Способ получения фильтрующихся форм бактерий

 

Изобретение относится к микробиологии, а именно к отбору фильтрующихся форм микроорганизмов. Целью изобретения является упрощение способа и повышение чистоты целевого продукта. Способ включает культивирование смеси микроорганизмов на поверхности двух мембранных фильтров, помещенных на твердую питательную среду. Между нижним и верхним фильтрами имеется капиллярный слой жидкости, в который через поры верхнего фильтра проходят фильтрующиеся формы и не проходят (в силу больших размеров) обычные клетки микроорганизма. Закрытые при этом плотной питательной средой поры нижнего фильтра не позволяют фильтрующимся формам проходить через них. Это обеспечивает локализацию фильтрующихся форм на верхней поверхности нижнего фильтра. Это исключает контаминацию фильтрующихся форм средой и обеспечивает получение фильтрующихся форм в смыве с поверхности нижнего фильтра.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11)1

fg))g С l2 И. 1/02

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЬП ИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4441038/30-13 (22) 15.06.88 (46) 30.12.90. Бюл. № 48 (71) Киевский научно-исследовательский институт Атизиатрии и пульмонологии им. акад. Ф.! .Яновского (72) И.П.Билько (53) 576.80. 92.29(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

¹- 1409662, rcë. С 12 О 1/04, 1986.

Авторское свидетел|-t тво СССР

¹ 1388426, кл. С 1? О 1/04, 1986. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕШ1Я >ИЛЬТРУИ! !ИХСЯ

ФОРМ БАКТГРИ11 (57) Изобретение относится к микробиологии, а именно к отбору Аильтруюшихся Аорм микроорганизмов. Целью изобретения является упрощение способа и повышение чистоты целевого проИзобретение относится к микробиологии, а именно к выделению фильтрующихся Аорм микроорганизмов.

Цель изобретения — упрощение способа и повышение чистоты целевого продукта.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. На поверхность мя-. сопептонного агара в условиях стерильности накладывают полупронинаемую мебрану, например, из целлофана диаметром, равным диаметру чашки

Петри, Стерильным шпателем плотно прижимают к поверхности мясопептонного агара так,чтобы между агаром и диском не было пузырьков воздуха.

2 дукта. Способ включает культивирование смеси микроорганизмов на поверхности двух мембранных Аильтров, помещенных на твердую питательную среду. Между нижним и верхним фильтрами имеется капиллярный слой. жидкости, в который через поры верхнего Аильтра проходят фильтрующиеся формы и не проходят (в силу больших размеров) обычные клетки микроорганизма. Закрытие при этом плотной питательной средой поры нижнего Аильтра не позволяют фильтрующимся формам проходить через них. Это обеспечивает локализацию Аильтрующихся форм на верхней поверхности нижнего Аильтра. Это исключает контаминацию Апльтруюшихся форм средой и обеспечивает получение фильтрующихся форм в смыве с поверхности нижнего Аильтра.

На свободную поверхность диска, наложенного на агар, наносят 2-3 капли стерильного Аизиологического раствора натрия хлорида и накладывают на него второй стерильный мембранный

Аильтр того же диаметра. Плотно прижимают его стерильным шпателем к поверхности нижнего диска так, чтобы между дисками не было пузырьков воз духа. На поверхность верхнего диска по общепринятой методике засевают культуру золотистого стафилококка, оставляют 0 5-1 см периметра диска свободньпч. Чашку Петри с посевом инкубируют при 37 С в течение 72 ч. Эатем стерильным пинцетом cHHMBloT верхний мембранный диск с выросшей куль1616989 фильтрующихся юорм бактерий и повысить его объективность.

Формула и з обретения

Составитель А.Федоров

Редактор М.Недолуженко Техред Л,0лийнык Корректор Т.Палий

Заказ 4097 Тираж 488 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r.Óær >род, ул. Гагарина,101 турой стафилококка. На оставшийся нижний диск наносят 2 мл стерильно го физиологического раствора натрия хлорида и осуществляют смыв с его по.верхности фильтрующихся форм золоти5 стого стафипококка.

Пример 2. Способ осуществляют аналогично примеру 1, но вместо мясопептонного агара в чашке 10

Петри по общепринятой методике готовят яичную среду Левенштейна-йенсена, верхний диск полупроницаемой целлофановой мембраны засевают микробактериями туберкулеза и посев инкубируют в течение 3 недель.

В смыве,с нижнего целлофанового диска получают фильтрующиеся формы микробактерий туберкулеза.

Таким образом, предложенный способ позволяет упростить получен

Способ получения фильтрующихся форм бактерий включающий выращивание смеси клеток с последующим выделением фильтрующихся форм с помощью мембранного фильтра с размером пор меньше размеров обычных клеток, б тл и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения способа и повышения чистоты целевого продукта, выращива" ние проводят на поверхности двух фильтров, наложенных последовательно друг на друга и на плотную питательную среду, а выделение фильтрующихся форм осуществляют с поверхности нижнего фильтра.