смесь перемешивают в течение 60 мин при О С. Осадок собирают фильтрованием и промывают эфиром (30 мл), получая в результате 1,12 г (выход 557) указанного в заголовке продукта в виде светло-желтого твердого вещества, т.пл. 186-188 С (с разложением).
Рассчитано: С 58,83; H 4,94;
N 8,94; $ 6,83.
С 7 з%ФЗО $
Найдено: С 58,63; Н 4,99; N 9,06;
S 6,58.
С. Получение 3-(2-метил-N-метилпиридин-3-ил-метантио) -бо(-(1-(R)— гидроксиэтил)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата.
К раствору 697 мг (1,19 ммоль) продукта стадии В в 100 мп хлористого о метилена добавляют по каплям при 10 С
0,5 мл (6,18 ммоль) метилфторсульфоната в течение 10 мин. Смесь перемешивают в течение 2,5 ч при комнатной температуре, собирают осадок фильтрованием и промывают его 30 мл хлористого метилена, получая 777 мг (90K) и-нитробензил-3-(2-метилпиридин-3ил-метантио)фторсульфонат-64-(1-(R)оксиэтил )-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата (кватернизованное производное пиридина) в виде желтого твердого вещества.
Рассчитано: С 48,91; Н 4,55;
N 7,23; S 11,04.
C 33 1493108 3 -4 смесью сульфата и окиси магния и концентрируют. Остаток подвергают очистке хроматографическим способом (колонка с силикагелем 1 5х21 см) Э 5 используя в качестве элюирующего растворителя эфир, получая в результате 0,90 r (71K) 1,2,3-тиадиаэол-4-илметанолметансульфоната, Рассчитано : С 24,73; Н 3,11; N 14,42; S 33,02. С НьЫ О Б Найдено: С 24,78; Н 3,09; N 14,66; S 31,94. Кроме того, найдено 0,13 г (197) ди-(1,2,3-тиадиазол-4-ил-метил)-эфира. D. 4-Лцетилтиометил-1,2,3-тиадиазол. К раствору 1,2,3-тиадиазол-4-илметанолметансульфоната (0,90 г, 4,6 ммоль) в тетрагидрофуране (9 мл) добавляют водный раствор (2 мл) тиолацетата натрия, полученный из тиолуксусной кислоты (0,38 мл, 5,3 ммоль) 25 и бикарбоната натрия (0,445 г, 5, ммоль) .Полученную реакционную смесь перемешивают при 23 С в течение 1 ч и разбавляют 75 мл эфира. Органический раствор промывают водой (3 раза по 3 мл), сушат над сульфатом магния и концентрируют. Сырую смесь очищают хроматографическим способом (колонка с силикагелем 1,4х19 си), используя в качестве элюирующего растворителя смесь 507 эфира и гексана, получая в результате 0,60 r (757) продукта. Рассчитано: С 34,47; Н 3,47; N 16,08; S 36,80. С Н И ОЬ Найдено: С 34,48; H 3,83; N 16,28; . 40 S 36,80. F.. 4-Ацетилтиометил-2-метил-1,2,3тиадиазолийтрифторметансульфонат и 4-ацетилтиометил-3-метил-1 2 3-тиаУ У 45 диазолий трифторметансульфонат. К раствору 4-ацетилтиометил-1,2,3тиадиазола (0,60 г, 3,44 ммоль) в смеси эфира (4 мл) и дихлорметана 50 (0,4 мл) добавляют несколько кристаллов указанного в заголовке соединения, а также 0,407 мг (3,6 ммоль) трифторметансульфоната в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивают при 23 С о в атмосфере азота в течение 6 ч. Белое твердое вещество, которое представляет собой смесь указанных в заголовке. двух соединений, отфильтровывают и промывают зф |рс t получая 1,05 г продукта (907). Рассчитано: С 20,27; Н 2,38; N 9,45; S 32,46 СтН Х О„БзF з Найдено: С 24 61; Н 2 57; N 8 47; $28, 21. F. 4"Меркаптометил-2-метил-1,2>3тиадиазолийтрифторметансульфонат и 14-меркаптометил-3-метил-1,2,3-тиадиазолийтрифторметансульфонат. Раствор смеси 4-ацетилтиометил-2метил-1,2,3-тиадиазолийтрифторметансульфоната и 4-ацетилтиометил-3-метил-1,2,3-тиадиазолийтрифторметилсульфоната (1,05 г, 3,1 ммоль) в 6 н. соляной кислоте (10 мп) нагрео вают при 65 С в атмосфере азота в течение 1,75 ч. Растворитель отгоня— ют при пониженном давлении, получая в остатке желтьп сироп в количестве 0,91 r. Это соединение используют на следующей стадии без очистки, G. (5R,6S)-6-(1R-гидроксиэтил)-3(2-метил-1,2,3-тиадиазолий-4-ил-ме тилтио)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)— гепт-2-ен-.2-карбоксилат. Охлажденньп1 до 5 С раствор (5R,6S)пара-нитробензил-6-(1R-гидроксиэтил)3-дифенилофосфон-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилата (1,7 г, 2,92 ммоль) в тетрагидрофуране (10 мл) обрабатывают раствором неочищенной смеси 4-меркаптометил-2метил-1,2,3-тиадиазолийтрифторметансульфоната и 4-меркаптометил-3-метил1,2,3 -тиадиазолийтрифторметансульфоната (0,9 г) в смеси с фосфатным буфером (рН 7,2, 0,3М, 15 мл) и тетрагидрофураном (5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение t ч,поддерживая значение рН 7,2 посредством 2 н. раствора гидрата окиси натрия. Перемешивание продолжают в течение еще 1 ч, после чего добавляют 50 мп эфира и 1 г 107-ного палладия на активированном угле. Полученную реакционную смесь гидрогенизируют при 23 С и давлении 45 фунт/кв.дюйм (3,17 кг/см ) в течение 2 ч, после чего фильтруют через слой целита.Органическую фазу отделяют, разбавляют эфиром (50 мл) и фосфатным буфером (рН 7,2, О,ЗМ, 20 мп) и гидрогенизируют (используя 2 r lOX-ного палладия на активированном угле) в те» чение 2 ч при 50 фунт/кв.дюйм (3,5 кг/cM ). Водные фазы, получен1493108 15 ные при первой и второй гидрогенизации, объединяют, промывают эфиром и подвергают очистке методом хроматографии «а Преп-Пак 500-С/18, используя в качестве растворителя для элюи5 рования воду, получая в результате 0,22 r неочищенного продукта. Его подвергают повторной очистке жидкостной хроматографией при высоком давлешш, используя для элюирования воду. Получено в результате 0,040 г (47) указанного в заголовке соединения после лиофилизации его. Пример 17. (5R,6S)-паранитробензил-6-(1R-гидроксиэтил-4Rметил †-({1,2,3-тиадиазол-4-ил)— ,метилтио1-7-оксо †-азабицикло(3,2,0) гент-2-ен-2-карбоксилат. Холодный (5 С) раствор (5R,6S)пара-нитробензил-6-(1R-гидроксиэтил)3-(дифенилфосфоно)-4R-метил-7-оксо1-азабицикло(3,2,0) гепт-2 — ен-2карбоксилата (3,0 ммоль) в СНз CN (12 мл) обрабатывают 4-меркаптометил-1,2,3-тиадиазолом (528 мг,4 ммоль) и диизопропилэтиламином (426 мг, 3,3 ммоль, 0,58 мл) ° После перемешивания в течение 1 ч раствор разбавляют Е ОАс (35 мл), дважды промывают холодной водой. Органический раствор, высушенный МАКО., упаривают и неочищенный продукт пропускают через слой SiO особой чистоты (40 г).Элюирование проводят Ft O (10х20 мл) и затем EtOAc (10x20 мл). Соответствую-35 щие фракции упаривают и получают 1,18 г (82,57) бледно-желтой пены. (5R,6S)-о-(1R-гидроксиэтил)-4Rметил-3-((3-метил-1 2 3-тиадиазолий» 4-ил) метилтио 1-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0) гепт-2-ен-2-карбоксилат (ВМУ26659). К раствору (5R,6S)-пара-нитробепзил-6-(1К-гидроксиэтил)-4R-метил-3(1,2,3-тиадиазол-4-ил)-метилтио-745 оксо-1 — азабицикло (3,2,0) гепт-2-ен-2карбоксилата (2,25 г, 4,72 ммоль) в СН,1 (14 мл) и Е О (9,5 мл) прика— пывают метил трифторметансульфонат (775 г, 4,72 ммоль) при комнатной температуре. Раствор мутнеет и выпадает масло.. После перемешивания 2 ч супернатапт декантируют, а масло растирают в Et 0 получая желтый порошок (2,08 r, 68,87). Кватернизован- 55 ный карбапенем (1,0 г, 1,56 ммоль) растворяют в ТГФ (25 мл),Е О (25 мл) и фосфатном буфере (0,2 моль, рН 7, l6 мп), гидрпруют 75 мин в присутствии Pd/Ñ (1,0 г) при давлении 45 psi. Затем реакционную смесь охлаждают на льду, фильтруют и фильтрат дважды экстрагируют Е О. Водную фазу хроматографируют на обращеннофазовом SiO» люируя Н О и затем 57-ным СН СИ в воде. Описанное гидрирование повторяют г3 тех же успониях при тех же загрузках. Обе порции соединяют и продукт подвергают рехроматографии на обращенно-фазовом $102, элюируют водой (175 мл) и 57-ным СН CN 3 в Н О, соответствующие фракции соединяют и лиофплизуют, получая карбапенем с выходом 164 мг (14,87.). II р и м е р 18. (1,3-Диметилимидазолий-4-ил)метантиол трифтарметансульфонат. К раствору (1-метилимидазол-5-ил)метилтиоацетата (20,43 r, 0,12 ммоль) в смеси ацетонитрил — эфир (1:2, 180 мл) прикапывают (0,5 ч) метилтрифлат (15,84 мг, 0,14 моль). В течение 1 ч смесь перемешггнают в атмосфере азота при 23 С и затем разбавляют эфиром (500 мл1. Жггдкость декантируют, остав ляя красный сироп, который дважды промьп ают эфиром (100 мл) перед добавлением соляной кислоты (200 мл, 6 н.). Получившийся водный раствор в течение 4 ч нагревают при О 65 С на воздухе и упаривают. Следы соляной кислоты удаляют перегонкой с водой, оставляя желтый сироп (32,4 г 92Я). Часть сиро:га очищают на колонке с обращенной фазой водой и элюирующим растворителем, ИК (неразбавленный). (5P,,6S) 3-((1,3-диметилимидазолий- .-ил)-метилтио7 — 6-(1R-гидроксиэтил)-4R-метил-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт — 2- н-2-карбоксилат (ВМУ27463), K холодному (-20 С) растьору (5R, 6S) ïàðà-нитробензил-3,7-диоксо-6(1R-гидроксиэтил)-4R-метил-1-азабицикло(3,2,0)гептан-2К-карбоксилата {34,78 r, 0,096 моль) в сухом ацетонитриле (150 мл), находящемуся в атмосфере азота, добавляют дифенилхлорфосфат (20,73 мл, 0,10 ммоль), диизопропилэтиламин (17,42 мл, 0,10 моль) в течение 5 мин и 4-диметиламинопиридин (О, 040 г) . Охлаждающую баню заменяют на баню с ледяной водой. Смесь перемешивают при 0 C в течение 1 ч, охлаждают до -20 С и последовательно 1493108 обрабатывают раствор м (1,3-диметилимидазолий-4-ил)-метантиспа (32,ч г, 0,1! моль) в -зцетонитриле (130 мл) и диизопропилэтиламином (19,16 мл, 0,11 моль) с такой скоростью, чтобы температура поддерживалась от — 15 до -20 С (10 мин). Охлаждающую баню заменяют на баню с ледяной водой. Смесь перемешивают при 3 С в течение 1,5, затем разбавляют водой (840 мл), Образуюгцуюся смесь обрабатывают Поwex 1х8 50 Cl (200 мл) и выпивают на слой с обращенной фазой (14х14 см). В качестве элюирующего растворителя используют смесь (25-357) ацетонитриля в .оде. фракции, содержащие чистый карбапенем, пропускают через колонку с Dnwex 1х8 50 Cl (4х58 см) со скорос1 ью 5 мл/гдлян, Лиофилизаци 20 ей водного раствора получают желтый сухой остаток 27,6 (557), который растворяют в буфере (КН, РО 4 — NaOH, 0 3 и., 615 мл, рН 7,0). После добавления 1ОЕ-ного палладия па угле 25 (20 г), тетрагидрофурана (400 мл) и эфира (600:-1л) смесь rидрируют при 23 С и 45 psi в течение 2 ч и фичьтруют ;; ре слой броунми. ьчерита (Cef iг.е) . Органическун фазу отделяют и экс грагируют водой (2x50 мч) . Воцну.о фазу промывают эфиром (2х70 мл), откачивают в высоком вакууме пля того, чтобы удалить следы органических растворителей, и выпивают на слой с обр.пценной фазой (14х13 см). Элюиро35 вани проводят смесью (0-47.) ацетонитрила в воде, после лиофилизации соответствующих фракций получают желтый порошок (14,6 r 78,87) . Пример 19. (5R,6S) 3- ((3,4диметилтиазолий-5-ил)метилтио )-6(1 R-гидроксиэтил)-4Р-метил-7-оксо1-азабицик.(о-(3,2,0)гент-2-ен-2карбоксилат (ВМУ-27061). Раствор (5R,6S)-аллил-6-(1 R †ãèäроксиэтил)-4R-метил †-((4-метилтиазол — 5-ил)метилтио)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилат (1,15 г, 3,34 ммоль) в сухом дихлорметане (25 мл) охлаждают до О С и об50 рабатывают прикапыванием (2 мин) метилтрифторметансульфонатом (0,53 r, 3,24 ммоль) . После выдерживания 40 мин при О С добавляют трифенилфосфнн (0,080 r) и тетракис(трифенилфосфин)- 5 палладий (0,080 r), затем добавляют 0,5N раствор 2-этилгексаната калия (6,7 мл, 3,35 ммоль) в этилацетате. После выдерживанпя в течение 30 мин при О С реакцио. шой с. ос.п по:зволяют нагреться по 22 С и с интервалами в 30 мин еще 3 раза добавляют ко 1плекг. палладия и трифе низ!фосфин (ка,кдого по 0,080 г) . После выдерживания в те— о чение 3 ч при 22 Г темную реакционную смесь упаривают при пониженном давлении и остаток разделяют между водой (15 мл) и эфиром (15 мл), Органическую фазу опять экстрагируют водой (5 мл) и объединенные водные фазы очищают на колонке с обращенно-фазовым силикагелсм (2,5х12 см), используя в качестве элюирукццего агента воду, а затем воду и ацетонштрил (9: 1) . После повторнои хроматографии получают основнои продукт в ниде белого порошка после лиофилггзации (0,248 r, 217). Hp и м е р 20. (5К,6S>- .ëðà-нитробензил-6-(1R-гидроксиэтил)-4К-метил)-3- ((1-метил-1,2,3-триазол-4-ил)метилтио)-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)— гепт-2-ен-2-карбоксилат. Холодный (5 Г) раствор (5R,6S)— пара-нитрвбензил-6-(1R-г:п роксиэтил)— 3-(дифенилфосфоно)-чК-метич-7-оксо-1- азабицикло(3,2,0)reпт-2-ен-2-карбоксилата (4,0 ммоль) в СН С. 1 (20 мл) обрабатывают 4-меркаг гометил-1-метил1,2,3-триазолом (735 мл, 5,7 ммоль) и диизопропилэтиламино (646 мг, 5 ммоль, 0,87 мл). Пссле перемешивания при 5 С в течение 15 мип и при комнатной температуре в ;е:ение 1 ч реакционную смесь разбавляют EtOAc (75 мл), промывают холодной водой, сушат ИВБО4 и упариваюта Оставшую ся пену хроматографируют на БгО особой чистоты (50 г), элюируя холодным Е ОАс (200 мл) и затем СНзСМ (200 мл) Соответствующие фракции объедингют и упаривают, чтобы осталась твердая пена. Выход 1,1 г (58,17.). (5R,6S) 6-(1R-гидроксиэтил)-4Rметил-3-f(1,3-диметил-1,2,3-триазолий-4-ил)-метилтио 1-7 †ок-1-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен-2-карбоксилат (ВМУ-26873). К раствору (5R,6S)-пара-нитробенI зил-6-(1R-гидроксиэтил)-4R-метил)-3((1-метил-1,2,3-триазол-4-ил)метилтио )-7-оксо-1-азабицикло(3,2,0)гепт2-ен-2-карбоксилата (1,1 г, 2,32 ммоль) в СН С1 (6 мп) и EtZO (5 мл) прикапывают при комнатной температуре трифторметансульфонат (419 мг, 2,55 ммоль, 1493108 0,29 мл). Сразу же выпадает масло, После перемешивания в течение 1 ч суе перпатантную жидкость декантируют и масло растирают в Е120, при этом об5 разовывается бледно-желтый порошок. Выход 1,31 г (88,67). Кватернизованное соединение (1,02 г,. 1,6 ммоль) растворенное в ТГФ (25 мл), Е О (25 ил) и фосфатном буфере (1,2 М, !р рН 7,0, 16 мл), гидрируют в течение 60 мин в присутствии 107.-ного Pd/Ñ (1,0 г) при давлении 40 р.s.i. Затем реакционную смесь охлаждают на льду, фильтруют и фильтрат экстрагируют !5 Е О (2х20 мл). Водный раствор хроматографируют на обращенно-фазовом SiО (20 r), элюируют холодной (5"С) водой (200 мп) и 57-ным CH3CN в Н О (100 мл). Соответствующие фракции 20 объединяют и лиофилизирун т. Выход 320 мг (56,97). Организм МИК, мкг/мп, для соединения предлагаемого известного (N-формимидолилтиенамицин) Пример 1 S. pneumoniae S. pyogenes S ° aureus S. aureus+507 А-9585 А-9604 А-9537 A-9537 0,25 0,06 0,13 0,03 0,004 0,001 0,004 0,016 0,06 0,008 0 5 0 5 0,5 0,06 0,016 0,03 0,06 0,03 0,03 0,03 А 20341-1 А-9664 А20468 А-9900 А21559 А!5153 0,13 0,13 0,06 0,06 0,03 0,13 0,25 0 25 О,!3 0,13 0,13.сыворотки S. aureus (Pen-res.) S. aureus (Meth-res.) S. faecalis Е. coli (! 04 ра,б ) Е. coli (1О-з ) Е ° col i (10 ) Е. coli (10 ) E. coli ,(10 3 ) Е. col i (10 ) К. pneumoniae К. pneumoniae P. mirabilis P. vulgaris P. morganii А-9606 А15097 А20688 А15119 А15119 А15119 А20341-1 А20341-,1 Полученные соединения (I) являются сильными антибиотиками, активными по отношению к различным грамотрицательным и грамположительным бактери ям. Активность in vitro. Установлено У что образцы карбапенемных соединений по примерам 1 и 2 после растворения в воде и разбавления питательным бульоном обнаруживают минимальные ингибирующие концентрации (MHK), выраженные в мкг/мл, по отношению к указанным микроорганизмам, что определено инкубированием при 37 С в течение ночи с разбавлением в пробирке. В табл. 1 дана антибактериальная активность in vitro карбапенемных производных по примерам 1 и 2,(Nформимидолилтиенамицин включен в качестве соединения сравнения). Таблица 1 1493108 Продолжение табл. 1, Организм мкгlмл, для соединения ИИК, вестного -формимидоилтиенамицин) предлагаемог О, 001 0,001 0,004. О, 016 Пример 0,002 0,002 0,004 0,016 pneumoniae pyogenes aureus aureus+50X А-9585 А-9604 А-953 7 А-9537 S, S. S. S, сыворотки S. aureus (Pen-res.) S. aureus (Meth-res.) S. faecalis Е. coli Е. coli К. pneumoniae К. pneumoniae P. mirabilis P. vulgaris P. morganii P. rettgeri S ° marcescens Е. cloacae Е. cloacae P. aeruginosa P. aeruginosa О, 008 0,008 А-9606 А 15097 0,5 0,016 0,03 0,06 0,13 0,06 0,03 0,13 0,13 0,03 0,06 0,06 0,25 В табл. 2 даны минимальные ингиби- известного соединений. рующие концентрации предлагамых и Р. S, Е, Е. P. Р, Н. Н. Н. Н. В. В. В. В. rettgeri marcescens с1оасае с1оасае aeruginosa aeruginosa influenzae influenzae influenzae influenzae fragilis f ragil is fragilis fragilis А22424 А20019 А-9569 А-9656 А-9843А А21213 А-9833 А20178 А21518 А21522 А22862 А22053 А22696 А22863 А 20688 А 15119 А 20341-1 А9664 А20468 А9900 А21559 А15153 А22424 А20019 А9659 А9656 А9843А А21213 0,25 0,13 0,13 0,13 1 16 32 16 0,03 0,03 0,25 0,03 0,25 0,016 0,016 0,06 0,13 0,03 0,016 0,06 0,13 0,03 0,13 0,25 0,25 0,03 0,06 0,06 0,25 16 32 32 32 О, 016 0,06 0,13 1493108 еч «I 4! r в о о8 ъ38 о О ОООО Ф о о 38 ЗО ОО-ОО СЧ 44 Меч зо сз оооао D мъ л 3 Ом ма О О л ь о ОСООО мъ с— ВЗ Во ООООО мъ .ъ 33 л о I Г« ! —. -I ОО- ОО м ООООО СЧ 4Ч СЧ Ме 38 ЧЗЗ ООООО ф D о о мъ мЪ 3 3 «ъ 8 л Ф о О О О ОО ° «ф 8 3 мъ «ъ ю О О О О О 3 3 .-ъ оΠΠ— ОО О ОООО Ф о i 1 О «! сч ° Ъ O 4 4 оо g» мъ о о О О О ОО «4 «ф Ф с 3 мъ 8 о С ОООО Ф g 4Ъ 84 Ъ Ф g оооо л «ъ 4 4 I 1 Оае СЧ 4 \ о о еч 4 4 сч Ф О 3 мъ 3» ООООО о Ф о 83лЬО ооооо 88 33 Ф елл о о о ° ллем --о 1 1 сч ООООО 3 3 c o 3 ОЗО О «О ъ Ю О О О ° ° ° ! о о о еч о о о ООООО о о о !С» о ODD л О о ао Ф О о мъ «4 О сч -4 ° Ъса к л оо л о о Л мъ о сч еч .Ч О О 44 4"Ъ л Л е Ф Зо оэ 3 3 мъ оо Ф О о сч 3 3 мъ о о о е Ъ О «4 4 оо oD ° 1 Ф D о ЧЪ ч ОО оо С4 3 л мЪ «4 сч мъ О ы сч О О OI м 4 4 о < Я O ЕЪЪФ 44 мЪ Л 4Ч мъ е ф «М44Ч Че «4 «4 CO C4 е -лакэ 4Чфмъф Ф Е 44 44 -Э сеча ФЗ лл Л 44 М4 МЪ Ч ф оф 4О Ф е о Че Я В в Ф ° а лм е 44 44 ч O ° чм 5963е а аaa чеа е ее ч 3 (r. Ф Ч Я Ч3 е «4 ° 4 O O e e» )34I4IФ Фм» ч ° с о мъ 41 Е В O ° Ч «4 4 ° «4 М ° ° 3 -" Ч 4 O 4I Ф е Л 41 ам ° ° I Ч..С ° ° о о V 4I! М 4 В 1 Ч Ф Еччае o ° !в 44I с 4О -4 O.O.4I 44 В Ма М ыыыыыыь 4CI 44I 4I I л .UI -.=-) 11 1 ! ! lJ l 3 1 () Ыем ф 833О ООООО 33мсьо ООООО ОЗлйл ООЭОО О лФ ОЛО О ООООО 4О Ф Ф Зооь ьоооооо л О О О О О О О О О О О О О Ф Ф Ффффф Фс Ъ«14«4 ФМЪ4 Ъ ° «1 1 I I ОООООÎ4 ОООООО ф Ф Ф O «лалл «лл» л DDD««Î-«Омъ» ° ° ° « «° ° ° 1 1 I 1 о о о о о о о о о î î о о флфллл фнмъл ООО--- Ое«4» Л ° ° I 1 I I о о о о о о о о о î î а о 83л «лл83л» л ! 111 о î î î î î î о о о о еч о о 8 8 3 о о 5 3 о о 5 л о о о о о о о о о о î о о ь Ю Ф Ф Ф ЛЮ ФФ « ° Ъе Ъ «Ъ ОООООООО О ° ° 1 111 ооооооооооо — о у --"----Зоооооо ойоо« л I 1 о о о о о о о о о о о ф о оооооооооо Ю Ф O 444Ъ44 4Ъ 4Ъ «Ъ ооо-- оо «л ° ° 1 1 О О О О О О О О О О О- О Ф оDЗ-8 оо3-Зл« О D Î Î Î Î Î Î D Î Î Î О О О О О О О О О О О О 4Ч O 4 Ъ44 444 Ъ 4Ъ4\ 4444 МЪ ООО-» -О»» N ° ° ° ° ° ° I I ооЬоооооооо — о Ф «лЗл одЗлллллмь О О О О О О О О О О О О О ф Ф Ъ «Ю Ф Ффффф Ф 33оооооЗооо ОСОООЬОООООмъ Ф «4 МЪ Са 444 N O 444 4«! «Ъ О СЧС 4CVОО 4Ч оооооооооооф Ф Ф 4О --мффлл л мъ ООООО-ОО о еч О О О О О О О О О О О м! «4 Е Е n O Фф Ф Ф » «съллф Ф л«4 ООООООООО«О О З О О О О О О О О О еч Ю Ф Ф л-ффллл-лл» ОООО- -О-еЧО ° ° ° ° о О О о о О э о О о с еч 45 1493 Терапевтическая эффективность in volvo соединения по примеру 1 и N-формимидолилтиенамицина после внутримышечного введения мьппам эксперимен9 5 тально зараженным различными организ46 108 мами, представлена в табл. 3, гле указана ЗДэ (доза, выраженная в мг/кг, требующаяся для защиты 501 зараженных мышей). Таблица 3 3,6х10 5, 5х10 5,4х10 1, 4х10 6,6х10З 2,3х10 6,2х10 5,1х10 П р и м е ч а н и е. За исключением Е. coli А15119 и К. pneumoniae А9964 лекарство вводили мышам внутримышечно через 0 и 2 ч после заражения. В случае Е. coli и К. Pneumoniae обработку проводят спустя 1 и 3,5 ч после заражения. В каждом испытании при каждой дозе используют по 5 мьппей. Токсичность. Выла определена токсичность соединения по примеру 1 после внутричерепного введения мьппам. Результаты представлены в табл. 4. Продолжение табл.4 И-формимидо5 лилтиенамицин 32 Таблица 4 *Среднее значение по 25 мышам. Содержание в крови и время полураэложения соединения по примеру 1 после внутримышечного введения 20 мг/кг мышам показаны в табл. 5. (соединения растворяют в 0,1 М фосфатном буфере при рН 7> данные по одному испытанию: по 4 мыши на соединение). яе. наивысшая доза мг/кг мг/кг, без клинических призна ков токсичности Со еди не ние По примеру 1 14 Т а блица 5 Содержание в крови, мкгlмл, после введения через ПР / 2*, I!11K"" *, мин мкг е ч/мл б Соединени е 90 мин 10 20 30 45 60 мин мин мин мин мин 6 3 14 10,8 6,8 2,6 0,8 0,6 По примеру 1 Й-формимидолил тиенамицин 12,6 9,9.7,3 2,6 0,7 0,3 *Время полуразложения. **Площадь под кривой зависимости концентрации в крови от времени. P. mirabilis А-9900 P. aeruginosa А-9843а P. aeruginosa А-20481 P. aueruginosa А-20599 S. aureus А-9606 S. faecalis А-20688. Е. col i А-15119 К. pneumoniae А-9964 3,3 0,3 0,63 0,7 0,09 3,3 0,6 2,5 3/15 0,5 0,4 0,18 0,07 2,8 2,5 2,2 1493108 Выведение с мочой соединения по примеру 1 после внутримьппечного введения 20 мг/кг мьппам представлено в табл. 6 (соединения растворяют в Т а блица б Выведение с мочой, %, через Соединение 26,1 По примеру 1 N-формимидолилтие нами цин 12,1 В табл. 7 показано защитное действие (30сд ) при внутримышечном ввеТаблица 7 ЗПке, нгlкг, для соединений ло примеру Организм I 38QIS8(IIK 078 73 8, 7 1IIK 0787 ITKK 0787 Б.aureus Л9606 — 0,21 E. co1i A15119 - 0,86 K.pneumoniae Л9664 — 1,8 P.mirabi1is А9900 — 1,4 P.aeruginosa A9843A 0,4 08 19 P.aeruginosa A24081 — 0,33 О,ОТ 0,89 l,2 1,8 2° 8 1 0,19 1,8 0,19с,о7 3 1 0,4 0,02 О,1 1 0,4 3 3 2 4 085 0,2 - о,g о,г о,г о,г 2,4 о,г О,1 о,ог 3 0,3 О, l 0,2 3 186 О,O2 г,2 2,3 9 о,3 0,43 О ° 39 0,89 В табл. 8 дано содержание в крови и время полуразложения предлагаемых соединений после внутримышечного введения мышам 20 мг/кг (соединения растворяют в 0,1 M фосфатном буфере рН 7; значения основаны на одном испытании: по 4 мьппи на соединение). Таблица 8 6,3 5,3 6,9 7,7 где R,— 40 р * Время полуразложения "* Площадь под кривой зависимости концентрации в крови от времени. * "* N- Ьормимидолн71тиенамицин, 1 3 5 б 8 11 13 14 15 Л 15 В 15 С МК 0787*** 14 10 13,9 9 ! 4,5 10 15,5 11 17,7 9 19,2 11 18,8 11 16,7 12 20,1 11 14,9 11 14,8 11 15,8 13 16,7 12 15, 9 10 15,1 10 14 6 10 8,5 11,8 10,5 8,5 9,5 7,4 6,4 7,6 9,5 7,4 7,3 0,1 М фосфатном буфере рН 7; данные по одному испытанию: по 4 мыши на соединение). Ою5 Оэ! 2687+бк7 0,1 0,1 12,2+3,6 дении зараженным мьппам пред.тагаемых и известного соединений. Формула изобретения 30!. Способ получения производных 7-оксо-!-азабицикло(3,2,0)гепт-2-ен2-карбоновой кислоты общей формулы он Н,С-НС = S-Л-(3-Ri! 3 водород или С,-С -алкил; С,-С -алкил, бензил или алкилкарбоксиметил; водород или пара-нитробензильная защитная группа при наличии также и противоиона; группа (СН2) „, где п = 1 или 2; моно- или дизамешенные С, — С4-алкилом группы A 13 .„ - 1 (331 1493108 причем указанное кольцо присоединено к А через атом углерода кольца и содержит атом азота, который кватернизирован Группои R 5 (отличающийся тем, что кетоэфир общей формулы ОН НR Н"зС -Н 10 0OR3 где К и R имеют указанные значения, ! подвергают взаимодействию с дифеннл- 15 хлорфосфатом в присутствии диизопропилэтиламина в среде инертного органического основания, на полученное при этом соединение общей формулы 25 HS À N о союз 40 где К„, R>, Ан gN имеют указанные значения, обрабатывают алкилирующим агентом общей формулы R — Х и где R имеет указанные значения; Х вЂ” галоген или группа сульфонат1 ного сложного эфира, с последующим выделением целевого продукта, или в случае необходимости, когда R > - пара-нитробензильная группа, удалением карбоксизащитной группы. Приоритет по признакам: 28.09.82 при R 1 — водород. 09.09.83 при R<- С<-С -алкил. R,— Х 50 оц И С-С 3 где R и R имеют указанные значения; - дифеноксифосфинилоксигруппа действуют производным меркаптана общей формулы гие А «-(Я«неют ука анные значения, в среде инертного органического раст- 35 ворителя в присутствии диизопропилэтиламина с последующим алкилированием образовавшегося соединения общей формулы 1 Н С НС 5 АЯ4 О COOR3 45 где К,, К, Аи .{ и имеют указанные значения, алкилирующим агентом общей формулы где R имеет указанные значения; Х- галоген или группа сульфонатного сложного эфира, и выделением целевого продукта или в 55 случае необходимости, когда R 5 — пара-нитробензильная группа, удалением карбоксизащнтной группы. 2. Способ получения произноднн1х 7-оксо-1-азабицикло (3, 2,0) гент-2-ен2-карбоновой кислоты общей формулы ОН HR1 + НЗС НС = 5-А .— I О (Оо®3 1 где R — водород или С -С -алкил 1 1 f R1 С 1- С4 алкил, бензил или алкилкарбоксиметил; R> — водород или пара-нитробензильная защитная группа при наличии также и противоиона; А — группа (СН, )„, где п 1 или 2, N — - моно- или диэамещенные C Сд-алкилом группы 1,.Н -Н х причем указанное кольцо присоединено к А через атом углерода кольца и содержит атом азота, который кватернизирован группой R отличающийся. тем, что соединение общей формулы QH BRi НЗС вЂ” НС S A QQ