Способ получения антрациклиновых гликозидов
Изобретение касается антрациклиновых гликозидов, в частности соединений общей ф-лы: @ где R<SB POS="POST">1</SB>=H один из R<SB POS="POST">2</SB> и R<SB POS="POST">3</SB>=OH, другой NO<SB POS="POST">2</SB>, @ где K=-CH-CH<SB POS="POST">2</SB>-CH(NH<SB POS="POST">2</SB>)-CH(OH)--CH(CH<SB POS="POST">3</SB>)-O R<SB POS="POST">4</SB>=H,OH. ОНИ ОБЛАДАЮТ ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТЬЮ, ЧТО МОЖЕТ БЫТЬ ИСПОЛЬЗОВАНО В МЕДИЦИНЕ. ЦЕЛЬ - СОЗДАНИЕ НОВЫХ, БОЛЕЕ АКТИВНЫХ И МЕНЕЕ ТОКСИЧНЫХ ВЕЩЕСТВ УКАЗАННОГО КЛАССА. СИНТЕЗ ВЕДУТ РЕАКЦИЕЙ АГЛИКОНА (ВМЕСТО ГРУППЫ CH<SB POS="POST">2</SB>R<SB POS="POST">4</SB> в соединении ф-лы I находится метил) с I-хлор-N, 0-ди(трифторацетил)даунозамином в среде безводного CH<SB POS="POST">2</SB>CL<SB POS="POST">2</SB> в атмосфере азота при 15°С в присутствии трифторметансульфоната серебра. Затем удаляют защитную группу: CF<SB POS="POST">3</SB>-C(O)-O, обработкой метанолом в течение ночи при комнатной температуре, проводят отделение 7 (S), 9(S), N-трифторацетильного антрациклонового гликозида от 7 (R), 9(R)-антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем с элюированием смесью CH<SB POS="POST">2</SB>CL<SB POS="POST">2</SB>-CH<SB POS="POST">3</SB>C(O)OC<SB POS="POST">2</SB>H<SB POS="POST">5</SB>-CH<SB POS="POST">3</SB>C(O)OH (соотношение объемов 90:10:1). Далее удаляют с NH группу CH<SB POS="POST">3</SB>-C(O)-щелочным гидролизом с помощью 0,1 N NAOH. Выделяют целевой продукт в виде хлоргидрата путем обработки основания раствором HC1 в метаноле. При необходимости полученное соединение бромируют в положение 14 с последующей обработкой водным раствором формиата натрия, получением соединения ф-лы I с R<SB POS="POST">4</SB> = OH и выделением его в виде гидрохлорида. Новые соединения более активны, чем известный даунорубицин, в отношении асцитной лейкомии Р388 и рассеянной Грос-лейкомии. 5 табл.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК .Й ОЦЩр
"@ «ЧЕИИйН " / «С» 1» 1.1Д
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К flATEHTY
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР
1 (21 ) 4028510/23-04 (22) 13. 11. 86 (31 ) 852 8440 (32) 19 ° 11. 85 (33) СВ (46) 23. 03, 90. Бюл. Ф 1 1 (71) Фармиталиа Карло 3р6а С.п.А (IT) (72) Франческо Анд>;;елуччи, Naypo Гигли, Серджио (1енко и Фернандо Джулиани (IT) (53) 547, 455. 07 (088. 8) (56) Патен т СССР Ф 11 87724, кл. С 07 Н 15/24, 1983.
Патент СССР Р 1227117, кл. С 07 Н 15/24, 1982.
Патент Швейцарии Р 649559, кл. С 07 Н 15/252, 31.05.85. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЛ АНТРАЦИКЛИНОВЫХ
ГЛИКОЗИДОВ (57) Изобретение касае тся антрациклиновых гликозидов, в частности соедине н ий об ще и ф-лы: сн-сн-с — c(01 с-сг;с-cHg — с(---он)-ciao)-cHgRq и н < сн-cR c-c(o) — с — cR)c-cHI... Ок)-cH) где R, =Н; один из R, и В =ОН, другой N0 где К=-СН-СН -СН ИН -СН ОН --СН СН« -О; г «
R« =Н, ОН. Они обладают противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель — создание,новых, более активных и менее ток„„SU„„1553015 A 3 (51) 5 С 07 Н 15/24//А 61 К 31/70
2 сичных веще ств указ анно го класса. Синтез ведут реакцией агликона (вместо группы СНгR« в соединении ф-лы I находится метил) с 1-.«лор- N,О-ди(трифторацетил)даунозамином в среде безводного СН С1г н атмосфере азота при
15 С н присутствии трифторметансульфоната серебра. Затем удаляют защитную группу: CF -С(0)-О, обработкой метанолом н течение ночи при комнатной температуре,проводят отделение 7 (S), 9 (S), N-трифторацетильного антрациклононого гликозида от 7 (R), 9 (R)— антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем с элюиронан ием сме сью СН «Сl — СН С (0) ОС Н -СНзС(0)ОН (с отношение объемов 90:10:
: 1) . Далее удаляют с NH-группу СН
-С(О)- щелочным гидролизом с помощью
О, 1 н. NaOH. Выделяют целевой продукт н виде хлоргидрата путем обработки основания раствором НС1 н метаноле.
При необходимости полученное соединение бромируют в положение 14 с последующей обработкой водным раствором формиата натрия, получением соединения ф-лы I с К =ОН и выделением его н виде гидрохло рида. Новые соединения более активны, чем известный даунорубиции, в отношении асцитной лейкомии
РЗ88 и рассеянной Гросс-лейкемии.
5 табл.
1553()15
Изобретение относится к способу получения новых производных антрациклиновых глико эндов общей формулы 3 5
СН2РФ
З1 О 32 О сн
НО NH
< где R — водород, один из
Б и Кз — гидроксильная группа; а другой из В и К вЂ” нитрогруппа;
Š— водород или гидроксильная группа, обладающих противоопухолевой активностью, >
25
Цель изобретения — получение новых антрациклиновых гликозидов, обладающих бо пьше и противов ирусн ой активПример 1. Получение (+)4-деметокси-6-деокси-6-нитродауномицинона
3S (соединен ие 5 ) .
a) Получение 4-цеметокси-6-деокси7,9, 11-триаце тип — дауномицинона (промежуточного соединения 2) .
4 чеметокси- 6-деокси-дауномицинон 40 (соединение 1), (1,7 r 4,8 ммоль) нагревают при 90 С при пе ремешивании вме с те с ук сусным ан гидридом (25 мл) и пиридином (25 мп) . После 2-часового нагревания ре акционн ую сме сь выливают в смесь льда с водой и оставляют стоять в течение 30 с при перемешиван ии. Тле рдое веще ство отфильтровывают, промывают водои и кристалпизуют из ме— танола, получая названное соединение
2 (выход 2, 1 9 r (94>! ), т. пл. 225226 С).
ИК (KBZ), см : 1770 (ароматический сложный эфир), 1740 (алифатический сложный эфир), 1720 (апифагический кетон), 1675 (ароматический кетон), 1590 (Ar).
УФ (1еОН), х, нм: 210,258,334.
Масс-спек т роме трия гысок о го разрешен ия: m/Z 478 (100, l! ) . ностьн, чем структурные аналоги — до- . ксор бицин и даунопицин, и меньшей 30 токсичностью путем синтеза укаэанных соединений °
IL1P (200 М1ц, (.n(.1 ); д,11 и 2,01 (син гпеты, 6Н, ОСОСНЗ ), 2, 22 (син гле т, 3Н, СОСН,), 2,52 (сингиет, ЗН, Ar
ОСОСН ), 2,4-3, 3 (мупьтинпет, 4Н), 6,17 (расширенный пик, 1Н, 7-Н), 7,78,25 (мупьтиппе т, 5ll ) .
) Получен иe 4-деме ток<-и-6-деокси 7,9-диацети.t-äàóttîìèöèttîttà (coen .. Полученное соединение 2 (2, 1 г 4,5 ммопь) растворяют в метаноле (220 мл) и метилене (110 мл) . Раствор 1 и. морфолина в метаноле (18 мл, 4 эквивалента) добагпяют и рас.вор оставляют стоять при 40 С н течение о. 5 и. IIo спе нейтрализации водным 1 и. раствором НС1 растворитепь удаляют под вакуумом и остаток кристаппизуют иэ метанола, получая наэваннное сое„ шение 3 (выход 1,7 г (90Х), т. пч. 265 С с разложением). ИК (КВг), см : 3440 (фенольный 0H); 1745, 1720, 1670 (нехелатированный хинон), 1630 (х<патиронанный хинон), 1590. I1acc-спектрометрия высокого разрешен ия: m/Z 436 (11 ) . УФ и видимый сп< ктры и< г по«гения (МеОН), х „„, «и . 20> 22< 258 336 386,404. IMP (200 МГц, CI)(1 ): d 2,09 и 2,04 (син гле ты, 6Н, ОСО:;."Н ), 2, 25 (син гле т, ЗН, COCH ), 2,54 3-40 (мультиппет, 4Н), 6,19 (двойной дублет, J=3,1 и 5, 6 Гц, 1Н, 7-Н ), 7, 77-8, 35 (му
n) Получен ие 4-деме ток си-6-деок си6-н итро-7, 9-диаце тип-даун оминцинона (промежуточное соедгв<ение 4) . К смеси полученног о соединения 3 (1,6 г, 3,66 ммоль), >Л(4NO, (1,6 г, 20 ммоль) и (CF (:0? q 0 (18 Më) добавляют безводный СН С1 (300 мл) в атмосфере азота и при эне ргичном неремешивании при комнатной температуре. По истечении 90 с добавляют метанол (3 л), получая желтый осадок, которьггг отфильтровывают, промывают <.веже перегнанным метанолом и эти говым эфиром, После высушивания получают названное соединение 4 (выход i, 2 3 г (70i. ), т. пл. 263-264 C) . ИК (KBt ), см : 34 it, 1745, 1720, 1675, 1635, 1585, 1540 (Ar — 110 ) . Масс-спектрометрия ны< окого раз— решения: m/Z 481 (".1 ) . УФ и видимый спек г ры (М< ОН), х нм: 21 6, 260, 338, 400. 5 1553(ПМР (200 МГц, (РС! э) 2 «04 и 2 00 (син глеты, 6Н, ОСОСН ), 2,24 (синглет 3Н, СОСН э),,43-3,51 (мультиплет, 4Н), 6,22 (двойной дублет, =2,3 и 5,4 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8,4 (мультиплет 4Н), 13,59 (синглет, 1Н, 11-OH ) . Получе ни ое вьппе на стадии Ь соединение 4 (1,1 г, 2 3 ммопь) растноряют в ТГФ (220 мл). К раствору добавляют 0,1 н. NaOH (220 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота и при перемешивании. После 1 ч растнор доводят до рН 15 примерно 7 с помощью 1 и. раствора НС1 и растворитель удаляют под вакуумом. Остаток растворяют с помощью СН С1з, раствор промывают водой до тех пор, пока смесь не нейтрализуется,yp высушивают над Nà SO и растноритель выпаривают. После хроматографиронания на силикагеле получают названный продукт реакции — соединение 5 (выход 0,77 г (90%), т.пл, 233-234 С с раэ- 25 ложением) . ИК (KBr), см- : 3570, 3470, 1710, 1680, 1630, 1585, 1535. Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 398 (МН+) «397 (М ) . УФ и нидимый спектры (МеОН), х нм: 216, 260, 341, 384, 401. ПМР (200 МГц, CDC1 ); d 2,23-3,22 (мультиплет, 4Н), 2,41 (синглет, ЗН, СОСН э), 4,02 (дублет, J=8,4 Гц, 1Н, 7-0Н), 4«67 (сии глет, 1Н 9-OH), 5,02 (три дублета, J=2 3,4,3 и 8,4 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8, 4 (мультиплет, 4Н), 13,51 (сии глет, 1Н, 11-ОН) . Пример 2. Получение 4-деметок40 си-1 1-дезокси-11-нитродауномицинона (соединение 10) . е) Получение 4-деметокси-6,7,9триаце тил-1 1-деок сидауном ицин она (промежуточного соединения 7). 4-Деме ток с и-11 тде ок си-дауномицинон (соединение 6) . (О, 7 г, 2 ммоль) перемешивают вместе с уксусным ангидридом (10 мл) и пиридином (10 мл) при комнатной температуре, Спустя 24 ч реакционную смесь обрабатывают так « как описано в примере 1а, получая названное выше соединение 7 (выход 0,88 r (93%), т.пл. 220-222 С). ИК (KBr), см : 1780, 1730, 1720, 1675, 1590. УФ (МеОН), х, нм: 210 258 334. мыкс 15 6 Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 479 (МН ), 478 (М ) . ПМР (200 МГц, СРС1«, Т=40 С): d 2,03 (сии глет, 6Н, ОСОСН> ), 2,23 (сии гле т, ЗН, СОСН «) «2, 44 (сии глет, ЗН, Ar — ОСОСН ), 2,44 — 3, 39 (мультиплет, 4Н ), 6,46 (уширенный пик, 1Н, 7-Н ), 7, 75-8, .3 (мультипле т, 5H) . 6) Г!олучен ие 4-деме ток с и-7, 9-диаце т ил-11-де ок с и-даун ом иц ин она (промежуточного соединения 8) . Полученное соединение 7 (0,83 г, 1,74 ммоль) обрабатывают способом, описанным н примере 1б, получая названное соединение 8 (выход 0,67 г (881 1, т. пл. 244 С), ИК (KBr), см : 3430, 1730, 1665, 1640, 1590. УФ и видимый спектры (МеОН), Л нм: 208, 226, 254, 334, 384, 400. Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 436 (Г1 ). ГГМР (200 МГц, CDC1. ): сР 2,04 (синглет, 6Н, ОСОСН ), 2,24 (синглет, ЗН, СОСН э ), 2, 40-3, 30 (муль тилле т, 4Н), 6,47 (двойной дублет, J=2,0 и 5,5 Гц, 1Н, 7-Н), 7,8-8,3 (мультиплет, 5Н), 13 06 (синглет, 1Н, 6-OH). p,) . Получение 4-деметокси-7, 9-диаце т ил-1 1-де ок си-1 1 -н итродаун омицин она (промежуточного соединения 9) . Полученное соединение 8 (0,62 Г« 1,42 ммоль) обрабатывают с МН ИО« (0,57 r«7,1 ммоль), (СР СО) 0 (4мл) в безводном СН CI (90 мл) . Используя ме тодику, идентичную примеру 1б, получают соединение 9, (ныход 0,5 г (73Х), т. пл. 272-274 С с разложением). ИК (КВг), см ": 3450, 1740, 1710, 1680, 1635, 1590, 1545 (Ar — NO<). УФ и видимый спектры (MeOH)« нм: 208, 254, 334, 400. Масс-спектрометрня высокого разрешен ия: m/Z 481 (М ) . ПМР (200 МГц, СРС э): d 206 и 2,04 (синглет, 6Н, ОСОСН э), 2,2 (синглет, ЗН, СОСН ), 2,42-3,03 (мультиплет, 4Н), 6,50 (двойной дублет, J 1,7 и 5,5 Ри,, !Н, 7-Н), 7,8-8,4 (мультиплет, 4Н), 13,50 (синглет, 1Н, 6-ОН). Полученное на стадии Ь соединение 9 (0,45 г, 0,94 ммоль) обрабатывают 0,1 н. раствором NaOH так, как это описано в примере 1 ь, получая продукт реакции — названное выше сое1553015 динеиие 10 (выход 0,34 г (912), т.пл. 231-233 С). ИК (KBr), см : 3550, 1710, 1675, 1630, 1540. УФ и видимый спектры (МеОН), нм: 210, 214, 218, 250, 326, 336, 400. Иасс-спектрометрия высокого разрешения: m/l. 397 (И ). Вычислено для С, Н,р)0 397,(798, найдено 397,0808, ПИР (200 ИГц, CDC13): (Р 2,18-3,1 (мультиплет, 4Н); 2, 38 (син глет, ЗН, СОСНз), 3,85 (дублет, J=6,2 Гц, 1Н, 7-ОН), 4,55 (сии глет, 1Н, 9-ОН), 5,36 (три дублета), J=1,8, 4,8 и 6,2 Гц, 1Н, 7Н ), 7, 8-8, 4 (мультипле т, 4Н), 13 7 (син глет, 1Н, 6-ОН) . Пример 3. Получение 4-деме20 токси-6-дезокси-6-нитро-N-трифторацетил-даунорубицина (соединение 11), К охлажденному раствору (15 С) рацем иче ско го 4-деме то кси-6-де зок си6-нитродауномицинона 5 (0,7 г, 25 1,76 ммоль) в безводном хлористом метилене (140 мл) одновременно и быстро добавляют при энергичном перемешивании и пропускании азота 1-хлор, N,Оди-(трифторацетил)-даунозамин (1,88 г, 30 5,28 ммоль) в безводном CH C1 (40 мл) и трифто рме тан суль фон ат се ре бра (1,4 г, 5, 28 ммоль) в безводном этиловом эфире (40 мл) . После 20 с добавляют насыщенный водный раствор NaHCO> (100 мл) и смесь оставляют стоять при перемешивании в течение 10 с. Смесь фильтруют через цеолит, органический слой отделяют, промывают водой, высушивают над Иа)$0 и раство-40 ритель удаляют под вакуумом. Желтое вещество растворяют в ЖОН (300 мл) и оставляют стоять в течение ночи при комнатной температуре, чтобы удалить О-трифторацетильную группу. 45 Остаток, получающийся при выпаривании растворителя, хроматографируют на силикггеле гчоирующей системой: СН, С1. -EtOAC-СН, COOH (90:10: 1) v/v) получая с1-гликозиды 7(S): 9(S) с выходом 0,43 r (397.) и 7 (К): 9(R) с выходом О, 43 r (397) Для 7 (S) 9(Б): Т. пл. 245-246 С. ИК (КВг), см : 34703450, 1720, 1700 (N-трифторацетил), 1680,1635, 55 1590, 15 35. Mace-спектрометрия высокого разрешения: m/i . t 23 (ИН -) . УФ и видимый спектры (1!О ОН ), р..„„им: 208,260,341,384,401. (, j в=+337 (с=О,()5541 в ИеОН). К;((11еОН): 2) f 226 им=+19, 31, a p 270 им=-9.,94, 4p 292 нм=+5,67, d< 34() им=+7,68. ПИР (200 МГц, С()С1,): 1,24 (дублет, J=6,8 Гц, ЗИ, 5 — СИ „); 1,82 (тройной дублет, J=4,1; 12,4 12,4 Гц, 1Н, 2 акс — И), 1,94 (дуб— лет, J=8,2 Гц, 1Н, 4 — ОН), 1,95 (двойной дублет, J=5,0 и 12,4 Гц, 1Н, 2 экв — Н), 2, 15 (двоииой дублет, J=4, 3 и 15, 1 Гц, 1Н, 8 акв-Н), 2,34 (син гле т, ЗН, СОСИ q), 2, 48 (тройной дублет, .)=1 8; 2 3 и 15 1 Гц, 1Н, 8 экв Н), 3,10 (дублет, 1=187 Гц, 1Н, 10 акс-Н), 3,27 (двойной дублет, J= =1,8 и 18,7 Гц, 1Н, 10 экв Н), 3,65 (двойной дублет, J=2 7 и 8,2 Гц, 1Н, 4 -Н), 4, 1-4, 3 (мультиплет, 1Н, 3 -kl), 4, 30 (квартет, J=6,8 Гц, 1Н, 5 -Н), 5,00 (дублет, J=4 1 Гц, 1Н, 1 -Н), 5,11 (двойной дублет, J=2,3 и 4,3 Гц, 1Н, 7-Н), 6,61 (дублет, J=8 O Гц, 1Н, NHCOCF>), 7,8-7,9 (мультиплет, 2Н, 3H), 8 2-8 4 () ультиплет, 2Н, 1-Н, 4-Н), 1 3,55 (сии глет, 1Н, 11-ОН) . Для 7 (R) 9 (R) Т.пл, 145-146 С. Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 623/10, (ИН ), 579(100). КД (ИеОН): d 226 нм=-10,9, 2) 271 нм =+7,26, ЛЕ 292 нм =-0,27, 2)> 300 нм=+0,56, 2(< 340 нм =-5,1, fd 7 =-293 (c=0,0635 и Ие()И) . IlNP (200 МГц, CDC1 ): J 5,14 (триплет, 7=3,0 Гц, 1Н, 7-Н), 5,27 (мультиплет, 1Н, 1-Н) . Пример 4. Получение хлоргидрата 4-деметокси-6-дезокси-6-нитродаунорубицина (соединение 12). 4-Деметокси-6-дезокси-6-нитро-Nтрифторацетил-даунорубицин (0,130 г, 0,2 ммоль) растворяют в ацетоне (6 мл). При О С в атмосфере азота и перемешивании добавляют 0,1 н. раствора NaOH (60 мл). После 2 ч ацетон удаляют под вакуумом и рИ доводят до 4,5 с помощью 0,1 н. НС1. Водный раствор экстрагируют с помОщью СН С1< дОводят рН дО примернО 6,5-7,0 с помощью 0,1 в. NaOH и экстрагируют с помощью СН,С1 . Органический слой промывают водой, высушивают над Иа 80„и раст> оритель выпаривают. Остаток раств 1ряют в МеОН (5 мл), подкисляют ве » .)ькими капляг 155 10 ми раствора НС1 в МеОН и при добавлении диэтилового эфира и н-гексана выпадает в осадок хлоргидрат. Твердое вещество фильтруют, промывают лиэтиловым эфиром до нейтрализации среды и высушивают, чтобы получить названное соединение 12 (выход 0,080 г (687), т.пл. 173 С с разложением). ИК (КВг), см : 3400,1710,1675, 1630,1590,1540. Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 527 (MH ), Пример 5. Получение 4-деметокси-!1-дезокси-11-нитро-N-трифгораце! 5 тил-даунорубицина (соединение 13) . Рацемический аглюкон 11 (0,290 г, 0,73 ммоль) превращают в соответствующий гликозид, как это описано в примере 3, Названный продукт реакции 20 (7 (S): 9(S) )с выходом 0,1 г (247) и его диастереомер (7(R): 9(R)7 с выходом О, 1 г (247.) получают после хроматографиче ского разделения. Для 7 ($): 9(S): Т, пл. 237-240 С с разложением. ИК (KBr), см : 3500,3400, 1720, 1675, 1640, 1540. Масс-спектрометрия высокого разрешения: m/Z 579Г! -СООН ). УФ и видимый спектры (МеОН), Л„„,: 207,259,335,400. КД (МеОН): д 221 им=+11,1, i!@250 им=+4,0, Л 289 нм=-5,1, Ь 330 нм=+3,1, h 400 нм=+1,0. Lg3 =+22 (c=0,0623 в MeOH). ПМР (200 Г1Гц, CDC1 3): о 1,30 (дублет, J 6 5 Гц, ЗН, 5, -СН 3), 1,86 (тройной дублет, J=4,0; 13,0 и 13,0 Гц, 1Н, 2 акс-Н), 2,03 (двойной дублет, J=44 и 13,0 Гц, 1Н, 2 I 40 экв-Н), 2,13 (двойной дублет, 1=4,3 и 14,9 Гц, 1Н, 8 акс-H), 2,36 (три дублета, J=1,6, 2,2 и 14,9 Гц, 1Н, 8 экв -Н), 2,37 (синглет, ЗН, СОСНз), 2,89 (двойной дублет, 3=1,6 и18,2 Гц, 45 1Н, 10 . экв — Н), 3, 12 (дублет, J-= =18,2 Гц, !Н, 10 акс — Н), 3,68 (двойной дублет, J=3 0 и 8,0 Гц, iH, 4 -Н), 4,15-4,30 (мультиплет, 1Н, 3 -Н), 4, 25 (квартет, J=6,5 Гц, 1Н, 5 --Н, син гле т, 1Н, 9-OH) 5, 30 (двойной дублет, J=2 2 и 4,3 Гц, 1Н, 7-Н), 5,47 (дублет, J=4,5 Гц, 1Н, 1 -Н), 6 70 (дублет, 1 =8 О Гц, 1Н, NHCOCF з), 7,8-7, 9 (мультипле т, 2Н, 2-Н, З-Н), 55 8, 2-8, 4 (мультипле т, 2Н, 1-Н, 4-Н), 13,72 (синглет, 1Н, 6-ОН). Для 7 (R) 9 (R) 1 5 Г!зсс-c»eктpoметрия высокого разре-, шения: m/Z 579 (100, М -СОСН3). IlMP (200 МГц, CDC1 з): S 5,35 (мульI типлет, 1Н, 1 -Н), 5,59 (двойной дублет, J=2,0 и 3,5 Гц, 1Н, 7-Н). Пример 6. Получение хлоргидрата 4-деметокси-11-дезокси-11-нитродаунорубицина (соединение 14) . Соединение, полученное по примеру 5 (0,090 г, 0,145 ммоль), обрабатывают так, как это описано в примере 4, получая названное соединение 14 (выход 0,061 г (75X) т. пл. 212 С с разложен ием) . ИК (КВг), см :3400,2900,1710, 1670, 1635, 1590, 1540. Масс-спектроме трия высокого разрешения: m/Z 527 (МН ). УФ и видимый спектры (Г1еОН), нм: 208, 222, 256, 402 ° Пример 7. 4-Деметокси-6-деокси-6-нитро-доксорубицин (соединение 15) . 4-Деме ток си-6-деок си-6-нитро-даунорубицин гидрохлорид из примера 4 (0,86 г, 1,52 ммоль) растворяют в 50 мл метанола и 50 мл диоксана. К перемешиваемому раствору добавляют триэтилортофтормиата (1,5 мл) и О, 92 мл раствора брома в хлористом метипене (30 мас.7 объема). После выдержинания в течение 4 ч при комнатной температуре раствор выливают в смесь диэтилового эфира (300 мл) и н-гексана (500 мл) и осажденный 4-деметокси-6-деокси-6-нитро13-диэтилкеталь-14-бром-даунорубицин собирают и промывают эфиром. Твердый материал растворяют в 120 мл 0,25 н. бромистоводородной кислоты и 120 мл ацетона. После выдерживания в течение 16 ч при комнатной температуре добавляют 4,8 г формиата натрия, растворенного в 50 мл воды, и спустя 24 ч при 50 С раствор обрабатывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия до щелочного рН среды. При встряхивании с хлористым метиленом реакционная смесь дает красноватый осадок 4-деметокси-6-деокси6-нитро-14-броми-даунорубицина, который отфильтровывают и промывают водой, Маточный раствор экстрагируют несколько раз хлористым метиленом, и растворитель удаляют в вакууме, получая вторую порцию неочищенного продукта. 40 Твердый материал растворяют в 25 мл 0,25 н. бромистоводородной кислоты и 25 мл ацетона и выдерживают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют 1,5 г (формиата натрия растворенного в 15 мл воды и % о температуру повышают до 50 С в течение 24 ч.!! 15530 Эти две порции объединяют и растворяют н метаноле, содержащем 10Х уксусной кислоты, 20 г силикагеля, добавляют в этот раствор и растворитель осторожно удаляют в вакууме. Твердый материал загружают на верх колонки (5x30), приготовленной из силикагеля и хлористого метилена, атем элюируют смесью (80: 10 об/об) хло рис тый ме тиле н — 95 X.-ный этиловый спирт. Чистые фракции собирают, и ра ство рите ль удаляют в вакууме . Остаток растворяют в метаноле, охлаждают при 0 С, подкисляют 0,5 н. раствором НС1 в метаноле до значения рН около 3, При добавлении диэтилового эфира образуется желтый осадок, который отфильтровывают и промывают эфиром. После высушивания в вакууме получают 0,45 г (суммарный выход 51X) гидрохлорида 4-деметокси-6-деокси-6-нитродоксорубицина. ИК-спектр (KBr) см : 3400, 1710, 25 <4 675, 1630, 1590, 1540. ФД-масс-спектр: м/е543 (МН+). УФ видимый спектр (MeOH) нм: 208,260,341,384,401. Кг (пластина с кизельгелем F 254 "Мерк": дихлорметан/метанол/уксусная кислота/вада 80: 20: 7: 3)=0,37. Пример 8. 4-Деметокси-11-деокси-1 1-н итро-док сорубицин (соединение 16) . 4-Деме ток си-1 1-деок си-1 1-н итродаун орубиц гидрохлорид из Примера 6 (0,35 г 0,62 ммоль) растворяют в 15 мл метанола и 15 мл диоксана. К перемешиваемому раствору добавляют 0,5 мл триэтилортоформиата и 0,34 мл раствора брома в хлористом метилене (30 мас.7.) . Спустя 4 ч реакционную смесь выливают в смесь из 150 мл диэтилового эфира и 300 мл н-гексана, образовавшийся осадок 4-деметокси-11-деокси1 1-нитро-13-диэтилке таль-14-бромдаунорубицина отфильтровывают и промывают эфиром. 15 !2 Добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия до щелочной среды и смесь экстрагируют хлористъгм метиленом. Органический слой сушат над сульфатом натрия и растворитель 4-деметокси11-деокси-11-нитро-14-бромо-даунорубицина удаляют в вакууме, Неочигц нный материал очищают на хроматографической колонке с кизельгелем, которую злюируют смесью хлористый метилен/ /метанол/уксусная кислота 160:20:8. Чистые фракции собирают, промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой до нейтральности, затем продукт экстрагируют, промывая его раствором воды и 0,1 н. соляной кислоты при рН около 3, Водный раствор подвергают лиофильной сушке, получая 0,17 г (общий выход 477.) гидрохлорида-4-деметокси11-деокси-11-нитро-доксорубицина. ИК-спектр (КВг), см : 3400,2900, 1710,1670,1635,1590,1540. ФД масс-спектр: м/е543 (МН ) . УФ и видимый спектр (МеОН), Л,„,„„,: нм: 208, 2? 2, 256, 402. R1 (пластина с кизельгелем F 254 Ме рк": хло рис тый мет иле н /ме тан ол/ /уксусная кислота/вода 80:20:7:3)= =0,407. Биологическая активность соединений по примерам 6 и 4. Соединения испытывали по сравнению с даунорубицином (ДНР) против клеток Не1а u P 388 ин витро. Соединения испытывают путем растворения их в виде хлоргидратов в воде ° Ин виво действие соединения против Р 388 асцитной лейкемии представлено в табл. 1. Активность указанных соединений испытывают проч ив диссеминированной (распространенной) лейкемии Кросса. Результаты представлены в табл. 2. В этой системе два новых соединения при максимальной испытанной дозе (22,5 мг/кг и 50 мк/кг для соединений по пргакерам 6 и 4 соответственно) были более активными, чем ДНР при максимальной переносимой дозе (10 мг/кг). Данные по токсичности, приведенные в табл. 5, для соединения 15 (пример 7) относительно лейкемии Гросса являются исключительно благоприятными. Никакой гибели от токсичности при дозировке 29,6 мг/кг по сравнению с 4/10 факта14 15 3015 ми гибели о! токсичности исходного лекарства локсорубицина при дозировке 16,9 мг/кг Т/С=200% лля обоих лекарств. r> Следует также отметить более высокую активно сть сое дине ния 1 6 (пример 8) относительно рассеянной Гросслейкемии: 275/233 при использовании почти эквивалентных доз испытуемого соединения и контрольного лекарства. н с Cl (tran) сн (0 R (zv) СН2Р4 20 сос г, где R,,К,!,Р з имеют указанные значения, затем удаляют защитную 0-трифтор-ацетильную группу взаимодействием с мета-. нолом в течение: ночи при комнатной температуре, отделяют 7 (S), 9(8) трифтораце тильный ан трациклин овый гликозид от 7 (R), 9(R) антрациклинового гликозида хроматографией на колонке с силикагелем, элюируя смесью метилендихлорид — этилаце тат — уксусная кислота в соотношении 90:10:1 (v /v ), удаляю т N-т рифтораце т ильи ую защитную группу из полученного 7 (S) 9(S) антрациклинового гликозида средним щелочным гидролизом 0,1 н. гидроокисью натрия с выделением целевого продукта формулы (1 ), где R — водород, в виде его гидрохлорида путем взаимодействия свободного основания 40 с метанольным раствором хлористого водорода и в случае необходимости бромируют полученное соединение в 14 — положении с последующеД обработкой полученного таким образом 14-бром45 производного водным раствором формиата натрия) с получением целевого продукта формулы (1), где R < — гидроксильная группа, и выделением его в виде его гидрохлорида. З! 0 >2 0 сн, НС1 НО где R< - водород; О В 0 сн Фо рм ула из об ре те и ия Способ получения антрациклиновых гликоз илов общей формулы один из R и  — гидроксильная группа, а другой из R и  — нитрогруппа; R — водород или гидроксильная группа, отличающийся тем, что агликон общей формуль! где R R u R имеют указанные зна! 2 Э чения, подвергают конденсации с 1-хлор-N,Îди (трифтораце тил) -даун оз амином формулы сг,(со СОСГ, в безводном хлористом метилепе в атмосфере азота при 1 С в присутствии трифторметансульфоната серебра с по— лучением диастереомерной смеси 7(S), 9 (S ) и 7 (R), 9 (R) антрациклиновых гликозидов формулы 1553015 Т а б л и ц а 1 Действие против асцитной лейкемии Р 388* Соединение Доза**, Т/С***,% мг/кг Ток сиче ск ая сме рть**** ДНР *Опыты были осуществлены на мышах вида СДГ, зараженных 10 клетками лейкемии внутрибрюшинно. *Лечение внутрибрюшинно один раз в день после опухолевого инокулята. **АСреднее время выживания вылечиваемых мышей/среднее время выживания контрольных мышей х100. ****Оценивается на основе аутоптических з аключений. Таблиц а2 Действие против лейкемии Гросса* i Ток сиче ская смерть**** Т/С,***X Соединение Доза**, мг/кг ДНГ 12 *Опыты были осуществлены на мышах вида СЗН, зараженных 2х10 клетками лейкемии внутривенно. **Ле чение внутривенно один раз в день после инокулирования опухоли. ***Средняя продолжительность выживания вылечиваемых мышей/средняя продолжительность выживан ия кон т роль ных мыше и x1 00. ****Оценивается на основе аутоптических (путем вскрытия трупа) заключений. 2,9 6 13,5 22,5 1 5 ) 157 132 162 171 124 158, 150 175,225 208 1/10 5/10 О/10 О/10 1/10 9/10 О/20 3/20 О/10 0/10 О/10 О/10 О/10 1553015 Т а б л и ц а 3 Активность против клеток Йе 1а и 10 н, вне организма Сс единение Ц i, к г/мл ДХ ДХ *Испытание ингибирования колонии проводили после 24 ч обработки ИД „— доза, вызывающая 50Х-ное ив гибироваТаблица4 Активность в организме против асцитичпой Р 388 и рассеянной Гросс-лейкемии P 288* росс** Соединен ие Т/С+*",У. Такси .еская i смерть** ** Т/С***, 7 Ток сиче сДоза, мг/кг оза, г/к г кая сме рть**** ДХ *Р 388 — лейкемия инокулирована внутрибрюшипно в день О. Обработка внтрибрюшинно в 1-й день. **Гросс-лейкемию инокулировали внутривенно в день О. Обработка — внутривенно в 1-й день. ***Отношение среднего времени выживания обработанных мышей к среднему времени выживания контрольных животных х100. ****Оценена на основании данных вскрытия. 4,4 б,б Ь,Ь 182 209 391 223 209 О/1(0/10 О/10 0/10 О/10 9/10 Hela* 19 18 10 v * 36 220 16,9 17,3 22,5 29,25 183 О/10 225 О/iО 233 О/10 275 О/!О 308 1/10 i 17 9/10 1553015 Та 6 лиц а 5 Активность в организме против Гросс-лейкемии и С Н рака молочной железы Молочная железа (под кожей) "* Гросс* Сое дин е н не Т/С»»", 7 Токсичес- Доза, кая мг/кг смерть*** Доза, мг/кг Ин гибирояанне ро с та on - хо ли, 7 6,0 7,5 100 ДХ 96 100 8,88 11,54 *Гросс-лейкемию инокулировали внутривенно в день О. Обработка— внутривенно в 1-й день. **Обработка внутривенно, количество 7dx4, начиная с момента, когда опухоль прощупывается пальцами. ***Отношение среднего времени выживания обработанных мышей к среднему времени выживания контрольных животных х100 ****Оценена на основании данных. Составитель Г.Коннова Редактор Н.Рогулич Техред Л.Олийнык Корректор Н.Ревская Заказ 343 Тираж 302 Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж 35, Раушская наб., д. 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", r.ужгород, ул. Гагарина,101 13 16,9 29,6 38,5 158 242 142 О/10 О/10 4/20 О/10 О/10 О/10
