Способ получения l-фенилаланина
Изобретение относится к природным аминокислотам, в частности к получению L-фенилаланина, может быть использовано в химии пептидов. Цель - упрощение процесса. Синтез ведут расщеплением основания Шиффа этилового эфира-фенилаланина с бензальдегидом α-химотрипсином в двухфазной системе хлороформ-вода при их объемном соотношении 1:(3-10) соответственно. Выход 91-94%, оптическая чистота 96-97%. Упрощение процесса достигается за счет использования более доступного этилового эфира глицина вместо предварительно получаемого этилового эфира фенилаланина при исключении операций подщелачивания и подкисления реакционной смеси для выделения целевого продукта и упрощении стадии рацемизации побочного производного D-фенилаланина.
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
<еб аи 1
А1 (Sl)S С 12 Р 13/22
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4601487/23-04 (22) 10 ° 10.88 (46) 07.08.90, Бюл. М 29 (71) Институт элементоорганических соединений им.А.H.ÍåñìåÿíoBà и Научно-исследовательский технологический институт аминокислот (72) К.А.Кочетков, H.Ñ.Гарбалинская, Ю.Н.Белоконь, И.Б.Сапоровская, В.М.Беликов, А.C.,Ñàãèÿí и Э.М.Акопян (53) 547.233 ° 07 (088,8) (56) Патент ФРГ М 3438189А1, кл. С 07 С 101/08, опублик. 1986, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Ь-ФЕНИЛАЛАНИНА (57) Изобретение относится к природным аминокислотам, в частности к получению Ь-фенилаланина, может быть
Изобретение относится к усовершенствованному способу получения L-фенилаланина, являющегося незаменимой -аминокислотой в биосинтезе белка . и используемого в пептидном синтезе.
Цель изобретения - упрощение про.цесса.
Пример 1. В плоскодонную колбу на 50 мл загружают 1 г этилового эфира основания Шиффа фенилаланина с бензальдегидом в 3 мл СНС1> и раствор -0,03 г о1-химотрипсина в 15 мл воды и перемешивают на магнитной мешалке при 20 С 7 ч. Водный слой экстрагируют трижды хлороформом, добавляют 10 мл 54-ного раствора трихлоруксусной кислоты для отделения белка, фильтруют, упаривают до небольшого раствора и очищак1т от
2 использовано в химии пептидов. Цельупрощение процесса. Синтез ведут рас- щеплением основания Шиффа этилового эф :;-а фенилаланина с бензальдегидом х-химотрипсином в двухфазной системе хлороформ-вода при их объемном соотношении 1:(3-10) соответственно."Выход 91-943, оптическая чистота 9697 . Упрощение процесса достигается . за счет использования более доступного этилового эфира глицина вместо преаварительно получаемого этилового эфира фенилаланина при исключении операций подщелачивания и подкисления реакционной смеси для выделения целевого продукта и упрощении стадии рацемизации побочного производного
D-фенилаланина. солей на ионообменной смоле КУ-2 (в
Н -форме). Аминокислоту элюируют аммиаком. После упаривания элюата получают 0,16 г целевого продукта (94ь от теории), с ) = +30(С=2 в
<0
Н О ). .Литературные данные fd) > =
= +31(С=2 в Н О). По данным энантиомерного анализа оптическая чистота полученного L-Phe 964. В хлороформном слое остается основание Шиффа эфира Д-Phe, которое легко рацемизируется под действием оснований известным способом и может быть вновь введено в цикл.
П р и и е р 2. 1 г основания Шиффа .эфира фенилаланина в 3 мл СНС1, 0,03 г о(-химотрипсина в 9 мл Н О пео
2 ремешивают при 20 С в течение 7 ч. ,Обрабатывают аналогично примеру 1. формула изобретения
Способ получения L-фенилаланина энэиматическим расщеплением рацемата производного фенилаланина с -химотрипсином в среде, содержащей воду, отличающийся тем, что, с целью упрощения процесса, в качестве производного фенилаланина используют основание Шиффа этилового эфира фенилаланина с бензальдегидом и процесс проводят в двухфазной системе хлороформ - вода при объемном соотношении компонентов, равном 1;(3-10) соответственно.
Составитель Л.Иоффе
Редактор Н.Яцола Техред Л.Опийнык Корректор А.Осауленко
t»
Заказ 2231 Тираж 48) Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета пс изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
1l3035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул.Гагарина, 101
Выделяют О, 155 г L-РЬе (914) . Оптическая чистота 971. Пример 3. Процесс проводят аналогично примеру 1, используя 3 мл
СНС1> и 30 мл Н О. Выделяют 0,155 г
L-the (91ь). Оптическая чистота 974.
Пример 4 (сравнительный).
Процесс проводят аналогично примеру
1, используя 3 мл СНС1 и 45 мл Н О.
Выделяют 0.13 г L-Phe (774) . Оптическая чистота L-Phe 954. Пример 5 (сравнительный).
Процесс проводят аналогично примеру
1, используя 3 мл СНС1 и 3 мл Н.„.О.
В деляют 0,14 г L-Phe (834). Оптическа чистота 883.
Пример б (сравнительный).
Реакцию проводят аналогично примеру
1, но вместо 15 мл "I 0 используют
15 мл 0,1 И раствора фосфатного буфера . Выделяют О, 13 г 1.-РЬе (773) . !
Оптическая чистота 904. Анантиомерный анализ фенилаланина проводят методом ГЖХ с использование высокотемпературной фазы - третбутиламиа-Н-маргариноил-(S)-валина.
Аминокислоту анализируют в виде Нтрифторацетильного производно -о изопропилового эфира на стальной капилл рной колонке длиной 30 м, внутреннйй диаметр 0,25 мм, газ-носитель гелий, система деления пробы цельностеклянная.
Пример 7,(получение исходного субстрата - основания Шиффа этилово- . З5 го эфира D. L-фенилаланина и бензаг ьдегида).
Шиффово основание этилового эфира глицина с бензальдегидом в количестве 1,91 r (0,0l моль), 0,18 r
40 (0,005 моль) тетрабутиламмонийиодида в 5 мл СН С1 и 2 мл 503-ного раствора NaOH перемешивают при О С и медленно добавляют раствор 1,8 r (0,11 моль) бромистого бенэила в
5 мл CH Ñ1 . Перемешивают еще 3 ч при 0"С. Реакционную смесь экстрагируют СС1, промывают Н О и упаривают.
Получают 2,3 г целевого продукта (82 от теории) т кип. 180-184 С/
/0,5 мм рт.ст.
Технико-экономическая эффективность предлагаемого способа заключается в упрощении процесса, выражающемся в возможности использования более доступного исходного реагента - этилового эфира глицина (вместо предварительно получаемого этилового эфира фенилаланина), упрощении стадии рацемиэации побочного продукта производного 0-фенилаланина и упрощении стадии выделения целевого продукта (исключение операций подщелачивания и подкисления реакционной смеси).
