1-аминонафталин-5-сульфамиды в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз

Авторы патента:

C07C311/15 - сульфамиды с атомами серы сульфамидных групп, связанными с атомами углерода шестичленных ароматических колец

Изобретение относится к сульфамидам ароматических аминосульфокислот, в частности к 1-аминонафталин-5-сульфамидам ф-лы , где X-NHC₂H₅ (Ia), N(CH₃)₂ (Iб), NC₆H₁₂ (Iв), в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз. Цель - выявление соединений, позволяющих проводить анализ многокомпонентных смесей протеаз за счет селективно отщепляемых детектируемых групп. Получение ведут из 1-трифторацетиламинонафталин-5-сульфохлорида и водного раствора NH₇OH с последующей экстракцией этилацетатом или ацетоном. Выход, % , Т. пл. , С; брутто ф-ла: для соединения 1а - 90; 172; C₁₂H₁₅BrN₂O₂S; для 1б - 83; 125 - 127; C₁₂H₁₄N₂O₂S; для 1в - 86; 164 - 166; C₁₆H₂BrN₂O₂S. 2 табл.

Изобретение относится к производным аминонафталинсульфокислот, конкретно к новым 1-аминонафталин-5-сульфамидам общей формулы I -N (Ib) где Х - NHC₂H₅ (Ia); N(CH₃)₂ (Iб), в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз, которые могут найти применение в биохимии. Цель изобретения - выявление в ряду производных аминонафталинсульфокислот новых соединений, позволяющих при использовании их в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз проводить анализ многокомпонентных смесей протеаз за счет селективно отщепляемых детектируемых групп. Изобретение иллюстрируется примерами. П р и м е р 1. Триэтиламмонийаминонафталин-5-сульфонат. К суспензии 68 г (0,30 моль) аминонафталинсульфокислоты в 100 мл воды прибавляют 44 мл (0,32 моль) триэтиламина, нагревают до растворения, горячим фильтруют с углем и инфузорной землей. По охлаждении кристаллы отделяют фильтрованием, сушат на воздухе. Выход 94 г (96% ). Перекристаллизовывают из водного изопропанола, т. пл. 197^оС. Из-за значительного давления пара амина над веществом при нагревании анализируется в виде трифторацетильного производного. П р и м е р 2. 1-Трифторацетиламинонафталин-5-сульфонат триэтиламмония. К суспензии 13 г (0,04 моль) триэтиламмониевой соли 1-аминонафталин-5-сульфокислоты в 80 мл сухого эфира при перемешивании с обратным холодильником прибавляют 33.6 г (четырехкратный избыток) трифторуксусного ангидрида в 15 мл эфира. После прекращения кипения эфира раствор дополнительно кипятят 3 ч, оставляют на 12 ч при 20^оС. Осадок фильтруют, промывают эфиром при растирании, сушат в вакууме. Получают 16 г (95% ) аналитически чистого продукта. Кристаллы растворимы в воде, разлагаются при температуре выше 200^оС; УФ: 289 нм; R_f 0,57 (силуфол; бутанол 4, уксусная кислота 1, вода 2); растворы не обладают заметной флюоресценцией при УФ-облучении. Вычислено, % : С 51,42; Н 5,19; S 7,63; N 6,66. C₁₈H₂₃F₃N₂O₄S. Найдено, % : С 51,60; Н 5,19; S 7,59; N 7,09. Аналогично проводят реакцию в трифторуксусной кислоте (6 ч, 45-50^оС), упаривают досуха, переупаривают с бензолом, остаток промывают эфиром, сушат в вакууме. Выход 99% . П р и м е р 3. 1-Трифторацетиламинонафталин-5-сульфохлорид. К суспензии 9,6 г 1-трифторацетиламинонафталин-5-сульфоната триэтиламмония в 80 мл CHCl₃ прибавляют 6,5 г PCl₅, перемешивают при 50^оС 12 ч, охлаждают, фильтруют, к фильтрату добавляют 500 мл гексана и оставляют при -10^оС на 12 ч. Осадок отделяют фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси CHCl₃ - гексан. Получают 3,6 г аналитически чистого продукта. Дополнительные количества вещества выделяют обработкой маточных растворов. Общий выход 7,65 г (90% ), т. пл. 163^оС (из CHCl₃, неисправл. ), R_f 0,6 (силуфол; этилацетат: гексан, 2: 1). Вычислено, % : C 42,68; H 2,09; Cl 10,65; F 16,86; N 4,15. C₁₂H₇ClF₃NO₃S. Найдено, % : C 42,96; H 2,32; Cl 10,51; F 16,45; N 4,52. П р и м е р 4. 1-Аминонафталин-5-сульфамид. 6,7 г 1-трифторацетиламинонафталин-5-сульфохлорида суспендируют в 40 мл 25% -ного водного раствора NH₄OH. 6 ч при 37^оС, упаривают до 20 мл, экстрагируют этилацетатом, упаривают досуха, кристаллизуют из водного этанола, получают 4 г 1-аминонафталин-5-сульфамида. Другие примеры получения приведены в табл. 1 и 2. Применение получаемых аминонафталинсульфамидов (АНСА) для анализа смесей протеаз в варианте с применением высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) иллюстрируется следующим. АНСА-анализ - новый метод анализа смесей протеаз, в т. ч. близкой специфичности. Метод состоит в использовании в одном анализе смеси нескольких субстратов с определением продуктов протеолиза каждого из них. Для реализации метода в варианте с применением хроматографии предложены хромогенные субстраты с аминонафталинсульфамидными (АНСА) детектируемыми группами. Возможность раздельного определения продуктов протеолиза каждого из субстратов обеспечивается различием в строении заместителей, связанных с детектируемой АНСА-группой. Схема метода АНСА-анализа: > > Метод применяют также для характеристики индивидуальных протеаз и их смесей. Каждой протеазе может быть противопоставлен "АНСА-спектр" - набор чисел, характеризующий отношение кинетических констант расщепления серии субстратов. Информативность метода быстро (n²) растет с ростом числа субстратов в серии. Для рутинных исследований (без использования ЭВМ) протеазу можно характеризовать отношением кинетических констант расщепления двух субстратов, выбранным из всего множества подобных отношений по принципу максимального отклонения от средних для нескольких протеаз значений. Ниже приводится пример получения таких отношений с известными и новыми АНСА. К раствору 3.5 г карбобензоксиаргинина в 20 мл диметилформамида приливают при -10^оС полученный при -30^оС и выдержанный при 20^оС в течение 40 мин раствор 1 мл SOCl₂ в 10 мл диметилформамида, перемешивают 30 мин при 4^оС, охлаждают до -20^оС, добавляют раствор смеси аминонафталин-5-сульфамидов в 10 мл диметилформамида (по 1 ммоль каждого из пяти или эквимолярные количества каждого из серии, в сумме 5 ммоль). Вливают 1,5 мл триэтиламина, перемешивают 4 ч при 4^оС и 12 ч при 20^оС, добавляют триэтиламин до слабощелочной реакции, приливают 150 мл этилацетата и 200 мл гексана, осадок промывают смесью этилацетат - гексан, растворяют в смеси бутанол-вода, верхний слой отделяют, водный экстрагируют бутанолом. Бутанольные вытяжки промывают 5% -ным NaHCO₃, 10% -ным KHSO₄, упаривают досуха, заливают 40 мл 2,5 М HBr в СН₃COOH, через 1,5 ч добавляют 600 мл диэтилового эфира, осадок растворяют в воде, экстрагируют этилацетатом. Водный слой подщелачивают NaOH до рН 7,5, экстрагируют бутанолом, упаривают, растворяют в воде до концентрации 300 О. Е. = 300/мл, экстрагируют смесью этилацетат 4, гексан 1, экстракт отбрасывают. Водный слой упаривают в вакууме до удаления этилацетата и используют для приготовления субстратных смесей, растворяют аликвоту в буферном растворе (например, 0,05 М трис-HCl+0,005 М дитиотрента, рН 7,4) и разбавляя водой до концентрации 7,0 Е. = 300/мл. Добавляют один из не использованных для приготовления субстратной смеси АНСА в качестве внутреннего стандарта до концентрации 0,1 О. Е. = 350/мл. Аликвоту 0,5 мл помещают в кювету спектрофотометра, термостатируют, добавляют 10 мкл исследуемого фермента, регистрируют изменение поглощения = 360 нм во времени, по возрастании поглощения вдвое от первоначального останавливают реакции добавлением, например, ингибитора протеаз данного класса. Смесь экстрагируют 0,5 мл этилацетата, экстракт упаривают, остаток растворяют в 30 мкл 38% -ного ацетонитрила с добавкой 0,1 М ацетата аммония, анализируют ВЭЖХ с элюцией тем же раствором, интегрированием пиков определяют количества образовавшихся АНСА. (Колонка с 18 250х4,6 мм, 40, 1 мл/мин, УФ-детектор- = 265 нм). При определении относительных величин используют высоты пиков при графической регистрации хроматограммы. Примеры получаемых результатов. Сравнение индексов предпочтительности для папаина (П) и микросомной Sigma) (Л) с известными АНСА: для P ₌ _1,16 для ЛРP ₌ _0,88 oтношение 1,31. С новыми АНСА: для ПР _N _{< = 0,64 для ЛР _N _{< = 0,33 отношение 1,93 (значительное отличие от 1 в сравнении с незначительным в первом Индексы для протеазы Sigma 4630: c известными: РP ₌ _1,33 с новым: Р P ₌ _2,15 (при переходе к гомологу резкое улучшение кинетических констант). Таким образом, использование 1-аминонафталин-5-сульфамидов в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз позволяет проводить количественный анализ сложных смесей протеаз без их разделения и однозначно охарактеризовать каждую из протеаз соответствующим набором индексов селективности, что невозможно приводить с использованием известных соединений. (56) Авторское свидетельство СССР N 1419108, кл. С 07 С 143/80, 1986.}}

Формула изобретения

1-Аминонафталин-5-сульфамиды общей формулы

где X - NHC₂H₅, N(CH₃)₂,
в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Номер и год публикации бюллетеня: 8-2000

Извещение опубликовано: 20.03.2000

Изобретение относится к сульфамидам ароматических аминосульфокислот, в частности к получению замещенных 1-аминонафталин-5-сульфамидов ф-лы , где R1R2, C1-C15 -алкил, циклогексил или NR1N2 - остаток азациклогептана, пиперидина, морфолина или N -метилпиперазина

Способ получения 2-хлор-5-[n[3,5-ди-(метоксикарбонил)фенил] аминосульфонил]анилида-2-[3,5-ди-(метоксикарбонил)фенокси]- 2-[2-октадецилоксибензоил]уксусной кислоты // 1594172

N-[4-(3,3-диметилтриазено)-фенилсульфонил]бензамид, проявляющий диуретическую активность // 1095594

4-(3,3-диметилтриазено)-n,n-диацетилбензолсульфамид, проявляющий диуретическую активность // 1045562

4-пиперидиноазо-n,n-диацетилбензолсульфамид, проявляющий диуретическое действие // 1039157

Патент 271516 // 271516

Патент 265105 // 265105

Способ получения n,n'-биc(бehзoлcулbфohил)- алкансульфинамидинов // 249377

Способ получения пара-хлорбензолсульфо-хлорамида натрия // 104473

Ортозамещенные соединения - новые ингибиторы простагландинсинтазы, фармацевтические композиции их содержащие и способ ингибирования простагландин н синтазы // 2184109

Изобретение относится к ортозамещенным соединениям формулы I или их фармацевтически приемлемым солям, которые являются ингибиторами простагландин Н синтазы

Антидоты гербицида 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты // 2430915

Изобретение относится к химическим средствам защиты проростков и вегетирующих растений подсолнечника от повреждающего действия гербицида 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты

N,n-дизамещенные 5-аминонафталин-1-сульфамиды в качестве детектируемых групп для аиса-анализа протеаз // 1649787

Изобретение относится к арилсульфамидам, в частности к N, N-дизамещенным 5-аминонафталин-1-сульфамидам ф-лы, где группа NR1, R2 - (CH3)C2H5: N(CH3)C3H7; N(CH3)C3H7, N(CH3)C4H9, N(C2H5) - цикло C6H11, которые могут быть использованы в качестве детектируемых групп для АИСА-анализа протеаз

Способ получения 1-аминонафталин-5-сульфамидов // 1695634

Изобретение относится к способам получения производных 1-аминонафталин-5-сульфамида, а именно к способу получения 1-аминонафталин-5-сульфамидов общей формулы где R1, R2 = H, C1-4-алкил, циклогексил, гидрокси-C2-4-алкил, низший карбоксиалкиламино-С1-3-алкил, карбоксиамидо-С1-2-алкил или NR1R2являются остатком морфолина, пиперидина или пиперазина, которые могут быть использованы в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз

1-аминонафталин-5-сульфамиды в качестве детектируемых групп для анализа смесей протеаз и 1- бензилоксикарбониламинонафталин-5-сульфамиды в качестве полупродуктов для получения 1-аминонафталин-5-сульфамидов // 1695635

Способ получения производных феноксиэтиламина // 1788953

Замещенные бензоиламиноиндан-2-карбоновые кислоты и родственные соединения // 2477279

Соединения, ингибирующие (блокирующие) горький вкус, способы их применения и получения // 2522456

Изобретение относится к соединению общей формулы (I) или к его фармацевтически приемлемым солям, где Alk представляет собой C1-C6алкильную группу; G представляет собой C=O и Q представляет собой CR51R52 или NR51, где R51 и R52, будучи одинаковыми или разными, независимо один от другого, представляют собой H, C1-C6алкил, необязательно замещенный заместителем, выбранным из группы, включающей карбокси, фенокси, бензилокси, C1-С6алкокси и гидрокси; C3-C6циклоалкилС1-С6алкил; фенилС1-С6алкил, необязательно замещенный галогеном; фениламидоС1-С6алкил; фенилС1-С6алкиламидоС1-С6алкил, необязательно замещенный С1-С6алкоксигруппой; или R51 и R52, совместно с углеродным атомом, к которому они присоединены, образуют группу C=O или С2-С6алкенильную группу, необязательно замещенную фенилом; M1 представляет собой CR49, где R49 представляет собой H; M2 представляет собой CR50, где R50 представляет собой H; R38 представляет собой Н, C1-C6алкил, замещенный феноксигруппой; С3-С6циклоалкилС1-С6алкил; арилС1-С6алкил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, выбранными из группы, включающей С1-С6алкил, С1-С6алкокси, С1-С6алкоксикарбонил, карбоксил, N-метиламидо, гидрокси, С1-С6алкоксиС1-С6алкокси, С1-С6алкилтио, С1-С6алкилсульфинил, циано, галоген, перфторС1-С6алкил, нитро, формил, гидроксиС1-С6алкил и амино, причем арильный фрагмент представляет собой фенил или нафтил; и гетероарилС1-С6алкил, где гетероарильный фрагмент представляет собой пиридинил, необязательно замещенный 1 или 2 группами, выбранными из С1-С6алкокси или гидроксиС1-С6алкила, пиразолил или изоксазолил, замещенные 1 или 2 С1-С6алкильными группами; R47 и R48 представляют собой С1-С6алкил. Также изобретение относится к конкретным соединениям, к способу уменьшения или ослабления горького вкуса, к композиции пищевого/непищевого продукта или напитка или лекарственного средства для уменьшения или смягчения горького вкуса, к способу получения соединения формулы (I). Технический результат: получены новые соединения, полезные в качестве ингибиторов горького вкуса или модуляторов вкуса. 19 н. и 18 з.п. ф-лы, 6 ил., 12 табл., 186 пр. (I)

Способ получения метил 5-метокси-2-сульфоамоилбензоата // 2553258

Изобретение относится к способу получения метил 5-метокси-2-сульфоамоилбензоата, являющемуся многостадийным, включающему стадию амидирования и стадию кристаллизации, отличающемуся тем, что на первой стадии проводят этерификацию 3-метоксибензойной кислоты метанолом в среде органического растворителя в присутствии катализатора - серной кислоты, после чего полученную смесь кипятят в течение 10-11 часов, затем отмывают от серной кислоты и отгоняют растворитель, полученный метиловый эфир 3-метоксибензойной кислоты на второй стадии вводят в реакцию сульфохлорирования при температуре 55-60°C с четырехкратным избытком хлорсульфоновой кислоты, процесс идет 2,5-3 часа, полученный метил 2-(хлорсульфонил)-5-метоксибензоат выделяют выливанием реакционной массы на лед, на третьей стадии амидирования его вводят в реакцию с двухкратным избытком аммиака в среде органического водорастворимого растворителя (например, ацетонитрила или диоксана) при комнатной температуре, после чего полученный метил 5-метокси-2-сульфоамоилбензоат высаживают и кристаллизуют известным способом. Технический результат: разработан способ получения метил 5-метокси-2-сульфоамоилбензоата, отличающийся тем, что он включает в себя меньшее число стадий, отсутствие стадии окисления, снижение количества сточных вод.

Регуляторы роста растений // 2611418

Изобретение относится к химическим средствам, повышающим урожайность озимой пшеницы и подсолнечника. В качестве веществ, стимулирующих рост растений озимой пшеницы и подсолнечника, повышающих их урожайность, предложены N-замещенные нафталин-2-сульфониламиды формулы где R = CH3; C2H5, 2 табл., 4 пр.