Способ получения пирогенала
Союз Советских
Социалистических
Республик
Оп ИСАНИ Е
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
l69I98
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 05.VI11. 1957 (№ 581571/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 11.ill.1965. Бюллетень № 6
Дата опубликования описания 17.III.1965
Кл. 30h, 14
Государственный
«омитет по делам изобретений и открытий СССР
МПК А 61k
УДК 615.779.90,002.2 (088.8) Авторы изобретения
Х. Х. Планельес, П. 3. Будницкая и С. М. Мушкатблат.
Ф., ля
Заявитель
i i- „. f j i. ã .. °;, 6,.,. .;., (СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПИРОГЕНАЛА
Подписная группа № 139
Изобретение относится к способам получения пирогенала, используемого в качестве пирогенного препарата.
Сущность предлагаемого способа заключается в том, что микробную массу культур
Sal. typhose u Ps. aeruginosa гидролизуют, надосадочную жидкость отделяют и упаривают с последующим многократным переосаждением целевого продукта органическим растворителем.
Для выращивания культур в реакторе отоирают гладкие формы колоний, крупные, серые, не образующие пигмента. Посевной материал готовят в матрицах на мясопептонном агаре.
Культуру из чашек пересеивают в пробирки, через двое суток смывают водой и засеивают матрицы. Реактор засеивают двухсуточной культурой. Выращивание проводят при 37 С, постоянном перемешивании и аэрации в течение 40 — 42 час.
Полученную микробную массу суспендируют в дистиллированной воде из расчета 0,5 л воды на 10 г сухой массы и доводят рН среды до 7,8 — 8,0 добавлением 2 н. щелочи. К смеси добавляют 0,025 г фермента и проводят гидролиз в бутыли емкостью 10 л в течение
5 суток. Для предохранения смеси от прорастания добавляют 30 — 40 мл толуола. Во время гидролиза рН среды поддерживают на исходном уровне добавлением щелочи. Через
2,5 суток добавляют еще 0,025 г фермента. По окончании гидролиза осадок отделяют от гидролизата сепарированием или центрифугированием.
5 Гидролизат упаривают в вакууме при 45—
50 С до /6 первоначального объема. Концентрат осветляют центрифугированием и при энергичном перемешивании вливают в десять объемов 96-градусного этанола, содержащего
10 0,5% ацетата натрия. Выпавший осадок после
18 — 20 час отстаивания отделяют центрифу ированием, четыре — пять раз растворяют в небольших порциях (по 20 мл) нагретой до кипения воды, каждый раз отделяя раствор
15 центрифугированием. Нерастворившийся осадок отбрасывают, а водные растворы, соединенные вместе, вливают при энергичном перемешивании в шесть объемов 95О/о-ного фенола, нагретого до 60 — 65 С. Выпавший осадок че20 рез 18 — 20 час отделяют центрифугированием и вновь несколько раз обрабатывают горячей водой.
Соединенные водные вытяжки вливают в шесть объемов 95%-ного фенола при 60 — 65 С.
25 Выпавший осадок отделяют центрифугпрованием, многократно обрабатывают нагретой до кипения водой и диализуют против водопроводной воды до полного удаления фенола. После дополнительного диализа против дистил30 лированной воды в течение суток диализат
169198
Предмет изобретения
Составитель В. А. Таратута
Редактор А. И. Байнова Техред Т. П. Курилко Корректор О. Б. Тюрина
Заказ 470/17 Тираж 975 Формат бум. 60)(90 /в Объем О,! изд. л. Цена 5 коп.
ЦНИИПИ Государственного комитета по делам изобретений и открытий СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2 центрифугируют. Осадок отбрасывают, а активное вещество выделяют вливанием надосадочной жидкости в десять объемов 9б-градусного этанола, содержащего 0,5О/в ацетата натрия. Выпавший пирогенал отделяют центрифугированием, промывают спиртом, ацетоном, эфиром и высушивают в вакуум-эксикаторе.
Способ получения пирогенала, отличающийся тем, что микробную массу культур Sal.
typhose u Ps. aeruginosa гидролизуют, надосадочную жидкость отделяют и упаривают с последующим многократным переосаждением целевого продукта органическим растворителем.
