Способ получения тиминрибозида

 

Союз Советских

Сощиалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Кл 12р, 16

Заявлено 14.Ч111.1963 (№ 852460/23-4) с присоединением заявки №

Приоритет

МПК С 07д

УДК

Государственный комитет по дела изобретений и открытий СССР

Опубликовано 12.Х.1964. Бюллетень № 19

Дата опубликования описания 28.XII.1964

Авторы изобретения

Г. И. Елисеева, В. H. Шибаев и 3. И. Будовский

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТИМИНРИБОЗИДА

Подписная групгга ЛЯ 45

Тиминрибозид является составной частью растворимой РНК вЂ” основного переносчика информации при синтезе белка. E(pone того, синтез тиминрибозида позволит получить некоторые аналоги природных коферментов, играющих важную роль в превращениях углеводов.

До настоящего времени источником получения тиминрибозида являлись либо растворимая

РНК, содержащая ) 0,1% тиминрибозида, либо синтетические методы, например следующие: а) Способ рибозилирования тимина, заклгочающийся в конденсации дитимин-Hg с галоидным производным ацилированного сахара в толуоле или ксилоле с последующим удалением ацильной защиты гидролизом НСI в метаноле при комнатной температуре. Однако выход получаемых продуктов недостаточен— от 5 до 25%. б) Способ оксиметилирования уридина, заключающийся в конденсации уридина с формальдегидом при 50 С, отделении 5-оксиметилуридина от побочных продуктов на Дауэкс-1 с последующим гидрировапием над Pt02 в

50%-ной уксусной кислоте при 3 атхг в течение

9 час, Выход 5-оксиметилуридина не превышает 19%, 5-метилуридина — 18%.

Предложен способ получения тиминриоозида, заключающийся в том, что уридин конденсируют с диэтиламином и формальдегидом (реакция Манниха) при 90 С в течение 3 чае, затем полученный 5- (диэтиламинометилен)уридин элюируют на Дауэкс-50 1 н. аммиаком.

Выход 40 — 50%. Чистота продукта доказана методами электрофореза, бу.мажной хроматографии и УФ-спектром. 5-(Диэтиламинометилен) -уридин гидрируют над Р10, в этаноле при

70 С и 1 атхг в течение 10 час, подкисляют муравьиной кислотой, отделяют на Дауэкс-50 от

10 непрогидрировавшего продукта. Выход 5-метилуридина 50% . Чистота продукта доказана методами электрофореза и бумажной хроматографии.

Новый способ получения тиминрибозида от15 личается от известных тем, что для введения метильной группы в 5 положение уридина используется реакция Манниха с последующим гидрированием полученного 5- (диэтиламин)метиленуридина. Кроме того, выход на стадии

20 аминометилирования составляет 40 — 50% (в известном способе оксиметнлирования уридина 19%), при введении метильной группы по этому методу в уридине не образуется димеров и гидрирование протекает мягче. Выход

25 составляет 50 — б0%.

Пример. Получение тиминрибозида из уриднна а) Получение 5- (диэтилпм ггнохгетилен) -урало дина.

165461

Составитель И, В. Виха

Редактор Л. К. Ушакова Техред Ю. В. Баранов Корректор Т. В. Муллина

Заказ 3213/2 Тираж 500 Формат бум. 60)(90 /8 Объем 0,16 изд. л. Цена 5 коп.

ЦНИИГ1И Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2

К 500 мг (2 моль) 95е -ного уридина добавляют 2 мл (20 моль) диэтиламина и 7 мл воды и осторожно при встряхивании по каплям добавляют 1,2 мл (15 моль) 40 -ного раствора формальдегида, запаивают ампулу и греют на кипящей водяной бане 3 час. Ампулу вскрывают, реакционную смесь упаривают в вакууме, разбавляют водой до 300 — 400 мл, подкисляют муравьиной кислотой до рН 2 — 3 и пропускают через Дауэкс-50 (Н+ — форма, объем смолы

100 мл). При этом элюируется непрореагировавший уридин, который может быть использован вторично. 5- (Диэтиламинометилен) -уридин элюируют 120 — 150 мл 1 н. раствора аммиака. Раствор упаривают, остаток переосаждают из метанола ацетоном.

Получают 280 мг (42 в от теоретического)

5- (диэтиламинометилен) -уридина, строение которого доказывается данными электрофореза (при рН 4 вещество имеет положительный заряд); бумажной хроматографией: К = 0,07 в системе.вторичный бутанол, насыщенный водой (R> уридина 0,23) и УФ-спектра (рН 12, ) m„= 267 ммк; Z„= 6400; >;„= 245 ммк; гд п = 4500) . б) Гидрирование 5- (диэтиламинометилен)уридина.

100 мг (0,3 моль) 5- (диэтиламинометилен)уридина растворяют при нагревании в 2 мл воды, добавляют 8 мл этанола и 100 мг PtO и гидрируют 10 час при температуре 70 C

5 (1 атм). Раствор упаривают, разбавляют водой, подкисляют муравьиной кислотой до рН

2 — 3 и отделяют от непрореагировавшего 5- (диэтиламинометилен) -уридина пропусканием через Дауэкс-50 (Н+ — форма, объем смолы

10 40 мл).

Раствор упаривают, остаток высушивают, переосаждают из метанола ацетоном.

Выход 38 мг (50о ). Строение доказывается данными электрофореза (при рН 4 вещество

15 нейтрально), бумажной хроматографией: R<

0,35 в системе вторичный бутанол, насыщенный водой (Ку уридина = 0,23).

Полученный препарат превращают в тиминрибозид-5>-фосфат известным методом.

Предмет изобретения

Способ получения тиминрибозида из уридина и формальдегида с последующим гидрированием полученного продукта над Р10я отли25 чающийся тем, что, с целью упрощения процесса, уридин конденсируют с формальдегидом и диэтиламином и гидрирование ведут в этиловом спирте при температуре 70 С.