Производные 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)тиазолидона-4, обладающие противовирусным действием в отношении вируса коксаки в4 и вируса везикулярного стоматита

 

Изобретение касается гетероциклических веществ, в частности гидрохлорида 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-(n-диметиламинобензилиден)тиазолидона-4 или 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-фурфурилидентиазолидона-4, обладающих противовирусным действием в отношении вирусов Коксаки В4 и везикулярного стоматита. Цель изобретения - создание новых веществ с активностью, не характерной для данного класса. Синтез ведут из тиосемикарбазона флуоренона-9 и n-диметиламинобензальдегида или фурфурола в среде этанола в присутствии монохлоруксусной кислоты и карбоната натрия (безводного) при кипячении. Выход, % , т.пл.°С; Брутто-ф-ла; а) 15,2, 102-104, C₂₅H₂₉N₄OS·HCl б) 51,4; 147-150; C₂₁H₁₃N₃O₂S. Новые вещества малотоксичны (МПД = 62,5 и 15 мкг/мл, LD₅₀ = 980 и 2000 мг/кг) и имеют химикотерапевтический индекс в отношении стоматита 15,5 и 3,75. 3 табл.

Изобретение относится к органической химии, к новым химическим соединениям, а именно к производным 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)тиазолидона-4, обладающим противовирусным действием в отношении вируса Коксаки В4 и вируса везикулярного стоматита. Указанные свойства позволяют предполагать возможность использования этих соединений в медицине в качестве ее противовирусных средств. Цель изобретения - получение новых химических соединений, обладающих новым для производных тиазола видом биологического действия: антивирусной активностью в отношении вирусов Коксаки В4 и везикулярного стоматита. П р и м е р 1. Получение 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-(n-диметиламинобензи- лиден)тиазолидона-4- гидрохлорида (соединение 1). К 5,06 г (0,02 моль) тиосемикарбазона флуоренона-9 в 100,0 мл этилового спирта прибавляют 2,06 г (0,02 моль) монохлоруксусной кислоты, 2,98 г (0,02 моль) n-диметиламинобензальдегида, 2,0 г безводного натрия карбоната и смесь кипятят в течение 25 ч. Затем фильтруют и растворитель отгоняют до небольшого объема. К остатку после охлаждения прибавляют 100,0 мл дистиллированной воды и отфильтровывают осадок. Фильтрат упаривают, охлаждают, выкристаллизовавшийся продукт отфильтровывают и отставляют. Вновь упаривают полученный фильтрат и остаток - масло темно-красного цвета растирают с 200,0 мл разведенной соляной кислоты в тонкий порошок, который отфильтровывают, промывают дистиллированной водой и высушивают. Получают 1,4 г (15,2%) 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-(n-диметилами- нобензилиден)тиазолидона-4- гидрохлорида в виде мелкокристаллического вещества вишневого цвета с температурой плавления 102-104^оС. Найдено, %: С 65,48, Н 4,54, N 12,18, S 6,43. С₂₅Н₂₀N₄OS˙HCl Вычислено, %: С 65,14, Н 4,59, N 12,15, S 6,96. УФ-спектр (этанол, λ_макс, нм, lgε ): 256 (4,80), 262, (4,78), 345 (4,62), 450 (4,29). П р и м е р 2. Получение 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-фурфурилидентиазоли- дона-4 (соединение 2). К 5,06 г (0,02 моль) тиосемикарбазона флуоренона-9 в 50,0 мл этилового спирта прибавляют 2,06 г (0,02 моль) монохлоруксусной кислоты, 1,92 г (0,02 моль) фурфурола, 2,0 г безводного натрия карбоната и смесь кипятят в течение 6 ч. Фильтруют и из фильтрата отгоняют спирт до небольшого объема. Остаток - маслянистое вещество коричневого цвета, заливают на 30 мин 200,0 мл разведенной соляной кислоты, затем сливают ее и дальше обрабатывают дистиллированной водой. Продукт отфильтровывают, промывают водой, высушивают. Получают 4,0 г (51,4%) 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-фурфури- лидентиазолидон-4 в виде зеленовато-желтого мелкокристаллического вещества с температурой плавления 147-150^оС (из этанола). Найдено, %: С 68,09, Н 3,72, N 11,29, S 8,45. С₂₁Н₁₃N₃О₂S. Вычислено, %: С 67,91, Н 3,53, N 11,31, S 8,63. УФ-спектр (этанол, λ_макс , нм, lg ε) : 244-247 (4,68) (изгиб), 255 (4,76), 262 (4,76), 262 (4,76), 289-298 (4,14), (изгиб), 345-350 (4,50). П р и м е р 3. Определение токсичности соединений 1-3 в культуре клеток L-41. Определение токсичности испытуемых химических соединений проведено в культуре клеток L-41. К питательной среде Игла добавляют различные количества вещества, начиная с 5000 мкг/мл и менее. Наблюдение за культурой клеток ведут на протяжении 4 сут с ежедневным просмотром. За максимальную переносимую дозу (МПД) исследуемого вещества принимают его наиболее высокую концентрацию, которая не вызывает дегенерации клеток L-41. Результаты исследований представлены в табл.1. Установлено, что наименьшей токсичностью в культуре клеток обладает 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-(n-диметиламино-бензилиден)тиазолидон-4- гидрохлорид (МПД = 62,5 мкг/мл). Для 2-(флуоренил-иден- 9-гидразоно)-5-фурфурилидентиазолидона-4 МПД составляет 15,0 мкг/мл, а для 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-(м -нитробензилиден)-тиазолидона-4 (соединение 3) - 7,5 мкг/мл. Исследуемые соединения относятся к малотоксичным веществам. П р и м е р 4. Изучение противовирусной активности соединений 1-3. Определение противовирусной активности проводят по отношению к РНК-содержащим вирусам Коксаки А 14 (Flores), Коксами В4 (Powers), ECHO 11 (Upsala) везикулярного стоматита (Indiana) и ДНК-содержащему вирусу простого герпеса 1 типа (Л-2) и определение величины химиотерапевтического индекса (ХТИ). Тест-вирус в дозе 100 ТЦД 50/0,1 мл вносится в культуру клеток L-41 и инкубируется 1 ч при 37^оС. Непосредственно после адсорбции вирус сливается, клетки промываются средой Игла и в пробирки вносится среда поддержки, содержащая различные концентрации испытуемых веществ. Наблюдение ведут на протяжении 72 ч с ежедневным просмотром. Отсутствие цитопатического действия вируса в опыте при "срабатывании" его в контроле позволяет считать вещество в данной концентрации активным. Спектр противовирусной активности исследуемых соединений представлен в табл.2. Из табл.2 видно, что все исследованные производные 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)-5-R-тиазолидона-4 действуют на вирус везикулярного стоматита с химиотерапевтическим индексом, равным 4, а 5-n-диметиламинобензилидензамещенное обладает, кроме того, активностью в отношении вируса Коксаки В4 (ХТИ-2). П р и м е р 5. Исследование острой токсичности соединений 1-3. Острая токсичность соединений 1-3 определяется для беспородных белых мышей массой 10-12 г при пероральном введении пяти концентраций веществ, приготовленных путем двукратных разведений. Гибель животных регистрировали на протяжении 14 дней. Вещества растворяли в 20% водном диметилсульфоксиде и вводили животным в объеме 0,2 мл. Результаты опытов представлены в таблице 3. Таким образом, указанные соединения могут быть использованы для экспериментальной химиотерапии вирусных инфекций, а также служить основой для направленного синтеза эффективных противовирусных средств.

Формула изобретения

Производные 2-(флуоренилиден-9-гидразоно)тиазолидона-4 общей формулы где при n = 1 R - парадиметиламинобензилиден или при n = 0 R - фурфурилиден, обладающие противовирусным действием в отношении вируса Коксаки В4 и вируса везикулярного стоматита.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2