Способ получения [ @ j]-2 @ -о-сукцинилтирозинметилового эфира аденозин-3 @ ,5 @ -циклофосфата

 

Изобретение относится к меченым нуклеогидам, в частности к получению (-0-сукцинилтирозинметилового эфира аденозин -3 ,5 -циклофосфата, который находит применение в медицине . Цель изобретения - повышение выхода целевого продукта. Получение ведут обработкой 2 -0-сукцинилтирозинметилового эфир аденозин-3 ,5 - циклофосфата Ј г5 Xj-йодистым натрием в присутствии хлорамина Т в фосфатном буфере, имеющем рН 7, Г125 jl-йодистый натрий используют в молярном соотношении с исходным нуклеотидом

„„SU„„1641797 А i (5l)5 С 07 В 59/00

COOS СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ABTOPCHOMV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 4625723/04 1 (22) 26. 1 2, 88 (46) 15.04.91. Бюл. № 14 (71) Институт биоорганической химии

АН БССР и Белорусский государственный университет им.В.И.Ленина (72) М.В.Макаренко, Л.И,Бакович, А.Г.Лапко, М.B.Øoëóõ и Н.Н.Кузуб (53) 621.039.85 (088.8) (56) Schmidt К., Bayer H.P° . Purification of radioiodinated suceinyl

cyclic nucleotide tirosine methyl

esters by anion-exchange thin-layer

chromatography. — Anal. Biochemistry, 1984, v. 141, N 2, р. 499-502.

Изобретение относится к усовершенствованному способу получения

)J)-2 -О-сукцинилтирозинметиловоIK5 1 I »

ro эфира аденозин-3,5 -циклофосфаI та, который находит применение в медицине.

Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта.

Пример 1. В ампулу с 10 мкл

0,1 М фосфатного буфера (рН 7) вносят 4 мкл (2 мКи, 1 нмоль) («j)йодистого натрия, 10 мкл (15 мкг) хлорамина Т и 10 мкл (6,1 мкг, I

10 нмоль) 2 -0-сукцинилтризозинмети— лового эфира аденозин-3,5 -циклофосфата (молярное отношение йодида к

2 (54) СПОСОБ ПОЛУЧКНИ(! (« l)-2 -0

СУКЦИНИЛТИРОЗИНИЕТИЛОВОГО ЭФИРА АДЕНОЗИН-3,5 -ЦИКЛОФОСФАТА (57) Изобретение относится к меченым нуклеотидам, в частности к получению (« l)-2 — 0 — сукцинилтиро зинме тилов ого эфира аденозин(-3,5 -циклофосфата, который находит применение в медицине, Цель изобретения — повышение выхода целевого продукта. Получение ведут обработкой 2 -О-сукцинилтирозинметилового эфира аденозин-3,5—

I циклофосфата (g)-йодистым натрием в присутствии хлорамина Т в фосфатном буфере, имеющем рН 7, ((j$-йодистый натрий используют в молярном соотношении с исходным нуклеотидом (0,5-3):1, процесс ведут в течение

30 с. Выход увеличивается в 2,4

5,4 раза.. нуклеотиду О, 1: 1); Реакционную смесь перемешивают 30 с и останавливают реакцию прибавлением 50 мкл (7,1 мкг) метабисульфита натрия, Целевой продукт выделяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на колонке 4,6 х 250 мм с носителем в градиенте концентрации 702 метанола в 0,005 М КН РО буфере (рН 4) при скорости потока элюента

0,6 мл/мин, Выход 8,47.

Пример 2 ° Процесс проводят по примеру 1, используя 1,2! мкг (2 нмоль) исходного нуклеотида (молярное отношение к йодиду : 0,5).

Выход целевого продукта 38,1Х.

1641797

Составитель Д.Плутицкий

Техред М.Дидык .

Корректор А.Обручар

Редактор N.Ïåòðîâà

Заказ 1122 Тираж 239 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина, 101

Пример 3, Процесс проводят по примеру 1, используя 0,61 мкг (1 нмоль) исходного нуклеотида (малярное отношение к йодиду 1 : 1). Выход целевого продукта 71,2 .

Пример 4. Процесс проводят по примеру 1, используя О, 1 мкг (О, 33 нмоль) исходно го нуклео тида (молярное отношение к йодиду 1:3) .

Выход 36,7 .

Пример 5. Процесс проводят по примеру 1 используя 0,085 мкг (0,14 нмоль) исходного нуклеотида (молярное отношение к йодиду 1 : 7).

Выход целевого продукта 15,9 .

Удельная радиоактивность целевого продукта, получаемого предлагаемым способом, 2000 Ки/ммоль, радиохимическая чистота 95-99 .. Связыва" ние продукта избытком антител к циклическому аденозин-3,5 -фосфату cocj I тавляет 98 .

Предлагаемый способ за счет увели . чения количества (11-йодистого натрия на единицу исходного нуклеоти. да при одновременном уменьшении времени реакции позволяет повысить выход целевого продукта в 2,4-5,4 раза по сравнению с известным.

Формула и з о б р е т е н и ь

Способ получения 1 1 -2 -0-сукз цинилтирозинметилового зЖира аденозин-3,5 -циклофосфата обработкой (I

2 -0-сукцинилтироэинметилового эфи1 I ра аденозин-3,5 -циклофосфата

jg-йодистым натрием в присутст12$ вии хлорамина Т в фосфатном буфере, отлич ающий ся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, используют фосфатный буфер с рН 7, à L I -йодистый натрий иск г 1-»пользуют в молярном соотношении с исходным нуклеотидом (0,5-3,0):1, про-t цесс ведут в течение 30 с.