2-о-сульфонаты метил 5-о-бензил-3-фтор-3-дезокси-д- арабинозы в качестве промежуточных продуктов в синтезе биологически активных 3 @ -фтор-3 @ -дезоксирибонуклеозидов

 

Изобретение касается сахаров, в частности метил-5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-п-толуолсульфонил-α-Д-арабинофуранозы, метил-5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-п-толуолсульфонил-β-Д-арабинозы и метил-5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-метансульфонил-α-Д-арабинофуранозы-промежуточных продуктов для синтеза новых биологически активных 3<SP POS="POST">Ъ</SP>-фтор-3<SP POS="POST">Ъ</SP>-дезоксирибонуклеозидов, проявляющих цитостатическую активность. Цель - создание новых промежуточных веществ указанного назначения. Синтез ведут реакцией метил-5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-α (илиβ)-Д-арабинофуранозы с п-толуол (или метан)сульфохлоридом в среде пиридина. Выход, %

т.пл., °С

брутто-ф-ла: а) 93

сироп

C<SB POS="POST">20</SB>H<SB POS="POST">29</SB>O<SB POS="POST">6</SB>SF

б) 88,7

73-74

C<SB POS="POST">20</SB>H<SB POS="POST">23</SB>O<SB POS="POST">6</SB>SF

в) 92,4

сироп

C<SB POS="POST">14</SB>H<SB POS="POST">19</SB>O<SB POS="POST">6</SB>SF. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

„„SU„„1521739 А 1 (51)4 C 07 H 15/18, 19/067, 19/167

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ статическую активность, большую, чем известный структурный аналог — циклоцитидин, Цель изобретения - получение новых, фторпроизводных арабинофуранозы в ка— честве промежуточных соединений в синтезе 3 -фтор-3 -дезокси-л-D-рибофураноэидов аденина (II), гуанина (III) и цитоэина (IV) .

П:з и м е р 1. Метил 5-0-бензил-3-фтор-3 "де зокси -2-О-и-тол уолс ул ьфонил- -D-араби нофура ноэа (Ia) .

К раствору 2,9 r (11,31 ммоль) метил 5-О-бензил-3-фтор-3-деэокси-d-D-арабинофуранозы в 50 мл пиридина добавляют 5,0 г (26,22 ммоль) С Н СНБО

ОСНЗ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4345567/31-04 (22) 18 ° 12.87 (46) 15.11.89, Бюл. и 42 (71) Институт биоорганической химии

АН БССР (72) Н.Е. Пупейко, Т,И. Прикота, Г.Г. Сивец, Е.И, Квасюк и И.А. Михайлопуло (53) 547. 522(088 .8) (56) Kowollik G., Caertner К ., Langen P° . Nucleosides of fluorocarbohydrates. Х?ТТ. Synthesis of 3 —

-deoxy-3 -fluorouridine. — J. Carbohydr., Иис1еоя Ыеэ, nucleotides, 1975, v. 2, 3, р. 191-195. (54) 2-О-СУЛЬФОНАТЫ МЕТИЛ 5-О-БЕНЗИЛ-3 "ФТОР-3-ДЕЗОКСИ-D-АРАБИНОЗЫ В КАЧЕСТВЕ ПРОМЕЖУТОЧНЫХ ПРОДУКТОВ R СИНТЕВЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ 3 -фТОР-3 -ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕОЗИДОВ

Изобретение относится к производным 3-фтор-3-дезокси-D-арабинофуранозы формулы а) d -ОСН3, R =CH3CQH4SOQ (n-), б) Р -ОСН3, R =CHgCgH4 SOg (n ) в) o(-ОСН„, R =CHqS0q являющимся промежуточными продуктами

I в синтезе новых 3 -фтор-3 -дезоксирибонуклеозидов, проявляющих цито2 (57) Изобретение касается сахаров, в частности метил 5-О-бензил-3-фтор-3-де зокси-2-О-п- тол уолсул ьфонил-c(.-D-арабинофуранозы, метил 5-0-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-и-толуолсульфонил-p-D— - арабинозы и метил 5-0-бензил-3-фтор-3-де зокси -2-0- мета нс ул ьфонил-о(-D-арабинофуранозы - промежуточных продуктов для синтеза новых биологически активных 3 -фтор-3 -дезоксирибонуклеозидов, проявляющих цитостатическую активность. Цель - создание новых промежуточных веществ укаэанного назначения. Синтез ведут реакцией метил-5-О-бензил-3-фтор-3-деэокси-4 (или р)-D-арабинофуранозы с п-толуол (или метан) сульфохлоридом в среде пиридина. Выход,4: т.пл., С, брутто-ф-ла: а) 93; сироп; С,.Н„О,SF; б) 88,7; 73-74; С„Н„О,В ; в) 92,4, сироп; С„, Н„ О,ЯР. 1 табл.

1521739 п-толуолсульфохлорида, реа кционную о смесь перемешивают 28 ч при 20 С. Реакционную смесь выливают-при перемешивании в смесь льда и 53-ного рас5 твора бикарбоната натрия (200 мл) и экстрагируют хлороформом (Зх50 мп).

Органический слой отделяют и промывают 2н. раствором соляной кислоты (100 мп), водой (200 мл), сушат безводным сульфатом натрия и упаривают досуха. Остаток хроматографируют на силикагеле L 100/400 (200 -смз). Ко" лонку элюируют смесью растворителей гексан - этил - ацетат с постепенным увеличением содержания этилацетата в соотношении от 17:3 до 4: 1 (общий объем 1 л). Фракции, содержащие соединение (Ia), собирают и упаривают. Получают 4,32 г (93 ) метил-5-О-бензил«3-фтор-3"дезокси-2-О-и-толуолсульфонил"Ы-D-арабинофуранозы (Та) в виде сиропа.

Спектр ПИР (CDC1 ), d, ч,на млн;

7,80-7,28 (м., 9Н, ароматика); 4,96 (с., 1Й, Н-1); 4,86 (м., 1H, Й-3);

4,83 (м., 1H, Н-2), 4,56 (м., 2Н, CHzPh) 4,26 (м,, 1Н., H-4); 3,61 (м., 2Н, H"5,5), 3,30 (с., ЗН, OCH );2,45 (< ° э ЗН у CH3 Ph) °

Найдено,3: С 58,18; Н 5,52; S7,60;

Р 4,70.

С „Н„О,В

Вычислено,4: С 58,52; Н 5,64;

S 7,81; F 4,62.

Пример 2. Метил 5"0-бенэил-3-фтор-3-дезокси-2-О-и-толуолсульфонил-p-D-а раби нофура ноза, (Тб) .

К раствору 3,9 г (15,21 ммоль) метил 5-0-бенэил-3-фтор-3-дезокси-р40

-D-арабинофуранозы в- 50 мл пиридина добавляют 6,0 r (31,47 ммоль) и-толуолсульфонилхлорида и перемешивают

48 ч при 20 С. Реакционную смесь при перемешивании выливают в смесь лед.45 вода (300 мл). Выпавший осадок отфиль. 5 тровывают, промывают водой (100 мл), растворяют в 300 мл хлороформа, про" мывают 5 -ным раствором бикарбоната натрия (2x50 мл), водой (50 мл) и сушат безводным сульфатом натрия. Рас- 50 твор упаривают досуха, остаток кристаллизуют из этанола. Получают 5,54 г (88,74) метил 5-0-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-и-толуолсульфонил- р-Dо

-арабинофуранозы (16), т. пл. 73-74 С, 55

Спектр ПМР (CDC1>), У, ч, на млн:

7,85-7,25 (м., 9Н, ароматика) 5,06 (м., 1Н, Н-3); 4,95 (м., I.H Í-2);

4,85 (м., 1Н, Н-1), 4,55 (м., 2Н, CHzPh) 4, 19 (м., 1Н, Н-4); 3,57 (д.д

1H, H-5); 3,53 (д.д., 1H, H"5) l 3,25, с., 3Н, ОСНз); 2,45 (с., 3Н, CHyPh) °

Найдено,Ж: С 58,30; Н 5,60, S

7,71; F 4,58.

С z Hzs06SF

Вычислено,3: С 58,52; Н 5,64;

S7,81,,F 4,62.

Пример 3. Метил 5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-мета носул ьфонил-3-D-арабинофураноза (Ie) .

К раствору 3,2 г (12,48 ммоль) метил 5-О-бенэил-3-фтор-3-дезокси-с(-D-арабинофураноэы. в 50 мл пириди на добавляют 1,95 мл {2,88 r, 25,13 ммоль) метансульфохлорида и реакционную смесь перемешивают 3 сут при 20 С.

В реакционную смесь добавляют 5,0 r льда, выдерживают 40 мин и упаривают раствор досуха. Остаток растворяют в 200 мл хлороформа, промывают 5ь""ным раствором бикарбоната натрия (50 мл), водой (2x100 мл) и сушат безводным . сульфатом натрия. Раствор упаривают досуха, остаток хроматографируют на силикагеле L 100/400 (150 см ). Колонку элюируют смесью растворителей гексан - этилацетат с постепенным увеличением содержания этилацетата в соотношении от 99:1 до 1:1 (общий объем 1 л). Фракции, содержащие соединение (Ie), собирают и упаривают.

Получают 3,86 (92,43) метил 5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-метансул ьфонил-K-D-араби нофуранозы в виде сиропа °

Спектр IlMP (CDC13), ", ч. на млн:

7, 39-7,28 (м., 5Н, а ромат и ка ); 5, 11 (с., 1Н, Н-1); 5,08 (м., 1Н, Н-3)

5,06 (м., 1Н, Н-2); 4,61 (м., 2Н, СН zPh); 4, 28 (м., 1Н, Н-4) ) 3,72 (д., 2Н, Н-5, 5)»44 (с., 3Н, ОСН з); 3, 00 (с., 3Н, CH SOz) °

Найдено,4: С 50,60; Н 5,80; S9,70;

F 5,52.

C Н „О,В

Вычислено,З: С 50,29; H 5,72, D 9,58, F 5,68.

Полученные производные (?а-в) испол ь зуются в си нтезе 3 -фтор-3 -деэоксирибонуклеозидов (II) — (IV), включающем 6 стадий: замещение тозилат (меэилат) -иона бензоат-а нионом, удаление бензильной защиты, бензоилирование 5 -гидроксила, замещение ацетат-ионом метоксигруппы у гликозид5

15217 ного атома углерода, гликозилирование и деблокирование.

Пример 4. Метил 5-О-бензил-2-О-бензоил-3-фтор-3-дезокси-Ы-D-рибофураноэа (V) °

К раствору 0,44 г (1,07 ммоль) метил-5-О-бенэил-3-фтор-3-дезокси-2-0-и-толуолсульфонил-Ы-D-арабинофураноэы (Ia) в 10 мл диметилсульфокси- 10 да добавляют 6,6 r (12,67 ммоль) комплекса дибензо-18-краун-6 с бензоатом калия (1:1) и кипятят 7 ч. Реакционную смесь выливают в l00 мл. воды и.экстрагируют хлороФормом (3 х х 50 мл). Органический слой отделяют, сушат безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на силикагеле L. 100/400 (130 см ).

Колонку элюируют смесью растворите- 20 лей гексан - этилацетат с постепенным увеличением содержа ния этила цетата от 1 до 25 об.ь. Фракции, содержащие соединение (V), собирают и упаривают. Получают 0,13 г (33,6Ж) ме- 25 тил 5-О-бензил-2-0-бензоил-3-фтор. -3-дезокси-(-D-рибофуранозы (V) в виде сиропа.

Найдено,Ж: С 66,70 Н 5,90; F5,17.

С2 Н,О У

Вычислено,6: С 66,65; Н 5,87;

F 5,27.

Из 0,66 r (1,97 ммоль) метил 5-0-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-0-.метанс ул ьфонил-u -D-а ра би нофура нозы (II I) и смеси 1,0 г комплекса (1:1) дибен35 зо-18-краун-6 с бензоатом калия (1,92 ммоль) и 1,0 r (6,24 ммоль) бензоата калия в 10 мл диметилсульфоксида аналогично получают 0,15 г (203) соединения (V) .

Пример 5. Метил 5-0-бенэил-2-О-бенэоил-3-фтор-3-дезокси-р-D-рибофура ноза (VI) .

Смесь 1,23 г (2,99 ммоль) метил 45

5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-2-О-и-толуолсульфонил-p-D-арабинофураноэы (Хб), 4,5 г (28,08 ммоль) бензоата калия и 4,5 r (8,64 ммоль) дибензо-18-круана-6 в 45 мл сухого диметило 50 сульфоксида нагревают при 205-210 С

4 ч. Раствор охлаждают, добавляют к нему 30 мл воды и экстрагируют хлороформом (4x50 мл). Органический слой отделяют, сушат безводным сульфатом натрия и упаривают досуха. Остаток

55 растворяют в 5 мл пиридина, добавляют 0,2 мл (0,24 г, 1,7 ммоль) хлористого бензоила и выдерживают смесь

39 при 20 ч К раствору доба вляют

0,2 мл метанола и спустя 10 мин раствор упаривают. Остаток хроматографируют на силикагеле L 100/400 (120 см )

Колонку элюируют смесью растворите" лей гексан - этилацетат с постепенным увеличением содержания этилацетата от 10 до 50 об.ь. Фракции, содержащие соединение (VI), собирают и упаривают. Получают 0,8 г (75 ) метил

5-О-бензил-2-О-бензоил-3-фтор-3-дезокси-p-D-рибофуранозы (VI) в виде сиропа, мол.масса 360,38.

Найдено,ь: С 66,80; Н 5,91, F5,05

C„,Í„0 Г

Вычислено,Ж: С 66,65; H 5,87

F 5,27.

Пример 6. Метил 2-О-бензоил-3-фтор-3"дезокси-4-D-рибофураноза (ЧП) .

К раствору l,7 r (4,71 ммоль) метил 5-О-бензил-2-О-бензоил-3-Фтор-3-дезокси-8-D-рибофуранозы (V) добавляют 1,7 г 104-ного Pd/Ñ и перемешивают смесь в атмосфере водорода

72 ч. Катализатор отфильтровывают, промывают спиртом (50 мл), спиртовой раствор упаривают. Остаток кристаллизуют из эфира.

Получают 1, 24 г (97, 21) соели нения (VII), т.пл. 104" 105 С.

Найдено,3: С 57,60 Н 5,49 F 7,06, С, Н gg0gF

Вычислено, ь: С 57, 77; Н 5, 59 >

F 7,02.

Пример 7. Метил 2-О-бензоил-3-Фтор-3-дезокси- в-D-рибофура ноэа (VIII), Из 1,36 г (3,77 ммоль) метил 5-0-бензил-2-бензоил-3-фтор-3-дезокси-р-D-рибофуранозы (VI) и 1,4 г 101-ного Pd/С аналогично получают 1,0 г (984) соединения (VIII) в виде сиропа.

Найдено,4: С 57,80; Н 5,65; F6,98, С„,Н „О,F

Вычислено,Ф: С 57,77; Н 5,59;

F 7,02.

Пример 8. Метил 2,5-ди-О-бензоил-3-фтор-3-дезокси-р-Л-рибофура ноза (IX) .

К раствору 1,3 r (4,81 ммоль) метил 2-О-бенэоил-3-фтор-3-дезокси- (-D-рибофураноэы (VII) в 12 мл пиридина при охлаждении до 0-5 С и перемешивании добавляют по каплям 1,3 мп (1,58 r, 11,23 ммоль) хлористого бензоила и перемешивают 10 ч при 20" С, 1521739

Реакционную смесь выливают в 50 г смеси лед - вода и экстрагируют хлороформом (Зх100 мл). Органический слой отделяют, сушат безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток

5 хроматографир уют. на сили ка геле

100/400 (200 см ). Колонку элюHpóþT смесью растворителей гексанэтилацетат с постепенным увеличением содержа ния этила цетата до 25 об.4.

Фра кции, содержащие соединение (IX), собирают и упаривают.

Получают 1,7 г (94,43) метил 2,5-ди-О-бензоил-3-Фтор-3-дезокси" 15

"D-рибофуранозы (IX) в виде сиропа.

Найдено,4: С 64,36; Н 5,01; F5,02.

С„Н „0, Вычислено,4: С 64,16; Н 5,11;

Р 5,07 ° 20

Пример 9. Метил 2,5-ди-О-бензоил-3-фтор- 3-дезокси-р Р-риоо фураноза (X).

Из 1,0 г (3,7 ммоль) метил 2-0-бензоил-3-Фтор-3-дезокси-p-D-рибо- 25 фуранозы (VIII) и 0,54 мл (0,65 г, 4,6 ммоль) бензоилхлорида получают

1,12 г (81,14) соединения (X) в виде сиропа.

Найдено,4: С 64,40; H 5,21; F4,98. 30

С ОН,эО gF

Вычислено,4: С 64,16; H 5,11;

F 5,07.

Пример 10. 1-О-Ацетил-2,5-ди-О-бензоил-3-фтор-3-дезокси-0-рибофура ноза (XI) .

К раствору 1,3 г (3,47 ммоль) метил 2,5-ди-О-бензоил-3-фтор-3-дезокси-4-0-рибофуранозы (IX) в смеси

1О мл уксусной кислоты и 1,2 мл уксусного ангидрида добавляют 0,7 мл концентрированной серной кислоты и перемешивают 20 ч при 20 С. Реакционную смесь выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия .(100 мл), 45 содержащего 50 г льда. Смесь экстрагируют хлороформом (2х100 мл), органический слой отделяют, сушат безводным сульфатам натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на силикагеле

100/400 (100 см ). Колонку элюируют смесью растворителей гексан - эфир с постепенным увеличением содержания эфира от 1 до 50 об.ь. Фракции, содер" жащие соединение (XI), объединяют и упари вают.

S5

Получают 1,31 r (93,8Ж) 1-О-вцела тил" 2, 5-ди-О-бензоил" 3-фтор-3-дезокси-D-рибофуранозы -(XI) в виде сиропа.

Найдено,4: С 62,80; Н 4,81; F4,69.

С„H „0„

Вычислено,4: С 62,68; H 4,75, F 4,72.

Из 0,5 г (1,33 ммоль) метил 2,5-ди-О-бе нзоил-3-фтор-3-дезокси- р-D-рибофуранозы (XI) действием смеси

2,1 мл уксусного ангидрида, 3,0 мл уксус ной кислоты и О, 03 мл концентрированной серной кислоты получают

0,48 г (89,33) соединения (XI).

Пример 11. 6-N-Бензоил-9- (2, 5 -ди-О-бензоил-3 -фтор-3 -дезокси - р-D-рибофура нозил ) адени í (XII) .

Смесь 1,7 г (4,22 ммоль) соединения (XI) 1,6 г (4,17 ммоль) бис-триметилсилильного производного 6-Ы-бензоиладенина и 0,97 мл (2,16 r

8,31 ммоль) четыреххлористого олова в 26 мл дихлорэтана перемешивают 18ч при 20 С. Реакционную смесь разбавляют хлороформом до 70 мл и выливают в 40 мл насыщенного раствора бикарбоната натрия. Водный слой отделяют и промывают хлороформом (2x30 мл) . Хлороформные растворы объединяют сушат безводным сульфатом натрия и упаривают. Остаток хроматографируют на силикагеле Ь 100/400 (300 смз}. Колонку элюируют смесью растворителей хлороформ:метанол с постепенным увеличением содержания метанола от 2 до

12 об.ь. Фракции, содержащие нуклеозид ный продукт, собирают и упари ва" ют.

Получают 1,99 г (824) 6-N-бензоил-9-(2, 5 -ди-О-бензоил-3 -Фтор-3 -дезокси-P-D -рибофура нозил ) адени на (XII) в виде сиропа. ECOH

УФ-спектр (lgf), Л „„„нм: 232 (4,56); 280 (4,30?.

Найдено, Ж р С 63,90; Н 4, 00;

N 11,90; F 3, 21.

C З1н, 11р,ь

Вычислено,4: С 64,02; Н 4,15;

N 12,04, F 3,26.

Пример 12. 2-N-Ацетил-9-(2,5 -ди-О-бензоил-3 -фтор-3 -дезокси- AD-рибошуранозил) гуанин (XIII) .

Смесь.1,74 r (4,32 ммоль) соединения (XI) и триметилсилильного npo" изводного 2,9-N,N -ацетилгуанина, по" лученного кипячением в течение 3 ч из 1,2 r (5,10 ммоль) 2,9-N,N -ацетилгуанина в 30 мп гексаметилдисилазана, 0,91 мп (1,11 г 5,0 ммоль) триметилсилилтрифторметансул ьфоната в

50 мл дихлорэтана кипятят 1,5 ч. Ре1521739

30 акционную смесь упаривают, остаток растворяют в 150 мл хлороформа и промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (2x50 мл), водой (2x50 мл) 5

Хлороформный раствор сушат безводным сульфатом натрия, упаривают и хроматографируют на силикагеле L40/100 (200 см ) . .Колонку элюируют смесью хлороформ - метанол с постепенным увеличением содержания метанола от 2 до 6 об.ь. Фракции, содержащие нуклеозидный продукт, собирают и упаривают. Получают 1,44 r (62,24) 2-N-вцепил-9- (2,5-ди-О-бензоил-3-фтор- 15

-3-дезокси-p-D-рибофура нозил) гуанина (XIII) в виде аморфного порошка (по" сле высаждения в гексан), т.пл. 135-..

1380С, CIOH

УФ-спектр (Igf), Л„„„, нм; 234 (4,53), 259 (4,32).; 280 (4, 22), Найдено,4: С 58,40; H 3 97; N

12,87; Г 3,28.

С2. Н И кОт7 25

Вычислено,Ж: С 58,31; Н. 4,14;

N 13,07; F 3,54.

Пример 13. 1-(2,5-Ди.-О-бензоил-3-фтор-3-дезокси-р-D-рибофуранозил) цитозин (Х?Ч) .

Смесь 1,1 r {2,73 ммоль) соединения (XI) и триметилсилильного про-. изводного цитозина, полученного кипячением 0,3 г (2,70 ммоль) цитозина в смеси 1,0 мл триметилхлорсила" на и 5,0 мл гексаметилдисилазана в течение 2 ч, 0,5 мл (0,61 г, 2,70 MMoflb) триметилсилилтрифторметансульфоната в 25 мл дихлорэтана кипятят 1" ч. Раствор упаривают, oc." 40 таток растворяют в 100 мл хлороформа и промывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (2х30 мл) и водой (2х20 мп). Хлороформный раствор cy"" шат безводным сульфатом натрия, упа- 45 ривают и хроматографируют на силика- геле I 40/100 (150. см ). Колонку элю" ируют смесью хлороформ - метанол с постепенным увеличением содержания метанола от 2 .до 10 об. ь. Фракции, содержащие нуклеозидный продукт, собирают и упаривают. Остаток кри" сталлизуют из этанола.

Получают 0,92 г (75,13) 1-(2,5"

-ди- О-бензоил-3-фтор-3-дезокси"р"D"

-рибофуранозил) цитозина (XIU), т.пл.

203"205 С, УФ"спектр (1g E), 3,„ < нм: 231 (4,69); 269 (4,13)

Йайдено,Ф; С 60,80; Н 4,40 N9,30

F 4,10 °

С kg e N gOgF

Вычислено,Ф: С 60,92, Н 4,44;

N 9,26; F 4,18.

tl р и м е р 14. 9-(3 -Фтор-3 -дезокси -р-D-рибофура нозил) адени н (I I ) .

Раст воряют 1, 1 г (1,89 ммол ь) соединения (XII) в 20 мп 0,3 И раствора метилата натрия в метаноле выдержио вают при 20 С 10 ч. Реакционную смесь нейтрализуют добавлением 0,34 мл ук-. сусной кислоты и упаривают досуха.

Остаток хроматографируют на ионообменной смоле Дауэкс lх8 (ОН -форма „

300 см ).Колонку элаируют сначала водой, затем смесью метанол - вода <4:1).

Фракции, содержащие нуклеозидный продукт, собирают и упаривают. Остаток кристаллизуют из этанола.

Получают 0,38 г (74,6В) 9 (3 фтор-3 -дезокси-p-D-рибофура нозил) аленина (1I), т.пл. 211-212 С

УФ-спектр (1gF) 1 м« ° нм: 260

{4,16) .

flHP (DNCO Й,), O, ч. HB млн: 8„37 и 8,15 (с., по 1Н, H-2 и Н-8); 7,40. (у c.»,2H, NHã) 5 96 (д 1Н Н l, 7э8 Гц) 5е92 (д ° lHю 2-0Н

1<, = 6,0 Гц), 5,78 (д,д., 1Н, 5 =ОН. 1ан,s = J оя,ь 6s0 Гц) i 5,10 (д д ° 1Н Н 3 Хз,т = 4э2 Гц J

= 54,6 Гц), 4,95 (м., 1Н, Н-2, Л = 7,8 Гц, Л, = 4,2 Гц, J> F

26,4 Гц); 4 31 (м., lH, Н-4,14

J4,,< 3,0 Гц, J g p- =27,6 Гц);

368 (м., 2H, H5, H5 ), Найдено,Ж: С 44,66, Н 4,52, N

2580; F 7 08.

С aH„ 1,0, Вычислено,Ж: С 44,61 Н 4,49;

N 26,01) F 7,05.

Пример 15, 9-(3 -фтор- 3 -де зокси -р «D-рибоф ура нозил ) г уа ни н (Ш) .

Растворяют 1,2 r {2,24 ммоль) соединения (XIII) в 50 мл насыщенного при 0 С раствора аммиака в метаноле, выдерживают 3 сут при 20 С и упаривают. Остаток растирают с 50 мл этанола, осадок отфильтровывают и кристаллизуют из воды.

Получают 0,.45 г (70,4Ж) 9-(3 -Фтор-3 -дезокси-p-D-рибофуранозил) гуанина (III), т.пл. 289-291 С (с разл.) .

УФ-спектр (186) ю ъ макс нм: 253 (4,14); 269 плечо (4,00).

39 12 меняли в концентрациях 5 10 и 5 °

«10 моль/л в.виде раствора.в 0,91ном растворе хлорида натрия. В контрольных опытах вместо растворов препарата в пробирки добавляли раствор хлорида натрия ° После инкубирования в течение 3 и 24 ч в каждом опыте подсчитывали общее количество клеток в 1 мл взвеси, содержание жизнеспособных клеток и отношение его к содержанию жизнеспособных клеток в контрольном опыте. Цифровые данные обрабатывали методом вариационной статистики.

Производное аденозина (II) проявляло четко выраженный эффект уже через 3 ч инкубации, содержание жизнеспособных клеток по отношению к контролю (контроль 1003) составляло 64,7 + 6,8 и 81,3 + 4«2Ф при концентрации препарата 5 10 и 5»

»10 M соответственно. Спустя 24 ч инкубации эффект подавления лейкозных клеток L-1210 наблюдался при действии всех фторсодержащих нуклеозидов.

Данные представлены в таблице.

Известный противолейкозный препарат - циклоцитидин (V) начинал проявлять цитостатический эффект только после 24 ч инкубации, а содержание погибших лей козных клеток составляло лишь 3,94 по отношению к контролю.

Представленные результаты свидетельствуют о том, что соединения (П)(IV) в сравнении с ци клоцитиди ном (IV) в сравнимой концентрации проявляют цитостатическое действие быстрее (через 3 и 24 ч, а эффективность их действия превосходит эффективность циклоцитидина в 22,,11 и 20 раз соответственно.

Таким образом, 2-сульфонильные производные метил 5-бензил-3-фтор-3-дезокси-01- и р-В-арабинофуранозы (Ia-в) синтезируются из доступных реагентов и могут служить полупродуктами при получении 3 -фтор-3 -дезоксирибонуклеозидов аденина, гуанина и цитозина, обладающих биологической активностью.

Формула и з о б р е т е н и я

2-О-Сульфонаты метил 5-О-бензил-3-фтор-3-дезокси-D-арабинозы формулы

11 15217

Спектр ПМР (DMCO-d ), d, ч.на млн:

7,91 (с., 1Н, H-8); 6,54 (с., 2Н, NH ), 5,88 (у. с., 1H, 5- -ОН); 5,75 (д., 1Н, Н-1, Л, ге= 8,4 Гц) 5,42 5 (у.с., 1Н, 2 -ОН); 5,04 (д,д., 1Н, НЗ,Юэ, = 4«8 Гц) .тэ, „54 ° 0 Гц)

4,75 (м., 1Н, Н-2, 7г, г= 8,4 Гц, J

J 4 yi = 3 ° 7 Гц, Jg я =27«6 Гц);

3«59 (д 1 2Н«Н-5 «Н-5")

Найдено,Ж: С 42,30, Н 4,17; N24,25;

F 6,56.

C „Н,, 1,0, Вычислено,Ф: С 42,101 Н 4,24, N

24,55; F 6,66.п р и м е р 16. 1-(3 -фтор-3 -дезокси-р-D-рибофуранозил)цитозин (IV) .

Растворяют 0,41 г (0,9 ммоль) сое- 20 динения (XIV) в 30 мл насыщенного о при 0 С раствора аммиака в метаноле, выдерживают в 2 сут и упаривают. Остаток растирают с 30 мп эфира, отфильтровывают и кристаллиэуют из эта- 25 нола.

Получают 0,18 г (8 1,23) 1-(3 -фтор"3 -дезокси-p-D-рибофуранозил) цитозина (IV), т.пл. 221-223 С.

УФ-спектр (1gE) . „ „,, нм: 270 30 (3,92) .

Спектр ПМР (DMCO-а,), д, ч. на млн:

7,73 (д., 1H, H-6, .,, = 7,2 Гц), 7,24; (У c °, 1Н,ИН)1 7,18 (у.с., 1Н, NH), 5,92 (д., 1Н, Н-1, J, 7,8 Гц)135

5,78 (д., 1Н, Н-5, Л g = 7,2 Гц);

4,92 (д,д, 1Н, Н-3, 3 э ю =4,8 Гц, з t: = 54э6 Гц); 4,25 (м,, 1Н, Н-?, "г, = 7,8 Гц, 3г э = 4,8 Гц«Л2 Г

= 24,0 Гц); 4,13 (м., 1Н, Н-4, Л р,ц)

Ю g1 3,6 Гц, Jq!,к = ?7«0 Гц);

3,55 (м., 2Н, Н-5, Н-5 ").

Найдено,ь: С 43,97; Н 4,88; N

17,01; F 7, 57..

С,й ÄÄN„O„F

Вычислено,4: С 44,08; Н 4,93;

N 17,13 F 7,74 °

Цитостатическую активность 9-(3-фт ор -3-де эокс и -p-D-рибофура ноз ил ) аденина (II), 9-(3-фтор-3-дезокси"р -D-рибофура нозил ) г уа ни íà (II I) и

1- (3-фтор-3-де зокси -Р-11-ри6офура нозил) цитоэина (IV) исследовали в системе in vitro при инкубировании суспендирова нной кул ьтуры асцитической лейкозной опухоли штамма лимфолейкоза L-1210. В каждом опыте использовали по 2 мл взвеси, содержащей

1 .10 лейкозныи клеток. Препарат при14

1521739 при R = СН SO>- -ОСН в (-поло3 3 женки, в качестве промежуточных продуктов

И в синтезе биологически активных 3

-фтор-3 -дезоксирибонуклеозидов.

r4e пди R = СН,С,Н,К0 - (n-) — 0СН, в 4- или р-положении

1 жизнеспособных клеток по отношению к контролю после инкубации в течение,ч

Концентрация, моль/л

Соеди нение

5 10«

5 ° 10

64,7 6,8

86,4

81,3+ 4,2

59,0

44,5

15,1

5 10

5 1.0

i1,4

31,8

20,3

5 10

5 10

79,3

88,7

22,7

4. 10-1

1,8 10

3,9

+ +1:2

96,1

3,9 ф

Эффективность определена как отношение Ф погибших клеток под действием фтор"производных соединений к ь погибших клеток под действием циклоцитидина.

Составитель Г. Коннова

Техред М.Ходанич Корректор Л. Патай

Редактор Л. Пчолинская

» ««» «»«

Заказ 6890/23 Тираж 338 Подпис ное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, W-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул. Гагарина, 101

95,5 2,3

95,5 .1,0

93,0+ 0,7

89,5 + 4,4

13,6+ 3,8

41,0 - 8,0

55,5+ 4,6

68,2 + 12,9

20,7+ 5,1

1t 3 0,5

90,1+ 1,0 погибших клеток по отношению к контролю через 24 ч инкуба ции

Эффекти в" ность действия через

24 ч инкубации